| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 前言 | 第9-18页 |
| 1 研究背景 | 第9-12页 |
| 2 玉米赤霉烯酮简介 | 第12-13页 |
| ·玉米赤霉烯酮的理化性质 | 第12页 |
| ·玉米赤霉烯酮的代谢 | 第12-13页 |
| 3 ZEA的毒性 | 第13-16页 |
| ·急性毒性 | 第13页 |
| ·生殖与发育毒性 | 第13-14页 |
| ·免疫毒性 | 第14-15页 |
| ·致癌性 | 第15页 |
| ·遗传毒性 | 第15-16页 |
| ·细胞毒性 | 第16页 |
| 4 卵巢颗粒细胞 | 第16-17页 |
| 5 研究目的及意义 | 第17-18页 |
| 第二章 猪卵巢细胞的分离培养与鉴定 | 第18-25页 |
| 1 材料与方法 | 第18-21页 |
| ·主要试剂与仪器(见附录) | 第18页 |
| ·卵巢颗粒细胞的分离与培养 | 第18-19页 |
| ·细胞计数 | 第19页 |
| ·颗粒细胞形态学观察 | 第19-20页 |
| ·颗粒细胞鉴定 | 第20页 |
| ·细胞生长曲线测定 | 第20-21页 |
| 2 结果 | 第21-23页 |
| ·颗粒细胞形态学观察 | 第21-22页 |
| ·颗粒细胞鉴定 | 第22页 |
| ·细胞生长曲线测定 | 第22-23页 |
| 3 讨论 | 第23-25页 |
| 第三章 玉米赤霉烯酮(ZEA)对卵巢颗粒细胞的毒性作用 | 第25-35页 |
| 1 材料与方法 | 第25-29页 |
| ·主要试剂与仪器(见附录) | 第25页 |
| ·MTT方法测定ZEA对卵巢颗粒细胞的细胞毒性作用 | 第25-26页 |
| ·细胞攻毒及分组 | 第26页 |
| ·SOD、MDA及GSH-Px的测定 | 第26-28页 |
| ·细胞凋亡的检测 | 第28-29页 |
| ·统计学分析 | 第29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-32页 |
| ·ZEA对卵巢颗粒细胞的细胞毒性 | 第29-30页 |
| ·细胞中SOD、MDA以及GSH-Px的检测 | 第30页 |
| ·TUNEL检测细胞凋亡 | 第30-31页 |
| ·Annexin-FITC/PI双染法检测细胞凋亡 | 第31-32页 |
| 3.讨论 | 第32-35页 |
| 第四章 ZEA诱导卵巢颗粒细胞凋亡机理的研究 | 第35-45页 |
| 1.材料与方法 | 第35-39页 |
| ·主要试剂与仪器(见附录) | 第35页 |
| ·活性氧的测定 | 第35-36页 |
| ·卵巢颗粒细胞线粒体膜电位的测定 | 第36页 |
| ·Caspase-3和Caspase-9蛋白含量的检测(western blot) | 第36-38页 |
| ·细胞免疫荧光方法测定Caspase-3蛋白的定位 | 第38页 |
| ·Z-VAD-FMK及Ac-LEHD-FMK对细胞凋亡的抑制作用 | 第38-39页 |
| ·统计学分析 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-43页 |
| ·活性氧(ROS)检测 | 第39页 |
| ·线粒体膜电位的检测 | 第39-40页 |
| ·Western blot检测Caspase-3,9蛋白含量 | 第40-41页 |
| ·ZEA诱导caspase-3激活与易位 | 第41-42页 |
| ·Z-VAD-FMK及Ac-LEHD-FMK对凋亡率的影响 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 附录 | 第51-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 作者简介 | 第55页 |
