| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一部分 前言 | 第11-22页 |
| 1 钾素的生理功能与应用现状 | 第11-12页 |
| ·钾素的生理功能 | 第11页 |
| ·植物钾素营养状况与改良途径 | 第11-12页 |
| 2 高等植物中钾离子转运体相关蛋白的研究 | 第12-18页 |
| ·高等植物K~+吸收和调节机制的研究 | 第12-13页 |
| ·拟南芥中钾吸收与转运相关蛋白的研究 | 第13-17页 |
| ·水稻中钾吸收与转运相关蛋白的研究 | 第17-18页 |
| 3 植物K~+营养基因型差异及耐低钾水稻基因型的筛选 | 第18-20页 |
| ·植物钾营养基因型差异 | 第18-19页 |
| ·耐低钾水稻基因型的筛选 | 第19-20页 |
| 4 本文研究目的与意义 | 第20-22页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第22-37页 |
| 1 材料与试剂 | 第22-24页 |
| ·植物材料 | 第22页 |
| ·菌株和载体 | 第22页 |
| ·缓冲液的配制 | 第22-23页 |
| ·酶和试剂 | 第23页 |
| ·主要试验仪器设备 | 第23-24页 |
| 2 试验方法 | 第24-37页 |
| ·pWM101-PaHAKl过表达载体的构建 | 第24-27页 |
| ·PCR的引物设计 | 第24页 |
| ·质粒pWM101和pYPGE15-PaHAK1的提取 | 第24-25页 |
| ·质粒pWM101和pYPGE15-PaHAK1的双酶切 | 第25页 |
| ·目的片段pWM101和PaHAK1的连接 | 第25页 |
| ·大肠杆菌DH5α超级感受态细胞的制备及热激转化 | 第25-26页 |
| ·目的基因的双酶切鉴定 | 第26-27页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥转化 | 第27-29页 |
| ·农杆菌GV3101感受态细胞的制备及电击转化 | 第27-28页 |
| ·菌落PCR检测 | 第28页 |
| ·拟南芥植株的培养 | 第28-29页 |
| ·农杆菌GV3101的培养 | 第29页 |
| ·花序的浸润 | 第29页 |
| ·拟南芥转化株的抗性筛选 | 第29-30页 |
| ·转PaHAK1基因拟南芥的分子检测 | 第30-33页 |
| ·拟南芥株系叶片总DNA的提取 | 第30页 |
| ·转PaHAK1基因拟南芥的PCR检测 | 第30-31页 |
| ·转PaHAK1拟南芥株系叶片组织RNA的提取 | 第31-32页 |
| ·转PaHAK1基因拟南芥的半定量PCR检测 | 第32-33页 |
| ·拟南芥突变体hak5、akt1功能回复研究 | 第33-34页 |
| ·水稻材料的培养 | 第34-35页 |
| ·水稻的预处理及催芽 | 第34页 |
| ·水稻幼苗培养 | 第34-35页 |
| ·转PaHAK1基因水稻的分子检测 | 第35页 |
| ·转PaHAK1基因水稻株系叶片总DNA的提取 | 第35页 |
| ·转PaHAK1基因水稻的PCR检测 | 第35页 |
| ·转PaHAK1基因水稻叶片组织RNA的提取 | 第35页 |
| ·转PaHAK1基因水稻的半定量PCR检测 | 第35页 |
| ·转PaHAK1水稻株系吸钾动力学测定 | 第35-36页 |
| ·样品的收集 | 第35-36页 |
| ·测定方法 | 第36页 |
| ·转PaHAK1水稻株系的表型分析 | 第36-37页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第37-49页 |
| 1 pWM101-PaHAK1过表达载体的构建 | 第37-38页 |
| ·目的片段pWM101、PaHAK1的回收检测 | 第37页 |
| ·质粒pWM101-PaHAK1双酶切检测 | 第37-38页 |
| ·pWM101-PaHAK1和空质粒pWM101菌落PCR检测 | 第38页 |
| 2 拟南芥转化株的抗性筛选 | 第38-39页 |
| 3 转PaHAK1基因拟南芥的分子检测 | 第39-40页 |
| ·转PaHAK1基因拟南芥的PCR检测 | 第39页 |
| ·转PaHAK1基因拟南芥的半定量PCR检测 | 第39-40页 |
| 4 拟南芥hak5、akt1突变体功能回复研究 | 第40-44页 |
| ·不同钾浓度处理下转PaHAK1基因拟南芥的生长情况 | 第40-42页 |
| ·低钾胁迫后转PaHAK1基因拟南芥恢复生长的研究 | 第42页 |
| ·转PaHAK1基因拟南芥的表型分析 | 第42-44页 |
| 5 转PaHAK1基因水稻的分子检测 | 第44页 |
| ·转PaHAK1基因水稻株系的PCR检测 | 第44页 |
| ·转PaHAK1基因水稻的半定量PCR检测 | 第44页 |
| 6 转PaHAK1基因水稻株系K~+吸收动力学分析 | 第44-47页 |
| ·不同转PaHAKI水稻株系绅离子消耗曲线分析 | 第44-46页 |
| ·不同处理下不同转PaHAK1水稻株系K~+吸收动力学参数分析 | 第46-47页 |
| 7 转PaHAK1水稻的表型分析 | 第47-49页 |
| 第四部分 讨论 | 第49-51页 |
| 1 在拟南芥中超表达PaHAK1基因 | 第49页 |
| 2 PaHAK1基因在高亲和性K~+吸收上发挥重要功能 | 第49-50页 |
| 3 转PaHAK1水稻钾高效株系的筛选 | 第50-51页 |
| 全文总结及本研究的创新点 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-61页 |
| 附录：缩略词 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 作者简介 | 第63页 |
