摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
1. 文献综述 | 第11-28页 |
·H5N1流感病毒的爆发及生物学特性 | 第11-21页 |
·流感病毒 | 第11页 |
·禽流感病毒 | 第11页 |
·高致病性H5N1禽流感病毒的爆发 | 第11-12页 |
·中国的HPAI H5N1流感病毒 | 第12-17页 |
·遗传进化分析 | 第12-14页 |
·青海湖疫情 | 第14-15页 |
·猪感染情况 | 第15页 |
·人感染H5N1病毒情况 | 第15-17页 |
·HPAI H5N1病毒的传播 | 第17-18页 |
·决定H5N1病毒毒力、致病力和宿主范围的分子机制 | 第18-21页 |
·HA | 第18-19页 |
·PB2 | 第19-20页 |
·NS1 | 第20-21页 |
·PB1-F2 | 第21页 |
·H5N1流感病毒HA结构研究进展 | 第21-25页 |
·结构概述 | 第22-24页 |
·H5N1抗原变异 | 第24-25页 |
·受体结合区域 | 第25页 |
·RBD突变分析 | 第25页 |
·H5N1禽流感病毒抗原表位研究进展 | 第25-27页 |
·HA抗原表位研究进展 | 第27-28页 |
2. H5N1禽流感病毒抗原特性分析 | 第28-48页 |
·前言 | 第28-29页 |
·材料与方法 | 第29-37页 |
·材料 | 第29-33页 |
·抗体 | 第29页 |
·细胞及鸡胚 | 第29页 |
·病毒 | 第29-30页 |
·菌株和质粒 | 第30页 |
·引物 | 第30-31页 |
·主要试剂及其配制 | 第31-33页 |
·方法 | 第33-37页 |
·Western-blot | 第33页 |
·间接免疫荧光检测 | 第33页 |
·病毒的增殖及收集 | 第33页 |
·1%鸡红细胞悬液和4单位抗原的制备 | 第33页 |
·血凝试验及血凝抑制试验 | 第33-34页 |
·细胞培养 | 第34页 |
·病毒TCID_(50)测定 | 第34页 |
·中和实验 | 第34页 |
·RNA抽提的试剂和器材的DEPC处理 | 第34页 |
·病毒RNA的提取 | 第34页 |
·RT-PCR及PCR | 第34-35页 |
·PCR产物回收 | 第35页 |
·连接反应 | 第35页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第35页 |
·连接产物的转化 | 第35-36页 |
·HA重组质粒的PCR鉴定 | 第36页 |
·序列测定和比对 | 第36页 |
·HA晶体模型上氨基酸突变位点分析 | 第36-37页 |
·结果与分析 | 第37-46页 |
·单抗活性 | 第37页 |
·间接免疫荧光检测结果 | 第37-38页 |
·血凝试验结果 | 第38页 |
·单抗对10株病毒的HI效价 | 第38页 |
·TCID_(50)的测定 | 第38-39页 |
·单抗对10株病毒的中和效价 | 第39页 |
·HA基因PCR结果 | 第39页 |
·HA重组质粒的PCR鉴定结果 | 第39-40页 |
·HA基因序列比对结果 | 第40页 |
·HA基因遗传进化分析 | 第40-42页 |
·病毒HA蛋白突变位点分析 | 第42页 |
·HA晶体结构上的氨基酸突变位点 | 第42-46页 |
·讨论 | 第46-48页 |
3. 流感病毒混合感染对小鼠的致病性分析 | 第48-60页 |
·前言 | 第48-49页 |
·材料与方法 | 第49-50页 |
·材料 | 第49页 |
·病毒 | 第49页 |
·小鼠 | 第49页 |
·方法 | 第49-50页 |
·病毒TCID_(50)测定 | 第49页 |
·混合感染小鼠动物模型的致病性评价 | 第49-50页 |
·混合感染小鼠病理变化及肺脏炎性因子含量的测定 | 第50页 |
·结果与分析 | 第50-58页 |
·感染小鼠的存活率 | 第50页 |
·感染小鼠的死亡率和MDT规律 | 第50-51页 |
·感染小鼠的体重变化规律 | 第51-52页 |
·感染小鼠的临床症状和病理变化 | 第52-56页 |
·混合感染小鼠肺脏炎性因子含量 | 第56-58页 |
·讨论 | 第58-60页 |
小结 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
附录 | 第70页 |