摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩略语表(Abbreviation) | 第9-10页 |
第1章 文献综述 | 第10-20页 |
·戊型肝炎的研究进展 | 第10-16页 |
·戊型肝炎的病原学 | 第10-13页 |
·戊型肝炎的的流行病学 | 第13-14页 |
·戊型肝炎的临床症状和病理变化 | 第14页 |
·戊型肝炎的诊断与预防 | 第14-16页 |
·RNA病毒的感染性克隆的研究 | 第16-17页 |
·感染性克隆的构建及其转录本的产生 | 第16-17页 |
·RNA病毒的感染性克隆的研究进展 | 第17页 |
·复制子的研究进展及其展望 | 第17-20页 |
·RNA复制子载体的研究 | 第18-19页 |
·HEV复制子的研究进展与展望 | 第19-20页 |
第2章 试验目的与意义 | 第20-21页 |
第3章 材料与方法 | 第21-34页 |
·实验材料 | 第21-27页 |
·毒株与细胞 | 第21页 |
·菌种与质粒 | 第21-22页 |
·主要药品与试剂 | 第22-23页 |
·主要培养基 | 第23-24页 |
·主要缓冲液 | 第24-26页 |
·本研究中所用的寡核苷酸引物 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-34页 |
·病料的处理 | 第27页 |
·RNA的提取 | 第27页 |
·RT-PCR | 第27-28页 |
·PCR产物的回收和纯化 | 第28-29页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
·连接产物的转化 | 第29-30页 |
·质粒的制备与鉴定 | 第30-32页 |
·质粒的线性化与去磷酸化 | 第32页 |
·细胞的培养 | 第32-33页 |
·细胞的转染 | 第33页 |
·间接免疫荧光 | 第33-34页 |
第4章 结果与分析 | 第34-46页 |
·感染性克隆的构建 | 第34-38页 |
·HEV-1的克隆 | 第34页 |
·HE-2的克隆 | 第34-35页 |
·HEV-3的克隆 | 第35-36页 |
·HE-4的克隆 | 第36-37页 |
·HE-5的克隆 | 第37页 |
·全长质粒的构建 | 第37-38页 |
·全长质粒的验证 | 第38-39页 |
·RT-PCR验证 | 第38-39页 |
·间接免疫荧光试验鉴定 | 第39页 |
·复制子的构建 | 第39-44页 |
·缺失体的构建 | 第39-40页 |
·外源基因IRES-EGFP、IRES-Luc的克隆 | 第40-42页 |
·复制子HEV-IRES-Luc、HEV-IRES-EGFP的构建 | 第42-43页 |
·缺失体的构建 | 第43-44页 |
·复制子的验证 | 第44-45页 |
·复制子HEV-IRES-Luc的细胞系的构建及其鉴定结果 | 第45-46页 |
第5章 讨论与结论 | 第46-50页 |
·讨论 | 第46-49页 |
·研究HEV遇到问题及其解决方法 | 第46-47页 |
·复制子细胞系的应用研究 | 第47-49页 |
·结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
致谢 | 第55页 |