| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1. 文献综述 | 第11-20页 |
| ·新城疫病毒的研究进展 | 第11-16页 |
| ·新城疫的命名与流行 | 第11页 |
| ·NDV生物学特性 | 第11-13页 |
| ·NDV的形态结构 | 第13-14页 |
| ·NDV的基因组及编码蛋白 | 第14-16页 |
| ·单克隆抗体的研究进展 | 第16-18页 |
| ·单克隆抗体 | 第16-17页 |
| ·杂交瘤技术 | 第17-18页 |
| ·新城疫诊断技术的研究进展 | 第18-20页 |
| ·酶联免疫吸附试验(ELISA) | 第18-19页 |
| ·荧光抗体技术 | 第19页 |
| ·RT-PCR | 第19-20页 |
| 2. 研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 3. 材料与方法 | 第21-34页 |
| ·试验材料 | 第21页 |
| ·耗材及主要仪器 | 第21-22页 |
| ·试剂配制 | 第22-24页 |
| ·试验方法 | 第24-31页 |
| ·全病毒纯化抗原的制备 | 第24页 |
| ·抗原最佳包被浓度与对照血清最佳稀释度的确定 | 第24-25页 |
| ·小鼠免疫程序 | 第25页 |
| ·细胞融合 | 第25-27页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第27页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆化,冻存与复苏 | 第27-29页 |
| ·杂交瘤细胞的染色体分析 | 第29页 |
| ·抗免疫球蛋白的类别和亚类鉴定 | 第29-30页 |
| ·杂交瘤细胞稳定性测定 | 第30页 |
| ·腹水单克隆抗体的效价测定 | 第30页 |
| ·腹水单克隆抗体的纯化 | 第30-31页 |
| ·单克隆抗体蛋白质含量的测定 | 第31页 |
| ·单克隆抗体纯度的鉴定 | 第31页 |
| ·双抗体夹心ELISA方法的建立 | 第31-34页 |
| ·单克隆抗体的标记与酶标记抗体亲和层析法纯化 | 第31-32页 |
| ·抗体最佳包被浓度与酶标记抗体最佳工作浓度的确定 | 第32页 |
| ·双抗体夹心ELISA阴阳性界限的确定 | 第32-33页 |
| ·特异性试验 | 第33页 |
| ·重复性试验 | 第33页 |
| ·敏感性试验 | 第33页 |
| ·临床样品的检测 | 第33页 |
| ·对新城疫病毒疫苗株和野毒株的检测 | 第33-34页 |
| 4. 结果与分析 | 第34-47页 |
| ·全病毒纯化抗原的制备 | 第34页 |
| ·最佳抗原包被浓度和最佳血清稀释度的确定 | 第34-35页 |
| ·免疫小鼠抗体效价的检测 | 第35页 |
| ·细胞融合 | 第35-36页 |
| ·单克隆抗体的筛选与单克隆阳性杂交瘤细胞株的建立 | 第36-38页 |
| ·全病毒抗原间接ELISA方法 | 第36-37页 |
| ·间接免疫荧光(IFA) | 第37-38页 |
| ·单克隆抗体的初步鉴定 | 第38-39页 |
| ·杂交瘤细胞染色体计数 | 第38页 |
| ·单克隆抗体的亚类鉴定 | 第38-39页 |
| ·杂交瘤细胞稳定性测定结果 | 第39页 |
| ·单克隆抗体大规模生产 | 第39-41页 |
| ·单克隆抗体腹水的制备 | 第39页 |
| ·腹水单克隆抗体的效价测定 | 第39-40页 |
| ·单克隆抗体蛋白含量的测定 | 第40页 |
| ·单克隆抗体的SDS-PAGE电泳 | 第40-41页 |
| ·双抗体夹心ELISA方法的建立 | 第41-47页 |
| ·单克隆抗体的标记 | 第41-42页 |
| ·双抗体夹心ELISA方法抗体最佳包被抗体与酶标抗体配对的确定 | 第42-43页 |
| ·双抗体夹心ELISA阴阳界限的确定 | 第43页 |
| ·特异性试验 | 第43页 |
| ·重复性试验 | 第43-44页 |
| ·敏感性试验 | 第44-45页 |
| ·新城疫病毒感染临床样品的检测 | 第45-46页 |
| ·对新城疫病毒疫苗株和野毒株的检测 | 第46-47页 |
| 5. 讨论 | 第47-50页 |
| ·制备抗原的重要性 | 第47页 |
| ·免疫动物与抗体水平的检测 | 第47页 |
| ·细胞融合 | 第47-48页 |
| ·杂交瘤细胞的克隆及冻存复苏 | 第48页 |
| ·杂交瘤细胞株建立过程污染控制 | 第48页 |
| ·单克隆抗体特异性的鉴定 | 第48页 |
| ·辣根过氧化物酶标记单克隆抗体 | 第48-49页 |
| ·包被抗体和酶标抗体最佳配对的选择 | 第49页 |
| ·封闭物的选择 | 第49页 |
| ·临界值的确定 | 第49页 |
| ·双抗体夹心ELISA方法的特异性、敏感性试验 | 第49-50页 |
| 6. 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 致谢 | 第56页 |