摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-12页 |
第一部分 文献综述及选题背景 | 第12-23页 |
第一章 疱疹病毒UL24基因及其编码蛋白的研究进展 | 第12-17页 |
1 疱疹病毒UL24基因及其编码蛋白的特点 | 第12-13页 |
·UL24基因序列的特点 | 第12-13页 |
·UL24基因编码蛋白的特点 | 第13页 |
2 疱疹病毒UL24基因编码蛋白的定位 | 第13-14页 |
3 疱疹病毒UL24基因编码蛋白的作用 | 第14-15页 |
·UL24蛋白与病毒毒力 | 第14页 |
·UL24蛋白在病毒复制中的作用 | 第14页 |
·UL24蛋白参与核仁素的散布 | 第14-15页 |
·UL24蛋白参与细胞膜融合 | 第15页 |
4 UL24蛋白与其他蛋白的作用 | 第15-16页 |
·UL24蛋白与ICP27蛋白 | 第15页 |
·UL24蛋白与细胞周期蛋白B/Cdc2复合体 | 第15-16页 |
·UL24蛋白与UL12蛋白 | 第16页 |
·UL24蛋白与胸腺激酶 | 第16页 |
5 展望 | 第16-17页 |
第二章 以减毒沙门氏菌为口服基因疫苗载体的研究进展及选题背景 | 第17-23页 |
1 减毒沙门氏菌的入侵机制 | 第17-18页 |
·通过上皮细胞入侵 | 第17-18页 |
·通过非上皮细胞入侵 | 第18页 |
2 携带基因疫苗重组减毒沙门氏菌诱导机体免疫应答的机制 | 第18-19页 |
·沙门氏菌携带质粒的释放 | 第18-19页 |
·诱导机体免疫应答的机制 | 第19页 |
3 以减毒沙门氏菌为载体在基因疫苗研究中的应用 | 第19-22页 |
·减毒沙门氏菌作为载体的病毒疫苗 | 第19-20页 |
·减毒沙门氏菌作为载体的细菌疫苗 | 第20-21页 |
·减毒沙门氏菌作为载体的肿瘤疫苗 | 第21页 |
·减毒沙门氏菌作为载体的寄生虫疫苗 | 第21-22页 |
4 小结 | 第22页 |
5 选题背景 | 第22-23页 |
第二部分 试验研究 | 第23-61页 |
第三章 DPV的增殖、纯化及兔抗DPV高免血清的制备和纯化 | 第23-29页 |
1 材料 | 第23-24页 |
·毒株、鸭胚及试验动物 | 第23页 |
·主要试剂及配制 | 第23-24页 |
·主要仪器 | 第24页 |
2 试验方法 | 第24-26页 |
·病毒的增殖 | 第24页 |
·病毒的纯化 | 第24页 |
·病毒含量测定 | 第24-25页 |
·兔抗DPV高免血清的制备 | 第25页 |
·辛酸-硫酸铵提取兔抗DPV IgG | 第25-26页 |
·兔抗DPV IgG纯度的检测 | 第26页 |
3 试验结果 | 第26-27页 |
·DPV在鸭胚成纤维细胞的增殖情况 | 第26页 |
·病毒含量的测定 | 第26页 |
·抗体效价的检测 | 第26-27页 |
·兔抗DPV血清IgG的纯化 | 第27页 |
4 讨论 | 第27-28页 |
·关于DPV的增殖与纯化 | 第27页 |
·兔抗DPV高免血清IgG的制备与纯化 | 第27-28页 |
5 小结 | 第28-29页 |
第四章 鸭瘟病毒UL24基因疫苗及其分子佐剂LTB在COS-7细胞中表达的研究 | 第29-35页 |
1 材料 | 第29-30页 |
·菌种和细胞 | 第29页 |
·主要试剂 | 第29-30页 |
·主要仪器 | 第30页 |
2 方法 | 第30-31页 |
·鸭瘟病毒UL24基因疫苗在COS-7细胞中表达 | 第30-31页 |
·RT-PCR检测LTB基因在C0S-7细胞的瞬时表达 | 第31页 |
3 试验结果 | 第31-33页 |
·鸭瘟病毒UL24基因疫苗体外转染试验 | 第31-32页 |
·RT-PCR检测LTB基因在COS-7细胞中的转录 | 第32-33页 |
4 讨论 | 第33-34页 |
5 小结 | 第34-35页 |
第五章 鸭瘟病毒UL24基因疫苗诱导雏鸭体液免疫的研究 | 第35-45页 |
1 材料 | 第35-36页 |
·试验动物 | 第35页 |
·菌种和病毒 | 第35页 |
·主要试剂 | 第35页 |
·相关溶液配制 | 第35-36页 |
·主要仪器 | 第36页 |
2 方法 | 第36-37页 |
·试验动物的分组及免疫程序 | 第36-37页 |
·间接ELISA法检测鸭血清抗DPV特异性IgG方法的建立 | 第37页 |
3 试验结果 | 第37-42页 |
·最佳抗原和最佳血清稀释度的确定 | 第37-38页 |
·最佳酶标抗体稀释度的确定 | 第38页 |
·间接ELISA方法检测抗DPV IgG的应用 | 第38-42页 |
4 讨论 | 第42-43页 |
·免疫途径对基因疫苗免疫效果的影响 | 第42页 |
·口服免疫剂量对基因疫苗免疫效果的影响 | 第42-43页 |
·佐剂对基因疫苗免疫效果的影响 | 第43页 |
5 小结 | 第43-45页 |
第六章 间接免疫组织化学法检测DPV基因疫苗免疫后DPV UL24抗原在雏鸭组织器官中的动态分布 | 第45-54页 |
1 材料 | 第45-46页 |
2 方法 | 第46-47页 |
·载玻片和盖玻片的处理 | 第46页 |
·间接免疫组化检测材料的固定、包埋和切片 | 第46页 |
·间接免疫组化检测DPV UL24抗原方法的优化与建立 | 第46-47页 |
3 结果 | 第47-50页 |
·间接免疫组化法检测DPV UL24抗原方法的建立和优化 | 第47页 |
·鸭瘟弱毒疫苗在雏鸭组织器官中的动态分布 | 第47-48页 |
·以减毒沙门氏菌为载体的DPV UL24基因疫苗在雏鸭组织器官中的抗原动态分布 | 第48-49页 |
·肌注DPV UL24基因疫苗在雏鸭组织器官中的抗原动态分布 | 第49-50页 |
4 讨论 | 第50-52页 |
·间接免疫组化法检测DPV UL24基因疫苗在雏鸭组织器官中的动态分布 | 第50-51页 |
·鸭瘟弱毒疫苗与DPV UL24基因疫苗在雏鸭组织器官中动态分布的比较 | 第51页 |
·不同免疫途径对DPV UL24基因疫苗在雏鸭组织器官中动态分布的影响 | 第51-52页 |
5 小结 | 第52-54页 |
第七章 间接免疫荧光法检测DPV基因疫苗免疫后DPV UL24抗原在雏鸭体内的动态分布 | 第54-61页 |
1 材料 | 第54页 |
·组织样品 | 第54页 |
·主要试剂及配制 | 第54页 |
·主要仪器及设备 | 第54页 |
2 方法 | 第54-55页 |
·载玻片和盖玻片的处理 | 第54-55页 |
·间接免疫荧光检测材料的固定、包埋和切片 | 第55页 |
·间接免疫荧光检测DPV UL24抗原方法的优化与建立 | 第55页 |
3 结果 | 第55-58页 |
·间接免疫荧光检测DPV UL24抗原方法的建立和优化 | 第55-56页 |
·鸭瘟弱毒疫苗在雏鸭组织器官中的动态分布 | 第56页 |
·口服以减毒沙门氏菌为载体的DPV基因疫苗在雏鸭组织器官中抗原的动态分布 | 第56-58页 |
·肌注DPV基因疫苗在雏鸭组织器官中抗原的动态分布 | 第58页 |
4 讨论 | 第58-59页 |
·间接免疫荧光法检测DPV UL24基因疫苗在雏鸭组织器官中的动态分布 | 第58-59页 |
·鸭瘟弱毒疫苗与DPV UL24基因疫苗在雏鸭组织器官中动态分布的比较 | 第59页 |
5 小结 | 第59-61页 |
第三部分 参考文献 | 第61-69页 |
附录 | 第69-97页 |
1 附图 | 第69-97页 |
·间接免疫组化图 | 第69-83页 |
·间接免疫荧光图 | 第83-97页 |
致谢 | 第97-98页 |
作者简介及发表论文情况 | 第98页 |