致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
1. 文献综述 | 第9-23页 |
·SO_2对植物伤害的生理生化机制研究进展 | 第9-16页 |
·SO_2气体对环境的影响 | 第9-10页 |
·SO_2气体对植物危害的表现 | 第10页 |
·SO_2气体对植物危害的机理 | 第10-12页 |
·H+降低细胞pH 造成的伤害 | 第10页 |
·SO_3~(2-)、HS0_3~-的直接伤害 | 第10-11页 |
·SO_3~(2-)、HS0_3~-的间接毒害 | 第11-12页 |
·植物对SO_2 的抗性 | 第12-16页 |
·忍耐性 | 第12-15页 |
·屏蔽性 | 第15-16页 |
·植物亚硫酸氧化酶 | 第16-18页 |
·生化结构 | 第16-17页 |
·晶体结构 | 第17页 |
·生化特性 | 第17-18页 |
·定位研究 | 第18页 |
·参与植物硫代谢的功能 | 第18页 |
·解除过量SO_2及SO_3~(2-)毒害的功能 | 第18页 |
·真核表达体系 | 第18-23页 |
·转基因植物表达系统 | 第19-23页 |
·双子叶 | 第21-22页 |
·单子叶 | 第22-23页 |
2. 引言 | 第23-24页 |
3. 材料和方法 | 第24-39页 |
·实验试剂和材料 | 第24-27页 |
·各种酶和试剂 | 第24页 |
·常用培养基和溶液的配制 | 第24-25页 |
·植物材料及培养和处理 | 第25页 |
·植物材料培养 | 第25页 |
·玉米材料的处理 | 第25页 |
·半定量实验所需用到的部分引物 | 第25-27页 |
·实验方法 | 第27-39页 |
·SO_2熏气处理筛选抗性和易感玉米品种 | 第27页 |
·SO_2熏气处理后半定量研究玉米部分相关基因的表达 | 第27-28页 |
·RNA提取方法 | 第27页 |
·RNA 的电泳检测和浓度测定 | 第27页 |
·RNA纯化 | 第27-28页 |
·RNA反转为cDNA方法 | 第28页 |
·PCR扩增基因片段体系配制和PCR反应程序 | 第28页 |
·琼脂糖电泳检测基因片段并照相保存 | 第28页 |
·SO_2熏气处理后研究玉米生理生化变化 | 第28-30页 |
·亚硫酸盐浓度测定方法 | 第29页 |
·H_2O_2浓度测定方法 | 第29页 |
·超氧离子浓度测定方法 | 第29页 |
·SOD酶活性测定 | 第29-30页 |
·H_2O_2喷涂叶片处理下玉米部分基因表达研究 | 第30页 |
·玉米ZmSO基因cDNA中间片段的克隆 | 第30-32页 |
·切胶回收基因片段 | 第30-31页 |
·基因片段连接T 载体 | 第31-32页 |
·菌落PCR 检测 | 第32页 |
·摇菌并提取质粒 | 第32页 |
·玉米ZmSO 基因cDNA 5'端和3'端序列的克隆 | 第32页 |
·玉米ZmSO 基因全长cDNA 编码区的克隆 | 第32-33页 |
·ZmSO基因在SO_2胁迫下的表达分析 | 第33页 |
·PCR 产物电泳分析和数据处理 | 第33页 |
·基因序列比对、结构预测与进化树分析 | 第33页 |
·ZmSO 基因的瞬时表达研究 | 第33-35页 |
·载体PCAPE2-SO 的构建 | 第33-34页 |
·基因农杆菌注射法转化本氏烟 | 第34页 |
·转基因植株的鉴定 | 第34-35页 |
·亚硫酸盐处理下叶片中叶绿素含量的测定 | 第35页 |
·SO 酶活和亚硫酸盐含量的测定 | 第35页 |
·转ZmSO 基因的植物遗传表达研究 | 第35-39页 |
·载体P27-SO 的构建 | 第35-37页 |
·基因叶盘法转化珊西烟 | 第37-39页 |
4. 结果与分析 | 第39-55页 |
·玉米抗感SO_2材料的获得 | 第39-40页 |
·SO_2胁迫下齐319 和昌7-2 中所表达基因的比较 | 第40-41页 |
·RNA 的检测和浓度的测量 | 第40页 |
·齐319 和昌7-2 基因的表达差异 | 第40-41页 |
·SO_2胁迫下齐319 和昌7-2 叶片中生理生化变化的研究结果 | 第41-44页 |
·亚硫酸盐的相对含量 | 第41-42页 |
·过氧化氢的相对浓度 | 第42页 |
·超氧离子的相对浓度 | 第42-43页 |
·SOD 酶活的相对变化 | 第43-44页 |
·H_2O_2喷涂叶片处理下齐319 和昌7-2 基因的表达差异 | 第44页 |
·ZmSO 基因的克隆及序列的分析和比对 | 第44-48页 |
·ZmSO 全长cDNA 的克隆 | 第44-45页 |
·ZmSO 全长cDNA 序列的生物信息学分析 | 第45-47页 |
·ZmSO参与玉米对SO_2胁迫的抗性反应 | 第47-48页 |
·ZmSO 基因的瞬时表达和功能的初步分析 | 第48-51页 |
·载体PCAPE2-SO 的构建和检测 | 第48-49页 |
·农杆菌注射侵染本氏烟叶片的结果 | 第49-50页 |
·转 ZmSO 本氏烟植株的鉴定 | 第50页 |
·ZmSO 基因功能的初步分析 | 第50-51页 |
·ZmSO 基因的植物遗传表达 | 第51-55页 |
·载体P27-SO 的构建和检测 | 第51-52页 |
·叶盘法得到的转ZmSO 基因植株 | 第52-55页 |
5. 结论与讨论 | 第55-56页 |
·齐319 可能存在抗SO_2的抗性机制 | 第55页 |
·ZmSO 基因功能的确认 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
英文摘要 | 第61-62页 |