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芽孢杆菌SWB16的yisP基因克隆及下游环化酶基因sqhC缺失突变菌株的构建

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第一章 文献综述第11-23页
   ·芽孢杆菌的分类研究进展第11-15页
     ·芽孢杆菌属第11-12页
     ·芽孢杆菌的分类与鉴定第12-13页
     ·枯草芽孢杆菌近缘种的分类研究进展第13-15页
   ·角鲨烯及其代谢途径中相关酶的研究进展第15-23页
     ·角鲨烯的生物学意义及其应用第15-16页
     ·角鲨烯的合成及其代谢途径第16-18页
     ·角鲨烯合酶基因yisP的研究第18-19页
     ·角鲨烯下游环化酶基因sqhC的研究第19-21页
     ·角鲨烯的其它下游环化酶基因第21-23页
第二章 引言第23-27页
   ·研究背景及意义第23-25页
   ·技术路线第25-27页
第三章 菌株SWB16的鉴定及其yisP基因的克隆第27-41页
   ·材料与方法第27-30页
     ·实验材料第27-28页
     ·菌株的形态与生化鉴定第28页
     ·16S rDNA序列及系统进化分析第28-29页
     ·gyrA序列及系统进化分析第29页
     ·yisP基因克隆第29-30页
   ·结果与分析第30-36页
     ·形态与生化特征第30-31页
     ·16S rDNA序列比对及系统发育树第31-33页
     ·gyrA序列比对及系统发育树第33-34页
     ·yisP基因克隆及序列分析第34-36页
   ·小结与讨论第36-41页
     ·SWB16的分类鉴定结果第36-37页
     ·yisP基因可作为一种新的对近缘种区别的分子标尺第37-39页
     ·yisP基因的克隆证明植物内生菌SWB16存在角鲨烯前体第39-41页
第四章 下游环化酶基因sqhC的克隆及缺失突变体的构建第41-55页
   ·材料与方法第41-48页
     ·实验材料第41-42页
     ·环化酶基因sqhC的克隆第42页
     ·载体pMD20-T-neo的构建第42-44页
     ·sqhC基因打靶载体的构建第44-47页
     ·SWB16 sqhC基因同源敲除第47-48页
   ·结果与分析第48-52页
     ·sqhC基因的克隆第48页
     ·neo基因扩增及pMD20-T-neo阳性克隆的鉴定第48-49页
     ·sqhC基因打靶载体同源臂的克隆及同源臂的获得第49页
     ·pDM20-T-neo大、小片段的获得第49-50页
     ·sqhC基因打靶载体的验证第50-51页
     ·sqhC同源敲除菌的筛选与验证第51-52页
   ·小结与讨论第52-55页
     ·下游环化酶基因sqhC缺失突变体的构建第52-53页
     ·突变株应用于发酵及产物检测第53-55页
第五章 结论与讨论第55-57页
   ·yisP基因可以作为区别枯草芽孢杆菌近缘种的分类指标第55页
   ·yisP基因的克隆证明植物内生菌SWB16存在角鲨烯的代谢途径第55-56页
   ·sqhC基因缺失菌株的构建和应用价值的评估第56-57页
参考文献第57-67页
致谢第67-69页
发表论文及参研课题第69页

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