脂肪酶PaL和R-2-氯丙酸脱卤酶dehDIV-R的结晶及手性识别过程研究
| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 目录 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-29页 |
| 1. 文献综述 | 第12-29页 |
| ·引言 | 第12页 |
| ·酶的结构与功能的研究 | 第12-20页 |
| ·蛋白质的结构解析方法 | 第12-14页 |
| ·X-ray衍射晶体学 | 第14-18页 |
| ·酶的理性设计 | 第18-19页 |
| ·酶的同源模建 | 第19-20页 |
| ·脱卤酶与脂肪酶简介 | 第20-27页 |
| ·脱卤酶研究进展 | 第20-23页 |
| ·脂肪酶研究进展 | 第23-27页 |
| ·本课题的研究思路 | 第27-29页 |
| 第二章 脂肪酶PAL的结晶 | 第29-54页 |
| ·引言 | 第29页 |
| ·材料与方法 | 第29-34页 |
| ·材料 | 第29-32页 |
| ·方法 | 第32-34页 |
| ·结果与讨论 | 第34-52页 |
| ·Pal蛋白分析 | 第34-35页 |
| ·Pal酶18℃的初筛 | 第35-39页 |
| ·Pal酶4℃的初筛 | 第39-46页 |
| ·纯化条件优化后的Pal酶18℃的初筛 | 第46-50页 |
| ·Pal硒代蛋白晶体的生长 | 第50-52页 |
| ·本章小结 | 第52-54页 |
| 第三章 脱卤酶的结晶 | 第54-64页 |
| ·引言 | 第54页 |
| ·材料与方法 | 第54页 |
| ·材料 | 第54页 |
| ·方法 | 第54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-63页 |
| ·蛋白BLAST分析 | 第54-55页 |
| ·dehDIV-R表达条件的筛选 | 第55-56页 |
| ·dehDIV-R纯化条件的筛选 | 第56-61页 |
| ·dehDIV-R晶体的生长 | 第61-63页 |
| ·本章小结 | 第63-64页 |
| 第四章 R-2-氯丙酸脱卤酶的手性识别过程研究 | 第64-80页 |
| ·引言 | 第64页 |
| ·材料与方法 | 第64-70页 |
| ·材料 | 第64-66页 |
| ·方法 | 第66-70页 |
| ·实验结果与讨论 | 第70-79页 |
| ·dehDIV-R反应机理的确定 | 第70-71页 |
| ·手性识别过程研究 | 第71-75页 |
| ·手性识别过程的验证 | 第75-78页 |
| ·定点突变及突变酶的酶活测定 | 第78-79页 |
| ·本章小结 | 第79-80页 |
| 第五章 结论与展望 | 第80-82页 |
| ·结论 | 第80页 |
| ·展望 | 第80-82页 |
| 参考文献 | 第82-89页 |
| 附录 | 第89页 |
