摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
引言 | 第10-11页 |
1 Rubisco 及其活化酶(RCA)的分子特性 | 第11-19页 |
·Rubisco 的分子特性 | 第11-13页 |
·Rubisco 的研究发展 | 第11页 |
·Rubisco 的类型与结构 | 第11-12页 |
·Rubisco 的功能 | 第12-13页 |
·Rubisco 活化酶的分子特性 | 第13-18页 |
·RCA 的研究发展 | 第13-14页 |
·RCA 的结构与功能 | 第14页 |
·RCA 的活化机制 | 第14-15页 |
·温度对 RCA 的影响 | 第15-16页 |
·CO_2浓度对RCA 的影响 | 第16页 |
·光对 RCA 的影响 | 第16-17页 |
·重金属对 RCA 的影响 | 第17-18页 |
·展望 | 第18-19页 |
2 蛋白核小球藻 820 株 rca-1 cDNA 序列的克隆与分析 | 第19-42页 |
·材料 | 第19页 |
·实验方法 | 第19-28页 |
·RNA 的提取 | 第19页 |
·总 RNA 质量的检测 | 第19-20页 |
·cDNA 的合成 | 第20页 |
·简并引物的设计 | 第20-21页 |
·rca-1 部分 cDNA 片段的扩增与纯化 | 第21-22页 |
·PCR 产物连接 | 第22页 |
·连接产物的转化 | 第22页 |
·菌落检测及送样 | 第22-23页 |
·3’-RACE 扩增 | 第23-24页 |
·5’-RACE 扩增 | 第24-27页 |
·核苷酸序列的相关分析 | 第27页 |
·蛋白质序列的相关分析 | 第27-28页 |
·结果与分析 | 第28-40页 |
·小球藻总 RNA 的质量检测 | 第28页 |
·rca-1 基因核心片段的获得 | 第28页 |
·5’-RACE 结果 | 第28页 |
·3’-RACE 结果 | 第28-29页 |
·测序结果的拼接与验证 | 第29页 |
·同源性分析结果 | 第29-31页 |
·开放式阅读框(ORF)预测结果 | 第31-34页 |
·rca-1 基因密码子偏好性分析 | 第34-35页 |
·蛋白质的基本性质分析 | 第35-36页 |
·RCA 的细胞定位 | 第36页 |
·跨膜结构预测分析 | 第36-37页 |
·功能结构域预测 | 第37-38页 |
·二级结构预测 | 第38-39页 |
·信号肽切割位点预测 | 第39页 |
·RCA 的三维结构预测 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-42页 |
·简并引物的设计 | 第40页 |
·RACE 技术 | 第40页 |
·RCA 蛋白的基本性质 | 第40-41页 |
·RCA 蛋白的跨膜结构 | 第41页 |
·RCA 蛋白的细胞定位 | 第41-42页 |
3 蛋白核小球藻 820 株 rca DNA 序列的克隆与分析 | 第42-58页 |
·材料 | 第42页 |
·实验方法 | 第42-49页 |
·基因组 DNA 提取 | 第42页 |
·简并引物的设计 | 第42-43页 |
·rca-2 部分 DNA 片段的克隆及测序 | 第43页 |
·Southern 杂交 | 第43-47页 |
·基因组步移的引物设计 | 第47页 |
·基因组步移文库构建 | 第47页 |
·rca 基因未知序列的扩增及克隆 | 第47-48页 |
·rca DNA 序列的相关分析 | 第48-49页 |
·结果与分析 | 第49-55页 |
·小球藻基因组 DNA 的提取 | 第49页 |
·DIG 标记的 rca 基因探针效率的检测 | 第49-50页 |
·Southern 杂交结果 | 第50页 |
·小球藻 rca-2 基因核心 DNA 片段的扩增结果 | 第50-51页 |
·小球藻 rca-2 基因步移结果 | 第51页 |
·小球藻 rca-1 基因的步移结果 | 第51页 |
·rca DNA 序列的相关分析 | 第51-55页 |
·讨论 | 第55-58页 |
·小球藻 DNA 的提取 | 第55-56页 |
·Southern blot 技术 | 第56页 |
·rca 基因步移引物的设计 | 第56-58页 |
4 蛋白核小球藻820 株 rca 与 rbcS 的转录表达分析 | 第58-78页 |
·材料 | 第58页 |
·方法 | 第58-60页 |
·实时荧光定量 PCR 引物的设计 | 第58-59页 |
·目的片段的扩增、纯化及连接与转化 | 第59页 |
·重组质粒的筛选和抽提 | 第59页 |
·重组质粒的鉴定 | 第59页 |
·定量标准曲线的构建 | 第59-60页 |
·实验样品的处理 | 第60页 |
·Real-time PCR 实验参数 | 第60页 |
·结果与分析 | 第60-75页 |
·荧光定量目的片段的制备结果 | 第60-61页 |
·标准品质粒扩增曲线分析 | 第61-62页 |
·质粒标准曲线分析 | 第62-64页 |
·标准质粒溶解曲线分析 | 第64-65页 |
·实验样品扩增的动力学参数 | 第65-71页 |
·不同条件处理下的样品拷贝数 | 第71-74页 |
·rca 与 rbcS 在不同处理条件下转录水平的变化 | 第74-75页 |
·讨论 | 第75-78页 |
·Real-time PCR 引物设计 | 第75-76页 |
·荧光定量 PCR 的研究方法 | 第76页 |
·rca 与 rbcS 在不同处理条件下的转录表达 | 第76-78页 |
5 小结 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-86页 |
附录A 英文缩写表 | 第86-87页 |
附录B DNA 的提取 | 第87-88页 |
在学研究成果 | 第88-89页 |
致谢 | 第89页 |