| 提要 | 第1-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-17页 |
| 前言 | 第17-22页 |
| 第一部分 综述 | 第22-34页 |
| ·基因载体 | 第23-24页 |
| ·非病毒基因载体 | 第23-24页 |
| ·病毒基因载体 | 第24页 |
| ·抑癌基因治疗 | 第24-26页 |
| ·免疫相关基因治疗 | 第26-27页 |
| ·反义基因治疗 | 第27-29页 |
| ·自杀基因治疗 | 第29-30页 |
| ·抗血管生成基因治疗 | 第30-31页 |
| ·基因联合治疗 | 第31-32页 |
| ·问题与展望 | 第32-34页 |
| 第二部分 锌指蛋白 ZFX 在骨肉瘤中的表达和意义 | 第34-47页 |
| ·前言 | 第34-35页 |
| ·材料和方法 | 第35-41页 |
| ·细胞株 | 第35页 |
| ·标本来源 | 第35页 |
| ·材料和试剂 | 第35-36页 |
| ·主要仪器 | 第36-37页 |
| ·溶液配制 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-41页 |
| ·实时荧光定量 PCR（RT-qPCR） | 第38-39页 |
| ·免疫印迹 | 第39页 |
| ·免疫组化 | 第39-41页 |
| ·统计学处理 | 第41页 |
| ·结果 | 第41-45页 |
| ·ZFX 在骨肉瘤细胞株中的表达 | 第41-44页 |
| ·ZFX 在骨肉瘤组织标本中的表达 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| 第三部分 siRNA-ZFX 慢病毒载体的构建与包装 | 第47-59页 |
| ·前言 | 第47-48页 |
| ·材料与方法 | 第48-53页 |
| ·细胞株 | 第48页 |
| ·材料和试剂 | 第48-49页 |
| ·主要仪器 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-53页 |
| ·慢病毒载体构建 | 第50-51页 |
| ·质粒转染 | 第51-52页 |
| ·慢病毒收获及浓缩 | 第52-53页 |
| ·滴度测定 | 第53页 |
| ·结果 | 第53-56页 |
| ·si-ZFX 重组慢病毒的 PCR 鉴定 | 第53-54页 |
| ·si-ZFX 慢病毒载体的测序鉴定 | 第54-55页 |
| ·慢病毒质粒共转染 293T 细胞 | 第55-56页 |
| ·慢病毒滴度测定 | 第56页 |
| ·讨论 | 第56-59页 |
| 第四部分 RNAi 介导 ZFX 基因沉默对骨肉瘤细胞增殖的影响 | 第59-81页 |
| ·前言 | 第59-60页 |
| ·材料与方法 | 第60-70页 |
| ·细胞株 | 第60页 |
| ·材料和试剂 | 第60-62页 |
| ·主要仪器 | 第62页 |
| ·试剂配置 | 第62-63页 |
| ·实验方法 | 第63-70页 |
| ·骨肉瘤细胞的复苏、培养和冻存 | 第63-65页 |
| ·慢病毒感染 | 第65-66页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第66-67页 |
| ·免疫印迹 | 第67页 |
| ·MTT 法测量生长曲线 | 第67-68页 |
| ·克隆形成实验 | 第68-69页 |
| ·流式细胞仪检测细胞周期 | 第69-70页 |
| ·统计学方法 | 第70页 |
| ·结果 | 第70-78页 |
| ·病毒感染条件优化 | 第70-71页 |
| ·细胞培养与慢病毒感染 | 第71-72页 |
| ·ZFX 基因的敲减效率验证 | 第72-73页 |
| ·ZFX 沉默对骨肉瘤细胞增殖的影响 | 第73-74页 |
| ·ZFX 沉默对骨肉瘤细胞体外形成克隆能力的影响 | 第74-75页 |
| ·流式细胞检测细胞周期的结果 | 第75-78页 |
| ·讨论 | 第78-81页 |
| 第五部分 结论 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-98页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
