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花椰菜胚性愈伤组织cDNA-AFLP分析及EF-1α和LECl cDNA克隆

目录第1-10页
缩略词第10-11页
摘要第11-13页
Abstract第13-15页
第一章 引言第15-24页
 1 花椰菜离体培养的研究进展第15-16页
 2 植物体细胞胚胎发生途径研究进展第16-19页
   ·植物体胚发生的途径第16页
   ·植物体胚发生的过程第16-17页
   ·园林植物体胚发生的研究进展第17-18页
   ·植物体胚发生途径的应用第18-19页
 3 差异显示技术 CDNA-AFLP 研究进展第19-21页
   ·cDNA-AFLP 技术原理与特点第20页
   ·cDNA-AFLP 技术在植物中的应用第20-21页
 4.植物延伸因子研究进展第21-22页
   ·延伸因子 EF-1α的生理作用第21页
   ·延伸因子 EF-1α的克隆及表达第21-22页
 5 植物转录 LEC1 研究进展第22页
 6 研究意义及主要内容第22-24页
   ·研究意义第22-23页
   ·研究主要内容第23-24页
第二章 花椰菜体细胞胚胎发生及其再生体系的建立第24-31页
 1 材料与方法第24-25页
   ·材料第24页
   ·方法第24-25页
 2 结果与分析第25-29页
   ·不同激素配比对花椰菜愈伤组织诱导的影响第25-27页
   ·不同损伤程度对花椰菜胚性愈伤组织诱导的影响第27页
   ·不同浓度 2,4-D 对花椰菜胚性愈伤组织增殖的影响第27-28页
   ·花椰菜体细胞胚胎的成熟第28页
   ·花椰菜体细胞胚胎的萌发第28-29页
 3 讨论第29-31页
   ·2,4-D、NAA 能有效的诱导花椰菜胚性愈伤组织发生第29页
   ·添加少量的 IBA 能有效的促进花椰菜体胚成熟第29-31页
第三章 花椰菜胚性愈伤组织 CDNA-AFLP 的建立第31-54页
 1 材料第31页
   ·试验材料第31页
   ·主要仪器第31页
   ·主要试剂第31页
 2 试验方法第31-38页
   ·花椰菜胚性愈伤组织总 RNA 的提取与检测第31-32页
   ·cDNA 的合成及纯化第32页
   ·双酶切和特定接头连接第32-33页
   ·预扩增第33页
   ·选择性性扩增体系的优化第33-35页
   ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第35-37页
   ·差异片段的回收、纯化第37-38页
 3 结果及分析第38-50页
   ·总 RNA 的提取第38-39页
   ·双链 cDNA 的质量第39-40页
   ·预扩增结果第40页
   ·各因素水平对选择性扩增试验的影响第40-44页
   ·部分聚丙烯酰胺凝胶电泳结果图第44-45页
   ·差异片段的分离与二次扩增第45-46页
   ·测序结果及功能分析第46-50页
 4 讨论第50-54页
   ·花椰菜胚性愈伤组织总 RNA 的提取、cDNA 的合成、酶切第50页
   ·选择性扩增体系优化第50-51页
   ·聚丙烯酰胺凝胶电泳第51页
   ·差异片段 TDFs 功能讨论第51-54页
第四章 花椰菜胚性愈伤组织 EF-1Α CDNA 的克隆第54-69页
 1 材料第54-55页
   ·植物材料第54页
   ·仪器设备第54页
   ·主要试剂第54-55页
   ·引物合成第55页
 2 方法第55-57页
   ·总 RNA 的提取与检测第55页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 EF-1αcDNA 引物设计第55页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 EF-1αcDNA 克隆扩增体系及程序第55-56页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 EF-1α保守区的同源克隆第56页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 EF-1α3'-RACE第56页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 EF-1αcDNA5'-RACE第56页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 EF-1αcDNAORF 扩增第56-57页
   ·测序及生物信息学分析第57页
 3 结果与分析第57-63页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 EF-1α保守区序列的获得第57-58页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 EF-1α3'端的扩增第58-59页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 EF-1α5'端的扩增第59-60页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 EF-1αcDNA 全长的获得第60-62页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 EF-1αcDNAORF 的获得第62-63页
 4 EF-1Α基因生物信息学分析第63-67页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 EF-1αcDNA 序列同源性分析第63-64页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 EF-1α理化性质预测及分析第64-65页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 EF-1α蛋白质保守区的预测及分析第65页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 EF-1α蛋白跨膜结构预测与分析第65-66页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 EF-1α蛋白信号肽的预测和分析第66页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 EF-1α蛋白质二级结构分析第66页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 EF-1α蛋白质磷酸化位点预测与分析第66-67页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 EF-1α蛋白质三维结构分析第67页
 5 讨论第67-69页
第五章 花椰菜胚性愈伤组织 LEC1CDNA 的克隆第69-80页
 1 材料第69页
 2 方法第69-70页
   ·总 RNA 的提取与检测第69页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 LEC1cDNA 克隆引物设计第69页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 LEC1cDNA 克隆扩增体系及程序第69页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 LEC1cDNA 保守区 PCR 扩增第69-70页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 LEC13'-RACE第70页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 LEC15'-RACE第70页
   ·测序及生物信息学分析第70页
 3 结果与分析第70-75页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 LEC1cDNA 保守区序列的获得第70-71页
   ·花椰菜胚性愈伤组织基因 LEC13'端的扩增第71-73页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 LEC15'端的扩增第73-74页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 LEC1cDNA 全长的获得第74-75页
 4 LEC1 基因生物信息学分析第75-79页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 LEC1 cDNA 序列同源性分析第75-76页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 LEC1 理化性质预测及分析第76页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 LEC1 蛋白质保守区的预测及分析第76-77页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 LEC1 蛋白跨膜结构预测与分析第77页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 LEC1 蛋白信号肽的预测和分析第77-78页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 LEC1 蛋白质二级结构分析第78页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 LEC1 蛋白质磷酸化位点预测与分析第78页
   ·花椰菜胚性愈伤组织 LEC1 蛋白质三维结构分析第78-79页
 5 讨论第79-80页
第六章 小结第80-82页
 1 花椰菜体细胞胚胎发生及其再生体系的建立第80页
 2 利用 CDNA-AFLP 技术分析花椰菜体胚发育差异表达基因第80页
 3 花椰菜胚性愈伤组织 EF-1ΑCDNA 的克隆第80-81页
 4 花椰菜胚性愈伤组织的 LEC1CDNA 克隆第81-82页
参考文献第82-93页
附录1 图版及图版说明第93-96页
致谢第96页

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