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玉米对SO2胁迫的抗性反应及亚硫酸氧化酶基因ZmSO的初步分析

致谢第1-8页
摘要第8-9页
1. 文献综述第9-23页
   ·SO_2对植物伤害的生理生化机制研究进展第9-16页
     ·SO_2气体对环境的影响第9-10页
     ·SO_2气体对植物危害的表现第10页
     ·SO_2气体对植物危害的机理第10-12页
       ·H+降低细胞pH 造成的伤害第10页
       ·SO_3~(2-)、HS0_3~-的直接伤害第10-11页
       ·SO_3~(2-)、HS0_3~-的间接毒害第11-12页
     ·植物对SO_2 的抗性第12-16页
       ·忍耐性第12-15页
       ·屏蔽性第15-16页
   ·植物亚硫酸氧化酶第16-18页
     ·生化结构第16-17页
     ·晶体结构第17页
     ·生化特性第17-18页
     ·定位研究第18页
     ·参与植物硫代谢的功能第18页
     ·解除过量SO_2及SO_3~(2-)毒害的功能第18页
   ·真核表达体系第18-23页
     ·转基因植物表达系统第19-23页
       ·双子叶第21-22页
       ·单子叶第22-23页
2. 引言第23-24页
3. 材料和方法第24-39页
   ·实验试剂和材料第24-27页
     ·各种酶和试剂第24页
     ·常用培养基和溶液的配制第24-25页
     ·植物材料及培养和处理第25页
       ·植物材料培养第25页
       ·玉米材料的处理第25页
     ·半定量实验所需用到的部分引物第25-27页
   ·实验方法第27-39页
     ·SO_2熏气处理筛选抗性和易感玉米品种第27页
     ·SO_2熏气处理后半定量研究玉米部分相关基因的表达第27-28页
       ·RNA提取方法第27页
       ·RNA 的电泳检测和浓度测定第27页
       ·RNA纯化第27-28页
       ·RNA反转为cDNA方法第28页
       ·PCR扩增基因片段体系配制和PCR反应程序第28页
       ·琼脂糖电泳检测基因片段并照相保存第28页
     ·SO_2熏气处理后研究玉米生理生化变化第28-30页
       ·亚硫酸盐浓度测定方法第29页
       ·H_2O_2浓度测定方法第29页
       ·超氧离子浓度测定方法第29页
       ·SOD酶活性测定第29-30页
     ·H_2O_2喷涂叶片处理下玉米部分基因表达研究第30页
     ·玉米ZmSO基因cDNA中间片段的克隆第30-32页
       ·切胶回收基因片段第30-31页
       ·基因片段连接T 载体第31-32页
       ·菌落PCR 检测第32页
       ·摇菌并提取质粒第32页
     ·玉米ZmSO 基因cDNA 5'端和3'端序列的克隆第32页
     ·玉米ZmSO 基因全长cDNA 编码区的克隆第32-33页
     ·ZmSO基因在SO_2胁迫下的表达分析第33页
     ·PCR 产物电泳分析和数据处理第33页
     ·基因序列比对、结构预测与进化树分析第33页
     ·ZmSO 基因的瞬时表达研究第33-35页
       ·载体PCAPE2-SO 的构建第33-34页
       ·基因农杆菌注射法转化本氏烟第34页
       ·转基因植株的鉴定第34-35页
       ·亚硫酸盐处理下叶片中叶绿素含量的测定第35页
       ·SO 酶活和亚硫酸盐含量的测定第35页
     ·转ZmSO 基因的植物遗传表达研究第35-39页
       ·载体P27-SO 的构建第35-37页
       ·基因叶盘法转化珊西烟第37-39页
4. 结果与分析第39-55页
   ·玉米抗感SO_2材料的获得第39-40页
   ·SO_2胁迫下齐319 和昌7-2 中所表达基因的比较第40-41页
     ·RNA 的检测和浓度的测量第40页
     ·齐319 和昌7-2 基因的表达差异第40-41页
   ·SO_2胁迫下齐319 和昌7-2 叶片中生理生化变化的研究结果第41-44页
     ·亚硫酸盐的相对含量第41-42页
     ·过氧化氢的相对浓度第42页
     ·超氧离子的相对浓度第42-43页
     ·SOD 酶活的相对变化第43-44页
   ·H_2O_2喷涂叶片处理下齐319 和昌7-2 基因的表达差异第44页
   ·ZmSO 基因的克隆及序列的分析和比对第44-48页
     ·ZmSO 全长cDNA 的克隆第44-45页
     ·ZmSO 全长cDNA 序列的生物信息学分析第45-47页
     ·ZmSO参与玉米对SO_2胁迫的抗性反应第47-48页
   ·ZmSO 基因的瞬时表达和功能的初步分析第48-51页
     ·载体PCAPE2-SO 的构建和检测第48-49页
     ·农杆菌注射侵染本氏烟叶片的结果第49-50页
     ·转 ZmSO 本氏烟植株的鉴定第50页
     ·ZmSO 基因功能的初步分析第50-51页
   ·ZmSO 基因的植物遗传表达第51-55页
     ·载体P27-SO 的构建和检测第51-52页
     ·叶盘法得到的转ZmSO 基因植株第52-55页
5. 结论与讨论第55-56页
   ·齐319 可能存在抗SO_2的抗性机制第55页
   ·ZmSO 基因功能的确认第55-56页
参考文献第56-61页
英文摘要第61-62页

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