| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-18页 |
| 1 低密度脂蛋白受体(LDLR)的研究进展 | 第9-12页 |
| ·LDLR的基因结构 | 第9-10页 |
| ·LDLR的蛋白质结构 | 第10页 |
| ·LDLR的基因调控 | 第10页 |
| ·LDLR的生理功能 | 第10-11页 |
| ·LDLR与降血脂作用 | 第11-12页 |
| 2 黑茶降血脂的研究进展 | 第12-16页 |
| ·黑茶降血脂的细胞水平及动物试验 | 第13-14页 |
| ·黑茶降血脂的临床试验 | 第14页 |
| ·黑茶的高通量筛选辅助降血脂研究 | 第14-15页 |
| ·黑茶降血脂作用机理 | 第15-16页 |
| ·调节胆固醇代谢 | 第15-16页 |
| ·调节甘油三酯代谢 | 第16页 |
| 3 本研究的目的与意义 | 第16-17页 |
| 4 研究内容与技术路线 | 第17-18页 |
| ·研究内容 | 第17页 |
| ·含荧光素酶报告基因的质粒构建 | 第17页 |
| ·LDLR模型的建立及优化 | 第17页 |
| ·LDLR模型的应用 | 第17页 |
| ·技术路线 | 第17-18页 |
| 第二章 含荧光素酶报告基因的质粒构建 | 第18-30页 |
| 1 材料与方法 | 第19-24页 |
| ·试验材料、仪器与试剂 | 第19页 |
| ·试验方法 | 第19-24页 |
| ·pGL3-Basic载体大片断的制备 | 第19-21页 |
| ·LDLR启动子片断的制备 | 第21-22页 |
| ·LDLR启动子片断和pGL3-Basic载体大片断连接 | 第22页 |
| ·重组质粒转化DH5α感受态细胞 | 第22页 |
| ·菌落PCR方法鉴别重组质粒 | 第22-23页 |
| ·双酶切鉴别重组质粒 | 第23页 |
| ·测序及比对 | 第23页 |
| ·重组质粒大量制备 | 第23-24页 |
| 2 结果与分析 | 第24-28页 |
| ·pGL3-Basic载体大片断的制备 | 第24-25页 |
| ·LDLR启动子的制备 | 第25-26页 |
| ·菌落PCR鉴别重组质粒 | 第26页 |
| ·双酶切鉴别重组质粒 | 第26-27页 |
| ·测序及比对 | 第27-28页 |
| 3 讨论 | 第28-29页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳检测DNA时,产生拖尾现象的原因与解决方法 | 第28页 |
| ·PCR产物中出现非特异性扩增条带的原因与解决方法 | 第28-29页 |
| 4 本章小结 | 第29-30页 |
| 第三章 LDLR模型的建立及优化 | 第30-39页 |
| 1 材料与方法 | 第30-34页 |
| ·试验材料、仪器与试剂 | 第30-31页 |
| ·试验方法 | 第31-34页 |
| ·细胞培养 | 第31-32页 |
| ·细胞的瞬时转染 | 第32页 |
| ·报告基因检测 | 第32-33页 |
| ·阳性药物辛伐他汀对细胞增殖功能的影响(CCK8法) | 第33页 |
| ·共转染过程中质粒比的选择 | 第33页 |
| ·阳性药物辛伐他汀作用的最佳浓度选择 | 第33-34页 |
| ·模型的稳定性 | 第34页 |
| ·模型的灵敏性 | 第34页 |
| ·统计学处理 | 第34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-37页 |
| ·阳性药物辛伐他汀对细胞增殖功能的影响(CCK8法) | 第34-35页 |
| ·共转染过程中质粒比的选择 | 第35页 |
| ·阳性药物辛伐他汀作用的最佳浓度选择 | 第35-36页 |
| ·模型的稳定性 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-38页 |
| ·关于LDLR/Luc系统构建原理 | 第37页 |
| ·关于荧光素酶 | 第37-38页 |
| ·关于Z'因子 | 第38页 |
| 4 本章小结 | 第38-39页 |
| 第四章 LDLR模型的应用 | 第39-44页 |
| 1 材料与方法 | 第39-41页 |
| ·试验材料、仪器与试剂 | 第39页 |
| ·试验方法 | 第39-41页 |
| ·黑茶水提物的制备 | 第39-40页 |
| ·细胞培养 | 第40页 |
| ·8种黑茶水提取物对细胞增殖功能的影响(CCK8法) | 第40页 |
| ·LDLR模型的建立 | 第40-41页 |
| ·阳性样品的筛选 | 第41页 |
| ·统计学处理 | 第41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-42页 |
| ·8种黑茶水提取物对细胞增殖功能的影响 | 第41-42页 |
| ·阳性样品的筛选 | 第42页 |
| 3 讨论 | 第42-43页 |
| 4 本章小结 | 第43-44页 |
| 第五章 全文总结 | 第44-45页 |
| 1 本文主要研究结果 | 第44页 |
| 2 展望 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 附录Ⅰ LDLR启动子正义链测序报告单 | 第50-51页 |
| 附录Ⅱ LDLR启动子反义链测序报告单 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
