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鸭疫里默氏杆菌转座子突变库的构建以及生物被膜形成相关基因的筛选

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-5页
缩略词表第5-9页
第一部分 文献综述第9-30页
 1. 鸭疫里默氏杆菌的研究进展第9-12页
   ·分类地位第9页
   ·生物学特性第9-10页
   ·血清型第10页
   ·毒力基因与致病因子第10-12页
 2. 病原细菌毒力基因鉴定方法的研究进展第12-24页
   ·生物化学方法第13页
   ·遗传学方法第13-20页
   ·抑制性差减杂交技术(suppression subtractive hybrization,SSH)第20-21页
   ·选择性捕获转录序列(selective capture of transcribed sequences,SCOTS)第21-22页
   ·体内诱导抗原(in vivo induced antigen technology,IVIAT)第22-24页
 展望第24页
 主要参考文献第24-30页
第二部分 实验内容第30-57页
 第一章 鸭疫里默氏杆菌转座子突变库的构建第30-39页
  1 实验材料第30-32页
   ·菌株和质粒第30-31页
   ·培养基第31页
   ·抗生素及使用浓度第31页
   ·试剂与器材第31-32页
   ·PCR引物第32页
  2 试验方法第32-34页
   ·鸭疫里默氏杆菌CH3和大肠杆菌BW19851的复苏与培养第32页
   ·鸭疫里默氏杆菌CH3的药敏试验第32-33页
   ·结合转导第33页
   ·突变体的鉴定第33-34页
     ·Erm~+Kan~+双抗初筛选第33页
     ·双重PCR的确定第33-34页
   ·突变体库的保存第34页
  3 结果和分析第34-36页
   ·鸭疫里默氏杆菌CH3的药敏试验结果第34-35页
   ·结合转导前供受体菌的培养第35页
   ·结合转导及突变体的鉴定第35-36页
  4 讨论第36-38页
   ·作为受体菌鸭疫里默氏杆菌菌种的选择第36页
   ·结合转导前细菌的培养方式及生长状态第36-37页
   ·Mg~(2+)、温度、时间对结合转导的影响第37页
   ·供受体菌菌数及比例第37页
   ·用于筛选突变株的抗生素的选择第37-38页
  主要参考文献第38-39页
 第二章 生物被膜形成相关基因的筛选及分析第39-57页
  1 实验材料第39-41页
   ·筛选对象第39页
   ·试剂与器材第39-41页
     ·试剂第39-41页
     ·器材第41页
   ·PCR引物第41页
  2 实验方法第41-48页
   ·生物被膜减少株的筛选第41-42页
   ·生物被膜减少株插入序列的鉴定第42-44页
   ·Southern blot分析Tn-X的插入第44-48页
   ·五株突变株的形态特性观察及生长曲线测定第48页
  3 实验结果第48-54页
   ·筛选突变株生物被膜减少株的鉴定结果第48-50页
   ·生物被膜减少株插入序列的鉴定结果第50-51页
   ·Southern blot分析Tn-X的插入结果第51-53页
   ·五株突变株的形态特性观察及生长曲线测定结果第53-54页
  4 讨论第54-56页
  主要参考文献第56-57页
全文总结第57-58页
致谢第58-59页
附录:攻读硕士学位期间发表的论文第59-60页

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