| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略表(Abbreviation) | 第12-13页 |
| 1. 文献综述 | 第13-23页 |
| ·TGEV的病原结构 | 第13-14页 |
| ·TGEV的理化特性 | 第14-15页 |
| ·TGEV的培养特性 | 第15页 |
| ·TGEV的研究进展 | 第15-16页 |
| ·TGEV的流行病学 | 第16-17页 |
| ·临床症状 | 第17页 |
| ·病理变化 | 第17页 |
| ·致病机理 | 第17-18页 |
| ·TGEV的诊断方法研究进展 | 第18-23页 |
| ·病毒分离鉴定 | 第19页 |
| ·病毒电镜检测 | 第19页 |
| ·血清学诊断 | 第19-20页 |
| ·分子学诊断 | 第20-23页 |
| ·核酸探针杂交技术 | 第20页 |
| ·免疫胶体金标记技术 | 第20-21页 |
| ·PCR技术 | 第21页 |
| ·荧光定量RT-PCR | 第21-23页 |
| 2. 目的与意义 | 第23-24页 |
| 3. 材料与方法 | 第24-34页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·病毒与菌株 | 第24页 |
| ·试验动物与疫苗 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·主要试剂和药品 | 第24-25页 |
| ·主要培养基的配制 | 第25页 |
| ·试验方法 | 第25-34页 |
| ·引物与探针的设计 | 第25页 |
| ·病毒核酸的提取 | 第25-27页 |
| ·DNA病毒Total DNA的提取 | 第25-26页 |
| ·RNA病毒Total RNA的提取 | 第26页 |
| ·DNA的合成 | 第26-27页 |
| ·阳性标准质粒的制备 | 第27-29页 |
| ·引物的设计 | 第27页 |
| ·目的片段带的扩增 | 第27页 |
| ·扩增产物的回收与纯化 | 第27-28页 |
| ·纯化产物与载体的连接 | 第28页 |
| ·转化 | 第28页 |
| ·质粒的大量提取 | 第28-29页 |
| ·质粒的鉴定 | 第29页 |
| ·实时定量RT-PCR反应体系的建立 | 第29-30页 |
| ·标准曲线制备 | 第30页 |
| ·特异性试验 | 第30页 |
| ·敏感性试验及重复性试验 | 第30页 |
| ·人工动物试验 | 第30页 |
| ·实时荧光定量RT-PCR | 第30-31页 |
| ·试验动物组织中病毒RNA的提取 | 第30页 |
| ·荧光定量RT-PCR检测 | 第30-31页 |
| ·组织切片制备 | 第31页 |
| ·HE染色 | 第31-32页 |
| ·免疫组化法检测试验猪的病毒含量情况 | 第32-34页 |
| 4. 结果与分析 | 第34-45页 |
| ·标准质粒的制备 | 第34页 |
| ·荧光定量RT-PCR反应体系的建立及标准曲线的制备 | 第34-35页 |
| ·特异性试验 | 第35-36页 |
| ·敏感性试验 | 第36-37页 |
| ·符合率试验 | 第37页 |
| ·TGEV的流行病学调查 | 第37页 |
| ·人工动物试验 | 第37-40页 |
| ·荧光定量RT-PCR检测人工感染猪体内病毒的分布 | 第40-42页 |
| ·HE染色检测 | 第42-43页 |
| ·免疫组化法对病毒的检测 | 第43-45页 |
| 5. 讨论 | 第45-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-57页 |
| 致谢 | 第57页 |