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猪戊型肝炎病毒感染性克隆及复制子的构建

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
缩略语表(Abbreviation)第9-10页
第1章 文献综述第10-20页
   ·戊型肝炎的研究进展第10-16页
     ·戊型肝炎的病原学第10-13页
     ·戊型肝炎的的流行病学第13-14页
     ·戊型肝炎的临床症状和病理变化第14页
     ·戊型肝炎的诊断与预防第14-16页
   ·RNA病毒的感染性克隆的研究第16-17页
     ·感染性克隆的构建及其转录本的产生第16-17页
     ·RNA病毒的感染性克隆的研究进展第17页
   ·复制子的研究进展及其展望第17-20页
     ·RNA复制子载体的研究第18-19页
     ·HEV复制子的研究进展与展望第19-20页
第2章 试验目的与意义第20-21页
第3章 材料与方法第21-34页
   ·实验材料第21-27页
     ·毒株与细胞第21页
     ·菌种与质粒第21-22页
     ·主要药品与试剂第22-23页
     ·主要培养基第23-24页
     ·主要缓冲液第24-26页
     ·本研究中所用的寡核苷酸引物第26-27页
   ·实验方法第27-34页
     ·病料的处理第27页
     ·RNA的提取第27页
     ·RT-PCR第27-28页
     ·PCR产物的回收和纯化第28-29页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第29页
     ·连接产物的转化第29-30页
     ·质粒的制备与鉴定第30-32页
     ·质粒的线性化与去磷酸化第32页
     ·细胞的培养第32-33页
     ·细胞的转染第33页
     ·间接免疫荧光第33-34页
第4章 结果与分析第34-46页
   ·感染性克隆的构建第34-38页
     ·HEV-1的克隆第34页
     ·HE-2的克隆第34-35页
     ·HEV-3的克隆第35-36页
     ·HE-4的克隆第36-37页
     ·HE-5的克隆第37页
     ·全长质粒的构建第37-38页
   ·全长质粒的验证第38-39页
     ·RT-PCR验证第38-39页
     ·间接免疫荧光试验鉴定第39页
   ·复制子的构建第39-44页
     ·缺失体的构建第39-40页
     ·外源基因IRES-EGFP、IRES-Luc的克隆第40-42页
     ·复制子HEV-IRES-Luc、HEV-IRES-EGFP的构建第42-43页
     ·缺失体的构建第43-44页
   ·复制子的验证第44-45页
   ·复制子HEV-IRES-Luc的细胞系的构建及其鉴定结果第45-46页
第5章 讨论与结论第46-50页
   ·讨论第46-49页
     ·研究HEV遇到问题及其解决方法第46-47页
     ·复制子细胞系的应用研究第47-49页
   ·结论第49-50页
参考文献第50-55页
致谢第55页

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