| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-21页 |
| ·Rhomboid蛋白的发现 | 第11-12页 |
| ·Rhomboid蛋白家族的结构以及功能特点 | 第12-13页 |
| ·Rhomboid蛋白家族的结构特点 | 第12-13页 |
| ·Rhomboid蛋白家族的功能特点 | 第13页 |
| ·Rhomboid蛋白家族的分类 | 第13-15页 |
| ·Rhmoboid蛋白家族在生物中各种族的分布 | 第15-17页 |
| ·果蝇中的Rhmoboid蛋白家族 | 第15-16页 |
| ·酵母中的Rhmoboid蛋白家族 | 第16页 |
| ·哺乳动物中的Rhmoboid蛋白家族 | 第16页 |
| ·原核中的Rhmoboid蛋白家族 | 第16-17页 |
| ·植物中的Rhmoboid蛋白家族 | 第17页 |
| ·Rhmoboid蛋白酶催化的底物特点 | 第17-18页 |
| ·Rhomboid家族蛋白可能涉及的信号传导通路 | 第18页 |
| ·重要的相关领域研究状况 | 第18-19页 |
| ·可调控膜内蛋白质水解(RIP) | 第18-19页 |
| ·胞外结构域脱落(ectodoma in shedding) | 第19页 |
| ·Rhomboid家族蛋白在人类疾病中的作用 | 第19-21页 |
| ·Rhomboid蛋白与线粒体相关联 | 第19页 |
| ·其他脊椎动物Rhomboid蛋白与人类疾病关系 | 第19-20页 |
| ·Rhomboid蛋白酶在寄生虫疾病中作用 | 第20-21页 |
| 第2章 引言 | 第21-23页 |
| ·研究背景和意义 | 第21-22页 |
| ·本研究技术路线 | 第22-23页 |
| 第3章 CpRBL基因的克隆与分子特性分析 | 第23-35页 |
| ·技术路线 | 第23页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·蜡梅花cDNA文库 | 第23页 |
| ·菌株与载体 | 第23页 |
| ·主要仪器及化学试剂 | 第23-24页 |
| ·自主配制主要试剂 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-30页 |
| ·EST序列特征分析 | 第25页 |
| ·CpRBL基因cDNA获得 | 第25-29页 |
| ·CpRBL基因的生物信息学分析 | 第29-30页 |
| ·实验结果与分析 | 第30-34页 |
| ·蜡梅CpRBL基因的克隆 | 第30-31页 |
| ·蜡梅CpRBL基因编码蛋白的生物信息学分析 | 第31-34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| 第4章 蜡梅rhomboid蛋白基因CpRBL的表达量分析 | 第35-45页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·蜡梅幼苗及生长条件 | 第35页 |
| ·主要试剂和实验仪器 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-37页 |
| ·蜡梅幼苗不同组织及不同花期 | 第35页 |
| ·总RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第35页 |
| ·CpRBL基因在蜡梅花不同组织及不同时期表达特性分析 | 第35-37页 |
| ·实验结果与分析 | 第37-44页 |
| ·总RNA提取 | 第37-38页 |
| ·引物扩增特异性检测 | 第38页 |
| ·熔解曲线分析 | 第38-40页 |
| ·标准曲线分析 | 第40-41页 |
| ·蜡梅CpRBL在不同花期、不同组织及幼苗胁迫下的荧光定量分析 | 第41-44页 |
| ·结论 | 第44-45页 |
| 第5章 植物表达载体的构建与转基因烟草相关研究 | 第45-69页 |
| ·技术路线 | 第45页 |
| ·实验材料 | 第45-47页 |
| ·菌株与载体 | 第45-46页 |
| ·主要仪器及生化试剂 | 第46页 |
| ·常用溶液配方 | 第46-47页 |
| ·实验方法 | 第47-56页 |
| ·植物表达载体构建流程图 | 第47页 |
| ·植物表达载的构建步骤 | 第47-50页 |
| ·转化农杆菌GV3101 | 第50-51页 |
| ·农杆菌介导叶盘法转化烟草 | 第51页 |
| ·转基因阳性植株目的基因检测 | 第51-52页 |
| ·转基因植株胁迫处理 | 第52页 |
| ·野生型植株和转基因植株生理指标测定 | 第52-56页 |
| ·MAPKK基因荧光定量PCR引物的设计 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-67页 |
| ·CpRBL的ORF框加酶切位点序列的克隆 | 第56-57页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA2301-CpRBL的构建 | 第57页 |
| ·蜡梅CpRBL基因叶盘法转化烟草及Km~+生根筛选 | 第57-58页 |
| ·GUS染色筛选 | 第58-59页 |
| ·目的基因CpRBL的PCR扩增检测 | 第59页 |
| ·转基因烟草内外源CpRBL基因表达模式检测分析 | 第59-60页 |
| ·高盐胁迫处理后转基因植株生理指标检测 | 第60-62页 |
| ·模拟干旱胁迫处理后转基因植株形态与生理指标检测 | 第62-65页 |
| ·烟草抗旱相关基因MAPKK基因在野生型和转基因烟草中的相对表达分析 | 第65-67页 |
| ·讨论 | 第67-69页 |
| 第6章 总结 | 第69-71页 |
| ·结论 | 第69-70页 |
| ·本研究创新之处 | 第70页 |
| ·下一步研究计划 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-79页 |
| 缩略词 | 第79-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 发表的文章 | 第83页 |
