摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略语表 | 第10-12页 |
1. 文献综述 | 第12-23页 |
·副猪嗜血杆菌病 | 第12-17页 |
·病原学 | 第12-13页 |
·流行病学特征 | 第13页 |
·副猪嗜血杆菌诊断技术研究进展 | 第13-15页 |
·致病机理研究进展 | 第15-17页 |
·Coronin蛋白质家族 | 第17-23页 |
·Coronin蛋白质的家族成员、命名与表达模式 | 第18-19页 |
·Coronin蛋白质的定位与基本功能 | 第19页 |
·Coronin蛋白质发挥功能的生化机制研究进展 | 第19-20页 |
·Coronin 1A基因研究进展 | 第20-23页 |
2. 研究目的与意义 | 第23-24页 |
3. 材料与方法 | 第24-44页 |
·试验材料 | 第24-30页 |
·菌种、质粒与细胞 | 第24-25页 |
·工具酶及主要试剂 | 第25-26页 |
·实验器材 | 第26-27页 |
·实验动物 | 第27页 |
·培养基与抗生素及其配制 | 第27页 |
·主要缓冲液与相关试剂及其配制 | 第27-29页 |
·分子生物学分析软件 | 第29-30页 |
·实验方法 | 第30-44页 |
·猪Coronin 1A基因的克隆 | 第30-32页 |
·原核重组质粒的构建及测序 | 第32-33页 |
·猪Coronin 1A蛋白的表达、纯化与鉴定 | 第33-35页 |
·猪Coronin 1A蛋白的多克隆抗体制备 | 第35-36页 |
·Anti-Coronin 1A多克隆抗体的ELISA检测 | 第36页 |
·猪Coronin 1A在副猪嗜血杆菌(HPS)感染后的免疫组化分析 | 第36-37页 |
·Coronin 1A基因在猪重要组织及细胞系中的特异性分布 | 第37-38页 |
·LPS和Poly(I:C)刺激诱导PK-15细胞表达猪Coronin 1A基因 | 第38页 |
·真核质粒的构建与测序 | 第38-40页 |
·猪Coronin 1A基因在PK-15细胞中的亚细胞定位 | 第40-41页 |
·质粒瞬时转染(脂质体介导转染法) | 第41页 |
·荧光素酶报告基因实验 | 第41页 |
·Western blot检测转染细胞中各蛋白的表达情况 | 第41-42页 |
·荧光定量PCR检测转染细胞中IL-6、IL-8和COX-2表达水平 | 第42-43页 |
·统计学方法 | 第43-44页 |
4. 结果和分析 | 第44-60页 |
·猪Coronin 1A基因克隆与序列分析 | 第44-46页 |
·猪Coronin 1A基因克隆 | 第44-45页 |
·猪Coronin 1A基因的序列分析 | 第45-46页 |
·猪Coronin 1A基因的真核表达质粒构建 | 第46-47页 |
·猪Coronin 1A基因在健康猪不同组织以及细胞系中的表达水平 | 第47-48页 |
·LPS和Poly(I:C)刺激PK-15细胞表达Coronin 1A基因 | 第48-49页 |
·猪Coronin 1A基因的亚细胞定位 | 第49-50页 |
·猪Coronin 1A蛋白的原核表达、纯化与Western blot鉴定分析 | 第50-51页 |
·猪Coronin 1A蛋白的原核表达与纯化 | 第50-51页 |
·猪Coronin 1A蛋白的Western blot鉴定分析 | 第51页 |
·猪Coronin 1A蛋白的抗血清效价测定 | 第51-52页 |
·感染副猪嗜血杆菌猪的重要组织中Coronin 1A表达水平 | 第52-54页 |
·感染副猪嗜血杆菌猪肺泡巨噬细胞中的Coronin 1A基因互作网络分析 | 第54-55页 |
·感染副猪嗜血杆菌猪肺泡巨噬细胞中的Coronin 1A亚细胞定位 | 第55-56页 |
·猪Coronin 1A基因与NF-κB相互作用的初步研究 | 第56-58页 |
·猪Coronin 1A抑制NF-κB途径 | 第56-57页 |
·猪Coronin 1A抑制IκBa的降解与p65的核转位 | 第57页 |
·猪Coronin 1A抑制NF-κB下游调控的促炎性因子表达 | 第57-58页 |
·猪Coronin 1A在副猪嗜血杆菌感染过程中调节NF-κB信号通路 | 第58-60页 |
5. 讨论 | 第60-63页 |
·猪Coronin 1A在副猪嗜血杆菌感染过程中可能与阻止吞噬溶酶体的形成有关 | 第61-62页 |
·猪Coronin 1A在副猪嗜血杆菌感染过程中调节NF-κB信号通路 | 第62-63页 |
6. 总结 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
致谢 | 第71页 |