转Bt基因棉花及水稻检测用质粒标准分子的构建、定值与分析
| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 目次 | 第11-15页 |
| 图清单 | 第15-18页 |
| 表清单 | 第18-22页 |
| 1 绪论 | 第22-37页 |
| ·转基因技术概述 | 第22-27页 |
| ·转基因技术发展概况 | 第22-23页 |
| ·植物转基因方法 | 第23-24页 |
| ·转基因技术在农业上的应用现状 | 第24-26页 |
| ·转基因技术面临的主要问题 | 第26-27页 |
| ·转基因检测及其标准物质的研究现状 | 第27-30页 |
| ·转基因检测方法 | 第27-28页 |
| ·转基因检测用标准物质的分类 | 第28-29页 |
| ·质粒标准分子的研制及其应用现状 | 第29-30页 |
| ·核酸定量技术及其应用现状 | 第30-36页 |
| ·主要核酸定量技术简介 | 第30-34页 |
| ·核酸定量技术应用概况 | 第34-35页 |
| ·核酸定量技术的问题、解决方法及发展趋势 | 第35-36页 |
| ·论文研究的目的和意义 | 第36-37页 |
| 2 质粒标准分子的构建与验证 | 第37-51页 |
| ·材料 | 第37-38页 |
| ·主要仪器 | 第37-38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·方法 | 第38-41页 |
| ·基因特异性序列的克隆 | 第38-40页 |
| ·质粒标准分子的构建 | 第40-41页 |
| ·质粒标准分子的验证 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-50页 |
| ·特异性基因序列的克隆 | 第41-43页 |
| ·质粒标准分子的构建 | 第43-44页 |
| ·质粒标准分子的验证 | 第44-50页 |
| ·讨论 | 第50-51页 |
| 3 质粒标准分子的定值技术研究 | 第51-57页 |
| ·材料 | 第51页 |
| ·主要仪器 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·实验材料 | 第51页 |
| ·方法 | 第51-53页 |
| ·菌液培养 | 第51-52页 |
| ·质粒的提取、质粒测定及分装 | 第52页 |
| ·紫外分光光度法定量质粒 | 第52页 |
| ·PicoGreendsDNA试剂盒法定量质粒 | 第52页 |
| ·数字PCR法定量质粒 | 第52-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-55页 |
| ·质粒DNA的电泳检测 | 第53页 |
| ·紫外分光光度法检测结果 | 第53页 |
| ·PicoGreendsDNA试剂盒法检测结果 | 第53-54页 |
| ·数字PCR法检测结果 | 第54-55页 |
| ·各方法检测结果的比较 | 第55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 4 质粒标准分子的性质分析 | 第57-119页 |
| ·材料 | 第57-58页 |
| ·主要仪器 | 第57页 |
| ·主要试剂 | 第57-58页 |
| ·实验材料 | 第58页 |
| ·方法 | 第58-64页 |
| ·qPCR检测体系的构建 | 第58-59页 |
| ·重复性分析 | 第59页 |
| ·均匀性分析 | 第59页 |
| ·均一性分析 | 第59-60页 |
| ·稳定性分析 | 第60页 |
| ·可替代性分析 | 第60-61页 |
| ·特异性分析 | 第61-62页 |
| ·检测灵敏度分析 | 第62-63页 |
| ·引物探针引入的偏差 | 第63页 |
| ·不确定度评定 | 第63-64页 |
| ·结果与分析 | 第64-117页 |
| ·qPCR检测体系的构建 | 第64-66页 |
| ·重复性分析 | 第66-67页 |
| ·均匀性分析 | 第67-70页 |
| ·均一性分析 | 第70-76页 |
| ·稳定性分析 | 第76-108页 |
| ·可替代性分析 | 第108-110页 |
| ·特异性分析 | 第110-111页 |
| ·灵敏度分析 | 第111-115页 |
| ·引物探针引入的偏差 | 第115-117页 |
| ·讨论 | 第117-119页 |
| 5 质粒标准分子的应用 | 第119-127页 |
| ·质粒在转基因成分含量检测中的应用 | 第119-123页 |
| ·材料 | 第119页 |
| ·方法 | 第119-120页 |
| ·结果与分析 | 第120-122页 |
| ·讨论 | 第122-123页 |
| ·实时荧光定量 P C R 方法比对 | 第123-127页 |
| ·材料 | 第123-124页 |
| ·方法 | 第124页 |
| ·结果与分析 | 第124-125页 |
| ·讨论 | 第125-127页 |
| 6 总结、创新与展望 | 第127-130页 |
| ·全文总结 | 第127-129页 |
| ·创新点 | 第129页 |
| ·课题展望 | 第129-130页 |
| 参考文献 | 第130-139页 |
| 作者简历 | 第139页 |
