首页--生物科学论文--植物学论文--植物细胞遗传学论文--植物基因工程论文

小球藻Rubisco活化酶基因的克隆及表达特性研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
引言第10-11页
1 Rubisco 及其活化酶(RCA)的分子特性第11-19页
   ·Rubisco 的分子特性第11-13页
     ·Rubisco 的研究发展第11页
     ·Rubisco 的类型与结构第11-12页
     ·Rubisco 的功能第12-13页
   ·Rubisco 活化酶的分子特性第13-18页
     ·RCA 的研究发展第13-14页
     ·RCA 的结构与功能第14页
     ·RCA 的活化机制第14-15页
     ·温度对 RCA 的影响第15-16页
     ·CO_2浓度对RCA 的影响第16页
     ·光对 RCA 的影响第16-17页
     ·重金属对 RCA 的影响第17-18页
   ·展望第18-19页
2 蛋白核小球藻 820 株 rca-1 cDNA 序列的克隆与分析第19-42页
   ·材料第19页
   ·实验方法第19-28页
     ·RNA 的提取第19页
     ·总 RNA 质量的检测第19-20页
     ·cDNA 的合成第20页
     ·简并引物的设计第20-21页
     ·rca-1 部分 cDNA 片段的扩增与纯化第21-22页
     ·PCR 产物连接第22页
     ·连接产物的转化第22页
     ·菌落检测及送样第22-23页
     ·3’-RACE 扩增第23-24页
     ·5’-RACE 扩增第24-27页
     ·核苷酸序列的相关分析第27页
     ·蛋白质序列的相关分析第27-28页
   ·结果与分析第28-40页
     ·小球藻总 RNA 的质量检测第28页
     ·rca-1 基因核心片段的获得第28页
     ·5’-RACE 结果第28页
     ·3’-RACE 结果第28-29页
     ·测序结果的拼接与验证第29页
     ·同源性分析结果第29-31页
     ·开放式阅读框(ORF)预测结果第31-34页
     ·rca-1 基因密码子偏好性分析第34-35页
     ·蛋白质的基本性质分析第35-36页
     ·RCA 的细胞定位第36页
     ·跨膜结构预测分析第36-37页
     ·功能结构域预测第37-38页
     ·二级结构预测第38-39页
     ·信号肽切割位点预测第39页
     ·RCA 的三维结构预测第39-40页
   ·讨论第40-42页
     ·简并引物的设计第40页
     ·RACE 技术第40页
     ·RCA 蛋白的基本性质第40-41页
     ·RCA 蛋白的跨膜结构第41页
     ·RCA 蛋白的细胞定位第41-42页
3 蛋白核小球藻 820 株 rca DNA 序列的克隆与分析第42-58页
   ·材料第42页
   ·实验方法第42-49页
     ·基因组 DNA 提取第42页
     ·简并引物的设计第42-43页
     ·rca-2 部分 DNA 片段的克隆及测序第43页
     ·Southern 杂交第43-47页
     ·基因组步移的引物设计第47页
     ·基因组步移文库构建第47页
     ·rca 基因未知序列的扩增及克隆第47-48页
     ·rca DNA 序列的相关分析第48-49页
   ·结果与分析第49-55页
     ·小球藻基因组 DNA 的提取第49页
     ·DIG 标记的 rca 基因探针效率的检测第49-50页
     ·Southern 杂交结果第50页
     ·小球藻 rca-2 基因核心 DNA 片段的扩增结果第50-51页
     ·小球藻 rca-2 基因步移结果第51页
     ·小球藻 rca-1 基因的步移结果第51页
     ·rca DNA 序列的相关分析第51-55页
   ·讨论第55-58页
     ·小球藻 DNA 的提取第55-56页
     ·Southern blot 技术第56页
     ·rca 基因步移引物的设计第56-58页
4 蛋白核小球藻820 株 rca 与 rbcS 的转录表达分析第58-78页
   ·材料第58页
   ·方法第58-60页
     ·实时荧光定量 PCR 引物的设计第58-59页
     ·目的片段的扩增、纯化及连接与转化第59页
     ·重组质粒的筛选和抽提第59页
     ·重组质粒的鉴定第59页
     ·定量标准曲线的构建第59-60页
     ·实验样品的处理第60页
     ·Real-time PCR 实验参数第60页
   ·结果与分析第60-75页
     ·荧光定量目的片段的制备结果第60-61页
     ·标准品质粒扩增曲线分析第61-62页
     ·质粒标准曲线分析第62-64页
     ·标准质粒溶解曲线分析第64-65页
     ·实验样品扩增的动力学参数第65-71页
     ·不同条件处理下的样品拷贝数第71-74页
     ·rca 与 rbcS 在不同处理条件下转录水平的变化第74-75页
   ·讨论第75-78页
     ·Real-time PCR 引物设计第75-76页
     ·荧光定量 PCR 的研究方法第76页
     ·rca 与 rbcS 在不同处理条件下的转录表达第76-78页
5 小结第78-79页
参考文献第79-86页
附录A 英文缩写表第86-87页
附录B DNA 的提取第87-88页
在学研究成果第88-89页
致谢第89页

论文共89页,点击 下载论文
上一篇:Real-TimePCR技术检测紫菜藻际微生物
下一篇:大黄鱼Follisatin基因克隆及表达分析