| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 第1章 绪论 | 第8-16页 |
| ·HIV-1 简介 | 第8页 |
| ·艾滋病治疗 | 第8-12页 |
| ·药物治疗 | 第8-10页 |
| ·治疗性疫苗 | 第10页 |
| ·潜伏病毒的激活与清除 | 第10-11页 |
| ·基因治疗 | 第11-12页 |
| ·TRIM5α | 第12-14页 |
| ·TRIM 家族简介 | 第12页 |
| ·TRIM5α结构与功能 | 第12-14页 |
| ·TRIM5α抗病毒机制 | 第14页 |
| ·研究目的及内容 | 第14-15页 |
| ·研究技术路线 | 第15-16页 |
| 第2章 TRIM5α突变体抗 HIV-1 活性的研究 | 第16-48页 |
| ·实验材料 | 第16-18页 |
| ·菌株与质粒 | 第16页 |
| ·细胞株 | 第16页 |
| ·细胞培养相关材料 | 第16页 |
| ·工具酶与试剂 | 第16-17页 |
| ·序列的设计合成与测序 | 第17页 |
| ·主要仪器 | 第17页 |
| ·溶液配制 | 第17-18页 |
| ·实验方法 | 第18-28页 |
| ·重叠 PCR 反应 | 第18-21页 |
| ·PCR 产物回收 | 第21页 |
| ·连接反应 | 第21页 |
| ·质粒转化与菌落挑取 | 第21-22页 |
| ·质粒提取 | 第22页 |
| ·质粒酶切 | 第22-23页 |
| ·RHE 替换片段退火形成双链 DNA | 第23-24页 |
| ·细胞培养 | 第24页 |
| ·细胞转染 | 第24页 |
| ·野生型及突变型 TRIM5α蛋白的亚细胞定位 | 第24-25页 |
| ·HIV-1 假病毒的制备 | 第25页 |
| ·HIV-1 假病毒表达量的测定 | 第25页 |
| ·测定 HIV-1 假病毒在 TZM-bl 细胞细胞中的感染力 | 第25-26页 |
| ·瞬时表达 TRIM5α对 HIV-1 假病毒的抑制作用 | 第26页 |
| ·建立稳定表达 TRIM5α突变体的细胞系 | 第26-27页 |
| ·细胞中总 RNA 提取 | 第27页 |
| ·去除 RNA 中残留的 DNA 污染 | 第27页 |
| ·反转录 | 第27-28页 |
| ·稳定表达 TRIM5α蛋白的细胞对 HIV-1 假病毒的抑制作用 | 第28页 |
| ·实验结果 | 第28-44页 |
| ·pEGFP-TRIM5αR332L/Q/S 点突变体的构建 | 第28-31页 |
| ·pEGFP-TRIM5αRH/RHE 小片段突变体的构建 | 第31-33页 |
| ·野生型及突变型 TRIM5α蛋白在细胞中的表达与定位 | 第33-36页 |
| ·瞬时表达 TRIM5α突变体对 HIV-1 假病毒的抑制作用 | 第36-39页 |
| ·稳定表达 TRIM5α突变体对 HIV-1 假病毒的抑制作用 | 第39-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| ·本章小结 | 第46-48页 |
| 结论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-54页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
