| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-24页 |
| ·目前现状 | 第12页 |
| ·营养物质的概述 | 第12-15页 |
| ·维生素 | 第12-14页 |
| ·维生素A | 第13页 |
| ·维生素B | 第13-14页 |
| ·维生素E | 第14页 |
| ·花青素 | 第14页 |
| ·矿物质元素 | 第14-15页 |
| ·白藜芦醇 | 第15页 |
| ·营养物质不均匀分布 | 第15页 |
| ·类胡萝卜素研究进展 | 第15-19页 |
| ·类胡萝卜素的特性 | 第15-16页 |
| ·类胡萝卜素的作用 | 第16页 |
| ·类胡萝卜素生物合成途径 | 第16-19页 |
| ·类胡萝卜素生物合成途径中相关基因在植物基因工程中的应用 | 第19页 |
| ·生育酚的研究进展 | 第19-23页 |
| ·生育酚的特性 | 第19-21页 |
| ·生育酚的生物合成途径 | 第21-22页 |
| ·生育酚生物合成途径中相关基因在植物基因工程中的应用 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 2 实验材料 | 第24-25页 |
| ·水稻材料 | 第24页 |
| ·菌株、载体及目的基因 | 第24-25页 |
| 3 实验方法 | 第25-40页 |
| ·γ-TMT基因所对应的T-DNA插入水稻突变体的纯合筛选 | 第25-26页 |
| ·载体构建 | 第26-28页 |
| ·psy/crtI转化载体构建 | 第26-27页 |
| ·γ-TMT转化载体构建 | 第27-28页 |
| ·γ-TMT韩国突变体互补载体的构建 | 第28页 |
| ·根癌农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第28-29页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第29-40页 |
| ·转基因植株的PCR阳性检测 | 第29页 |
| ·转基因植株Southern blotting检测 | 第29-31页 |
| ·水稻基因组总DNA的抽提 | 第29-30页 |
| ·Southern blotting杂交 | 第30-31页 |
| ·RNA抽提、反转录及实时定量PCR检测 | 第31-33页 |
| ·RNA抽提及反转录 | 第31-32页 |
| ·实时定量PCR表达量检测 | 第32-33页 |
| ·psy/crtI转化植株和γ-TMT转化植株marker-free家系筛选 | 第33页 |
| ·利用Tail-PCR分离marker-free家系的侧翼序列 | 第33-34页 |
| ·β-胡萝卜素和生育酚的抽提 | 第34-35页 |
| ·β-胡萝卜素标准曲线的建立 | 第35-37页 |
| ·β-胡萝卜素标样制备 | 第35-36页 |
| ·β-胡萝卜素标准曲线建立 | 第36-37页 |
| ·生育酚标准曲线的建立 | 第37-40页 |
| ·生育酚混合标样制备 | 第37-38页 |
| ·生育酚混合标样标准曲线的建立 | 第38-40页 |
| 4. 结果与分析 | 第40-58页 |
| ·psy/crtI转化植株的分子检测 | 第40-46页 |
| ·T_0代psy/crtI转化植株的PCR检测 | 第40页 |
| ·psy/crtI转化植株中marker-free家系的筛选 | 第40-41页 |
| ·psy/crtI转化植株Southern blotting检测 | 第41-45页 |
| ·psy/crtI转化植株拷贝数检测 | 第41-45页 |
| ·psy/crtI转化植株marker-free材料Southern blotting分析 | 第45页 |
| ·marker-free家系ky1-4的纯合 | 第45-46页 |
| ·psy/crtI转化植株种子中β-胡萝卜素含量的测定 | 第46-47页 |
| ·psy/crtI转化植株marker-free家系ky1-4侧翼序列分离 | 第47-50页 |
| ·γ-TMT基因T-DNA插入水稻纯合突变体的筛选 | 第50页 |
| ·γ-TMT基因纯合突变体的Southern blotting检测 | 第50-51页 |
| ·γ-TMT基因纯合突变体5A生育酚含量的测定 | 第51-52页 |
| ·γ-TMT转化植株的分子检测 | 第52-55页 |
| ·γ-TMT转化植株PCR阳性检测 | 第52-53页 |
| ·T_0代γ-TMT转化植株拷贝数检测 | 第53页 |
| ·γ-TMT转化植株RNA抽提及RT-PCR结果 | 第53-54页 |
| ·γ-TMT转化植株实时定量PCR检测 | 第54-55页 |
| ·γ-TMT转化植株中生育酚含量的测定 | 第55-56页 |
| ·γ-TMT转化植株中marker-free家系的筛选 | 第56-58页 |
| 5 讨论 | 第58-62页 |
| ·γ-TMT基因的扩增 | 第58页 |
| ·Southern blotting分析 | 第58页 |
| ·pCAMBIA1300(双T区)载体的使用 | 第58-59页 |
| ·候选转基因家系侧翼序列的分离 | 第59页 |
| ·psy/crtI转化植株种子中β-胡萝卜素含量提高有限 | 第59-60页 |
| ·转玉米γ-TMT基因对水稻α-生育酚含量的影响 | 第60页 |
| ·展望 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-71页 |
| 附录 | 第71-78页 |
| 致谢 | 第78页 |
