摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-16页 |
前言 | 第16-18页 |
第一部分 构建电磁分选微流控芯片筛选骨髓间充质干细胞 | 第18-37页 |
材料和方法 | 第18-27页 |
1. 材料 | 第18-20页 |
·主要仪器 | 第18-19页 |
·细胞与试剂 | 第19-20页 |
·实验动物 | 第20页 |
2. 实验方法 | 第20-27页 |
·电磁细胞分选微流控芯片设计 | 第20-21页 |
·芯片制作 | 第21-22页 |
·电磁分选微流控系统构建 | 第22-23页 |
·电磁分选微流控系统性能测试 | 第23-24页 |
·大鼠骨髓单核细胞的粗分离 | 第24-25页 |
·电磁分选微流控芯片上进行大鼠 BMSCs 分选离 | 第25页 |
·大鼠 BMSCs 的培养、传代、冻存和复苏 | 第25-26页 |
·BMSCs 鉴定 | 第26-27页 |
3. 统计学分析 | 第27页 |
结果 | 第27-30页 |
1. 电磁分选微流控芯片细胞分选条件的检测 | 第27-28页 |
2. 骨髓单核细胞经磁性分选后的免疫表型测定 | 第28-29页 |
3. 干细胞多向分化鉴定 | 第29-30页 |
讨论 | 第30-33页 |
1. 本实验干细胞分选方法与其它干细胞分选方法的比较 | 第30-32页 |
2. 电磁分选微流控芯片的细胞分选原理 | 第32页 |
3. 去除分选 + 阳性分选纯化 BMSCs | 第32-33页 |
小结 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-37页 |
第二部分 构建浓度梯度芯片诱导骨髓间充质干细胞向类雪旺细胞分化 | 第37-54页 |
材料和方法 | 第38-43页 |
1. 材料 | 第38-39页 |
·主要仪器 | 第38页 |
·主要试剂 | 第38-39页 |
·雪旺细胞诱导剂的配制 | 第39页 |
2. 实验方法 | 第39-43页 |
·浓度梯度芯片设计 | 第39-41页 |
·芯片制作 | 第41页 |
·微流控芯片上行细胞诱导分化 | 第41-42页 |
·微流控芯片上行雪旺细胞标记物的免疫细胞化学检测 | 第42-43页 |
3. 统计学分析 | 第43页 |
结果 | 第43-46页 |
1. 细胞在芯片上诱导后的形态变化 | 第43页 |
2. 芯片上行雪旺细胞标记物的免疫细胞化学染色分析 | 第43-46页 |
讨论 | 第46-49页 |
1. BMSCs 向雪旺细胞定向分化 | 第46-47页 |
2. 微流控芯片高通量分析雪旺细胞诱导剂的最佳配伍比例 | 第47-49页 |
小结 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-54页 |
第三部分 优化诱导后的类雪旺细胞促进轴突再生的功能学研究 | 第54-70页 |
材料和方法 | 第54-61页 |
1. 材料 | 第54-56页 |
·主要仪器 | 第54-55页 |
·主要试剂 | 第55页 |
·实验动物 | 第55-56页 |
2. 实验方法 | 第56-61页 |
·大鼠雪旺细胞培养 | 第56页 |
·大鼠脊髓背根神经元(DRG)培养 | 第56-57页 |
·DRG 共培养体系的建立 | 第57页 |
·DRG 轴突标记物的免疫细胞化学检测 | 第57页 |
·RT-PCR 检测雪旺细胞标记物和神经营养因子的表达 | 第57-60页 |
·ELISA 双夹心法测定神经营养因子的分泌 | 第60-61页 |
3. 统计学分析 | 第61页 |
结果 | 第61-64页 |
1. DRG 共培养化 | 第61-62页 |
2. RT-PCR 检测雪旺细胞标记物和神经营养因子 mRNA 的表达 | 第62-64页 |
3. 相关神经营养因子的分泌水平 | 第64页 |
讨论 | 第64-66页 |
小结 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-70页 |
论文创新性的自我评价 | 第70-71页 |
综述 | 第71-90页 |
参考文献 | 第82-90页 |
附录 | 第90-92页 |
个人简介 | 第92-93页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第93-94页 |
致谢 | 第94-95页 |