| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-15页 |
| 1 前言 | 第15-39页 |
| ·细菌基因组学的研究进展 | 第16-24页 |
| ·细菌基因组学的发展历史 | 第16-17页 |
| ·细菌全基因组框架测定的策略 | 第17-20页 |
| ·细菌基因组学研究内容 | 第20-24页 |
| ·无乳链球菌的生物学特性 | 第24-30页 |
| ·无乳链球菌的病原学特性 | 第24页 |
| ·无乳链球菌的流行病学研究 | 第24-26页 |
| ·无乳链球菌的致病机制 | 第26-27页 |
| ·无乳链球菌致病性与毒力因子研究 | 第27-29页 |
| ·罗非鱼无乳链球菌防控措施 | 第29页 |
| ·无乳链球菌的基因组学研究现状 | 第29-30页 |
| ·筛选疫苗靶基因的新方法 | 第30-33页 |
| ·基因组技术在疫苗开发中的研究 | 第31-32页 |
| ·蛋白质组学技术在疫苗开发中的研究 | 第32页 |
| ·DNA 芯片技术在疫苗研制上的研究 | 第32-33页 |
| ·多位点序列分型在病原微生物中的应用研究 | 第33-37页 |
| ·常见的病原微生物基因分型方法 | 第34-35页 |
| ·多位点序列分析（multi-locus sequence typing，MLST） | 第35-37页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第37-39页 |
| 2 我国南方地区罗非鱼源无乳链球菌的分子流行病学研究 | 第39-62页 |
| ·罗非鱼源无乳链球菌的分离、鉴定 | 第39-47页 |
| ·实验材料 | 第39页 |
| ·实验动物 | 第39-40页 |
| ·实验方法 | 第40-42页 |
| ·结果 | 第42-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| ·应用 MLST 系统进行罗非鱼源无乳链球菌的分子流行病学研究 | 第47-58页 |
| ·实验材料 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-51页 |
| ·结果 | 第51-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| ·无乳链球菌对罗非鱼致病性研究 | 第58-62页 |
| ·实验动物 | 第58页 |
| ·主要仪器 | 第58-59页 |
| ·实验方法 | 第59页 |
| ·结果 | 第59-60页 |
| ·讨论 | 第60-62页 |
| 3 STREPTOCOCCUS AGALACTIAE ZQ0910 株全基因组测序、基因注释及疫苗候选分子筛选 | 第62-74页 |
| ·S.AGALACTIAE ZQ0910 全基因组测序及基因注释 | 第62-74页 |
| ·实验材料 | 第62页 |
| ·实验方法 | 第62-64页 |
| ·结果 | 第64-70页 |
| ·讨论 | 第70-74页 |
| 4 罗非鱼源无乳链球菌疫苗候选分子的克隆、表达和纯化 | 第74-106页 |
| ·实验材料 | 第74-77页 |
| ·载体及受体菌 | 第74页 |
| ·实验仪器 | 第74-75页 |
| ·主要试剂 | 第75页 |
| ·主要溶液和试剂的配制 | 第75页 |
| ·蛋白电泳所用溶液 | 第75-76页 |
| ·提取包涵体时所用试剂 | 第76-77页 |
| ·实验方法 | 第77-83页 |
| ·无乳链球菌 S. agalactiae ZQ0910 基因组 DNA 的提取 | 第77页 |
| ·DH5α感受态的制备 | 第77页 |
| ·基因全长的扩增 | 第77-83页 |
| ·结果 | 第83-103页 |
| ·5 个候选基因的 PCR 扩增 | 第83-84页 |
| ·5 个重组质双酶切及核苷酸测序鉴定 | 第84页 |
| ·5 个疫苗候选基因序列特征分析及同源性比较分析 | 第84-94页 |
| ·5 个候选疫苗分子重组质粒的诱导表达 | 第94-95页 |
| ·重组融合蛋白表达分析及纯化 | 第95-103页 |
| ·讨论 | 第103-106页 |
| 5 疫苗候选分子对罗非鱼的免疫保护作用研究 | 第106-114页 |
| ·实验材料 | 第107-108页 |
| ·菌株 | 第107页 |
| ·实验动物 | 第107页 |
| ·主要试剂 | 第107页 |
| ·酶连免疫吸附测定试验所用溶液和试剂 | 第107页 |
| ·主要仪器 | 第107-108页 |
| ·实验方法 | 第108-109页 |
| ·免疫原的制备 | 第108页 |
| ·抗原安全性测试 | 第108页 |
| ·动物免疫 | 第108页 |
| ·攻毒菌液活化 | 第108页 |
| ·取血与攻毒 | 第108-109页 |
| ·血清效价的测定 | 第109页 |
| ·回归感染试验鱼体病原菌分离鉴定 | 第109页 |
| ·结果 | 第109-112页 |
| ·安全性评价 | 第109-110页 |
| ·血清抗体效价检测 | 第110页 |
| ·免疫保护率 | 第110-112页 |
| ·病原菌分离鉴定结果 | 第112页 |
| ·讨论 | 第112-114页 |
| 6 罗非鱼无乳链球菌重组 DNA 疫苗的构建及免疫保护性研究 | 第114-128页 |
| ·实验材料 | 第114-116页 |
| ·菌株 | 第114-115页 |
| ·试剂 | 第115页 |
| ·试验动物 | 第115页 |
| ·主要仪器 | 第115-116页 |
| ·实验方法 | 第116-121页 |
| ·真核重组质粒 pcDNA-Sip 的构建 | 第116页 |
| ·引物设计 | 第116页 |
| ·目的基因的 PCR 扩增 | 第116-117页 |
| ·目的基因的克隆和序列测定 | 第117页 |
| ·大量真核重组质粒 pcDNA-Sip | 第117-118页 |
| ·免疫实验鱼 | 第118页 |
| ·DNA 水平检测质粒的转染 | 第118-120页 |
| ·ELISA 检测血清中抗体滴度 | 第120页 |
| ·攻毒保护试验 | 第120-121页 |
| ·结果 | 第121-124页 |
| ·重组质粒 pcDNA-Sip 的构建 | 第121页 |
| ·质粒浓度和纯度检测 | 第121-122页 |
| ·吉富罗非鱼体内重组质粒分布的 PCR 检测结果 | 第122-123页 |
| ·mRNA 水平检测目的基因 | 第123页 |
| ·抗体效价检测 | 第123-124页 |
| ·免疫保护率 | 第124页 |
| ·讨论 | 第124-128页 |
| ·鱼用 DNA 疫苗的安全性 | 第124-125页 |
| ·表达质粒的设计 | 第125页 |
| ·目的基因的表达 | 第125-126页 |
| ·鱼类 DNA 疫苗的接种方式及剂量 | 第126-127页 |
| ·DNA 疫苗的免疫应答 | 第127-128页 |
| 参考文献 | 第128-145页 |
| 全文总结 | 第145-147页 |
| 致谢 | 第147-149页 |
| 个人简历 | 第149页 |
| 发表的学术论文 | 第149-150页 |
| 研究成果 | 第150-151页 |
