| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-26页 |
| ·植酸酶概述 | 第15-18页 |
| ·植酸及植酸酶 | 第15页 |
| ·植酸酶的特性 | 第15-18页 |
| ·饲用植酸酶蛋白质工程研究进展 | 第18-22页 |
| ·植酸酶改性策略 | 第18-19页 |
| ·饲用植酸酶改性研究进展 | 第19-22页 |
| ·本研究的前期工作基础及目的意义 | 第22-23页 |
| ·本研究的前期工作基础 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的意义 | 第23页 |
| ·本研究的技术路线 | 第23-26页 |
| 第二章 易错PCR技术提高突变黑曲霉N25植酸酶酶活及热稳定性的研究 | 第26-53页 |
| ·试验材料与仪器 | 第26-30页 |
| ·菌株及载体 | 第26页 |
| ·试剂与溶液 | 第26-29页 |
| ·培养基 | 第29-30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-39页 |
| ·通过易错PCR技术进行植酸酶突变体库构建 | 第30-34页 |
| ·植酸酶突变体库的高通量筛选 | 第34-35页 |
| ·重组产突变植酸酶的基因工程菌的诱导表达 | 第35-37页 |
| ·重组产突变植酸酶的基因工程菌的遗传稳定性分析 | 第37页 |
| ·重组产突变植酸酶的基因工程菌的拷贝数分析 | 第37-39页 |
| ·突变植酸酶基因序列及结构分析 | 第39页 |
| ·突变酶的纯化及酶学性质分析 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-49页 |
| ·通过易错PCR技术进行植酸酶突变体库的构建 | 第39-42页 |
| ·植酸酶突变体库的高通量筛选 | 第42页 |
| ·重组突变植酸酶基因工程菌的诱导表达 | 第42-43页 |
| ·重组突变植酸酶基因工程菌的遗传稳定性分析 | 第43-44页 |
| ·重组突变植酸酶基因工程菌的拷贝数分析 | 第44页 |
| ·突变植酸酶基因序列及结构分析 | 第44-49页 |
| ·讨论 | 第49-53页 |
| ·通过易错PCR技术对植酸酶phyA6A基因的定向进化 | 第49-50页 |
| ·突变菌株植酸酶基因拷贝数分析 | 第50-51页 |
| ·突变菌株植酸酶整体结构分析 | 第51页 |
| ·突变菌株植酸酶结构与能量的关系 | 第51-53页 |
| 第三章 DNA改组技术提高突变黑曲霉N25植酸酶酶活及热稳定性的研究 | 第53-70页 |
| ·试验材料与仪器 | 第53-54页 |
| ·方法 | 第54-57页 |
| ·通过DNA改组技术进行植酸酶突变体库的构建 | 第54-56页 |
| ·植酸酶突变体库的高通量筛选 | 第56页 |
| ·重组产突变植酸酶的基因工程菌的诱导表达 | 第56-57页 |
| ·重组产突变植酸酶的基因工程菌的遗传稳定性分析 | 第57页 |
| ·重组产突变植酸酶的基因工程菌的拷贝数分析 | 第57页 |
| ·突变植酸酶基因序列及结构分析 | 第57页 |
| ·突变酶的纯化及酶学性质分析 | 第57页 |
| ·结果与分析 | 第57-67页 |
| ·通过DNA改组技术进行植酸酶突变体库的构建 | 第57-60页 |
| ·植酸酶突变体库的高通量筛选 | 第60页 |
| ·重组产突变植酸酶的基因工程菌的诱导表达 | 第60-61页 |
| ·重组突变植酸酶基因工程菌的遗传稳定性分析 | 第61-62页 |
| ·重组突变植酸酶基因工程菌的拷贝数分析 | 第62页 |
| ·突变植酸酶基因序列及结构分析 | 第62-67页 |
| ·讨论 | 第67-70页 |
| ·通过DNA改组技术进行植酸酶突变体库的构建 | 第67-68页 |
| ·突变植酸酶突变植酸酶成熟蛋白结构与能量分析 | 第68-70页 |
| 第四章 突变位点对植酸酶酶学性质影响的研究 | 第70-80页 |
| ·试验材料与仪器 | 第70-71页 |
| ·方法 | 第71-76页 |
| ·植酸酶基因的定点突变 | 第71-75页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第75页 |
| ·重组表达载体的电击转化及转化子的筛选 | 第75页 |
| ·重组毕赤酵母的诱导表达 | 第75-76页 |
| ·突变植酸酶纯化及酶学性质研究 | 第76页 |
| ·结果与分析 | 第76-79页 |
| ·植酸酶基因的定点突变 | 第76-77页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第77-78页 |
| ·重组表达载体的电击转化及转化子的筛选 | 第78-79页 |
| ·重组毕赤酵母的诱导表达 | 第79页 |
| ·讨论 | 第79-80页 |
| 第五章 突变植酸酶的纯化及酶学性质研究 | 第80-99页 |
| ·试验材料与仪器 | 第80-81页 |
| ·方法 | 第81-84页 |
| ·突变植酸酶的分离纯化 | 第81-82页 |
| ·突变酶的酶学性质分析 | 第82-84页 |
| ·结与分析 | 第84-90页 |
| ·突变植酸酶的分离纯化 | 第84-85页 |
| ·突变植酸酶的酶学性质 | 第85-90页 |
| ·讨论 | 第90-99页 |
| ·突变菌株植酸酶的酶学性质 | 第90-91页 |
| ·突变菌株植酸酶结构与最适pH的关系 | 第91页 |
| ·突变菌株植酸酶结构与热稳定性的关系 | 第91-94页 |
| ·突变菌株植酸酶结构与催化效率的关系 | 第94-96页 |
| ·突变植酸酶热稳定性曲线分析 | 第96页 |
| ·突变位点对植酸酶功能的协同效应 | 第96-99页 |
| 结论 | 第99-100页 |
| 参考文献 | 第100-107页 |
| 致谢 | 第107-108页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第108页 |
