| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章: 绪论 | 第11-27页 |
| 1.1 糖生物学的简要概述 | 第11-17页 |
| 1.1.1 糖生物学的产生与发展 | 第11-12页 |
| 1.1.2 糖生物学的研究内容 | 第12-15页 |
| 1.1.3 糖生物学的研究技术和应用 | 第15-17页 |
| 1.2 糖结合蛋白的概述 | 第17-22页 |
| 1.2.1 糖结合蛋白的介绍 | 第17-18页 |
| 1.2.2 糖结合蛋白的分类 | 第18-21页 |
| 1.2.3 糖结合蛋白的功能 | 第21-22页 |
| 1.3 糖芯片技术及其应用 | 第22-25页 |
| 1.3.1 糖芯片技术概述 | 第22-23页 |
| 1.3.2 糖芯片的应用 | 第23-25页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第25-27页 |
| 第二章: 糖肽芯片技术的建立及优化 | 第27-35页 |
| 2.1 糖肽芯片的原理 | 第27页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第27-30页 |
| 2.2.1 实验仪器与材料 | 第27-28页 |
| 2.2.2 蛋白质的酶解 | 第28-29页 |
| 2.2.3 凝集素选择性分离糖肽 | 第29页 |
| 2.2.4 玻片的环氧化修饰 | 第29页 |
| 2.2.5 芯片的点制 | 第29-30页 |
| 2.2.6 糖肽芯片检测糖结合蛋白方法的建立及优化 | 第30页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第30-34页 |
| 2.3.1 凝集素选择 | 第30-31页 |
| 2.3.2 点样液pH及类别的确定 | 第31-32页 |
| 2.3.3 点样湿度的确定 | 第32页 |
| 2.3.4 烘干时间的确定 | 第32-33页 |
| 2.3.5 封闭条件的确定 | 第33页 |
| 2.3.6 最佳孵育缓冲液的确定 | 第33-34页 |
| 2.4 本章小结 | 第34-35页 |
| 第三章: 糖肽芯片检测肝癌发展过程中人唾液糖结合蛋白表达差异 | 第35-47页 |
| 3.1 实验材料与方法 | 第35-39页 |
| 3.1.1 仪器与材料 | 第35页 |
| 3.1.2 探针的选择与制备 | 第35-36页 |
| 3.1.3 糖肽芯片的制备 | 第36-37页 |
| 3.1.4 唾液样本的采集、处理与标记 | 第37页 |
| 3.1.5 样本的糖肽芯片检测 | 第37-38页 |
| 3.1.6 糖肽-磁性微粒复合物的制备 | 第38页 |
| 3.1.7 唾液样本中糖结合蛋白的富集 | 第38页 |
| 3.1.8 SDS-PAGE电泳 | 第38-39页 |
| 3.1.9 糖结合蛋白的蛋白LC-MS/MS分析 | 第39页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第39-44页 |
| 3.2.1 Cy3荧光标记后唾液蛋白浓度的测定 | 第39-40页 |
| 3.2.2 梯度实验 | 第40页 |
| 3.2.3 糖肽芯片结果及分析 | 第40-42页 |
| 3.2.4 糖肽-磁性微粒复合物富集糖结合蛋白浓度的测定 | 第42页 |
| 3.2.5 SDS-PAGE电泳结果 | 第42-43页 |
| 3.2.6 糖结合蛋白GO分析 | 第43-44页 |
| 3.3 本章小结 | 第44-47页 |
| 第四章: 糖肽芯片检测肝癌发展过程中人血清糖结合蛋白表达差异 | 第47-55页 |
| 4.1 实验材料与方法 | 第47-48页 |
| 4.1.1 仪器与材料 | 第47页 |
| 4.1.2 探针的选择与制备 | 第47页 |
| 4.1.3 糖肽芯片的制备 | 第47页 |
| 4.1.4 血清样本的采集、处理与标记 | 第47页 |
| 4.1.5 样本的糖肽芯片检测 | 第47页 |
| 4.1.6 糖肽-磁性微粒复合物的制备 | 第47页 |
| 4.1.7 血清样本中糖结合蛋白的富集 | 第47页 |
| 4.1.8 SDS-PAGE电泳 | 第47页 |
| 4.1.9 糖结合蛋白的蛋白LC-MS/MS分析 | 第47-48页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第48-53页 |
| 4.2.1 Cy3荧光标记后唾液蛋白浓度的测定 | 第48页 |
| 4.2.2 梯度实验 | 第48-49页 |
| 4.2.3 糖肽芯片结果及分析 | 第49-51页 |
| 4.2.4 糖肽-磁性微粒复合物富集糖结合蛋白浓度的测定 | 第51页 |
| 4.2.5 SDS-PAGE电泳结果 | 第51-52页 |
| 4.2.6 糖结合蛋白GO分析 | 第52-53页 |
| 4.3 本章小结 | 第53-55页 |
| 全文总结 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第66页 |
