摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
第1章 综述 | 第10-18页 |
·micro-RNA | 第10-13页 |
·microRNAs简介及发现 | 第10-11页 |
·microRNA的生物合成及作用方式 | 第11页 |
·miRNAs的生物功能 | 第11-12页 |
·miRNAs和疾病诊断 | 第12页 |
·microRNAs对脂代谢的研究 | 第12-13页 |
·miRNA-181介绍 | 第13页 |
·脂质的功能 | 第13-14页 |
·饱和脂肪酸的氧化和合成 | 第13-14页 |
·IDH简介 | 第14-18页 |
·IDH研究现状 | 第15-18页 |
第2章 实验材料和方法 | 第18-34页 |
·实验耗材及仪器 | 第18页 |
·PCR-聚合酶链式反应 | 第18-19页 |
·琼脂糖凝胶回收 | 第19-20页 |
·DNA片段或载体的双酶切反应 | 第20页 |
·连接和转化 | 第20-22页 |
·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第22-23页 |
·碱裂解法抽提质粒 | 第23页 |
·大肠杆菌质粒试剂盒抽提 | 第23-24页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第24-26页 |
·WesternBlot | 第26-27页 |
·Total RNA的提取 | 第27页 |
·荧光时实定量PCR | 第27-28页 |
·细胞培养 | 第28-31页 |
·细胞 | 第28页 |
·细胞培养所需试剂 | 第28页 |
·实验耗材 | 第28-29页 |
·细胞复苏及培养 | 第29页 |
·细胞传代 | 第29-30页 |
·细胞冻存 | 第30页 |
·细胞计数 | 第30页 |
·细胞转染 | 第30-31页 |
·油红染色 | 第31页 |
·动物实验 | 第31-34页 |
·小鼠饲养 | 第32页 |
·分离小鼠组织 | 第32页 |
·动物组织研磨 | 第32页 |
·动物体液采集 | 第32-34页 |
第3章 结果与讨论 | 第34-42页 |
第4章 通过酵母双杂交技术寻找与MTH1结合的蛋白 | 第42-52页 |
·酵母双杂交原理 | 第42-43页 |
·实验所需试剂配置方法 | 第43-44页 |
·操作步骤 | 第44-50页 |
·酵母表型的验证 | 第44页 |
·自激活检测 | 第44-45页 |
·酵母细胞中蛋白表达检测 | 第45-46页 |
·文库mating | 第46-47页 |
·Colony-lift Filter Assay | 第47页 |
·UNIQ-10柱式酵母质粒DNA抽提试剂盒 | 第47-48页 |
·苯酚-氯仿-异丙醇法抽提酵母质粒 | 第48-49页 |
·电转化感受态细胞的制备 | 第49-50页 |
·电激转化 | 第50页 |
·通过PCR方法消除重复克隆 | 第50页 |
·实验结果 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-54页 |
致谢 | 第54-55页 |