内容提要 | 第1-8页 |
英文缩略词表 | 第8-9页 |
第一章 绪论 | 第9-20页 |
·蛋白质相互作用组学 | 第9-10页 |
·蛋白质相互作用组学概念及研究目的 | 第9页 |
·蛋白质相互作用组学主要研究内容 | 第9-10页 |
·蛋白质相互作用组学主要研究方法 | 第10-13页 |
·双杂交技术 | 第10页 |
·免疫共沉淀技术 | 第10-11页 |
·亲和层析pull-down 技术 | 第11-12页 |
·蛋白质芯片技术 | 第12页 |
·蛋白质细胞内互作检测技术 | 第12-13页 |
·14-3-3 蛋白简介 | 第13-15页 |
·14-3-3 蛋白分类 | 第13页 |
·14-3-3 蛋白结构 | 第13-14页 |
·14-3-3 蛋白的表达 | 第14页 |
·14-3-3 蛋白的生物学功能 | 第14页 |
·14-3-3 蛋白执行功能具有多样性 | 第14-15页 |
·14-3-3 蛋白相互作用组学研究 | 第15-19页 |
·14-3-3 蛋白与蛋白激酶结合 | 第15-16页 |
·14-3-3 蛋白与转录因子相互作用 | 第16页 |
·玉米14-3-3 蛋白及其与淀粉生物合成的关系 | 第16-19页 |
·研究展望 | 第19-20页 |
第二章 材料与方法 | 第20-36页 |
·实验材料 | 第20-24页 |
·植物材料 | 第20页 |
·质粒与菌株 | 第20页 |
·引物、工具酶与试剂盒 | 第20页 |
·主要仪器 | 第20-21页 |
·试剂 | 第21页 |
·常用溶液配制 | 第21-24页 |
·实验方法 | 第24-36页 |
·引物设计 | 第24-25页 |
·14-3-3 蛋白基因的克隆 | 第25-28页 |
·14-3-3 蛋白基因的诱导表达 | 第28-29页 |
·14-3-3 蛋白的纯化 | 第29页 |
·14-3-3 蛋白亲和柱的制备 | 第29-30页 |
·玉米籽粒胚乳的活性蛋白样品制备 | 第30页 |
·亲和层析实验 | 第30页 |
·双向电泳 | 第30-32页 |
·2-DE 凝胶的染色 | 第32-33页 |
·2-DE 凝胶图像分析 | 第33-34页 |
·质谱分析 | 第34-36页 |
第三章 实验结果 | 第36-47页 |
·14-3-3 蛋白基因的克隆 | 第36-37页 |
·玉米胚乳总RNA 的提取 | 第36-37页 |
·玉米胚乳cDNA 的合成 | 第37页 |
·zmAAU93690 基因片段的PCR 扩增 | 第37-38页 |
·原核表达载体的构建 | 第38-39页 |
·14-3-3 蛋白的表达及纯化 | 第39-40页 |
·Bradford 法测定蛋白浓度 | 第40-41页 |
·二维电泳实验体系的鉴定 | 第41-45页 |
·二维电泳预实验 | 第41-42页 |
·NaCl-washing buffer 中NaCl 浓度的选择 | 第42-43页 |
·IPG 胶条pH 范围的选择 | 第43-44页 |
·二维电泳分离展示结合蛋白 | 第44-45页 |
·质谱结果 | 第45-47页 |
第四章 讨论 | 第47-50页 |
·植物总RNA 提取 | 第47页 |
·巢式PCR 获得目的基因 | 第47-48页 |
·His 标签纯化目的蛋白 | 第48页 |
·质谱鉴定结果 | 第48-50页 |
·苹果酸脱氢酶 | 第48-49页 |
·山梨醇脱氢酶 | 第49页 |
·丙糖磷酸异构酶 | 第49页 |
·2-磷酸甘油酸脱水酶(烯醇化酶) | 第49-50页 |
第五章 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
附录 | 第55-64页 |
攻读硕士期间发表的学术论文和其他成果 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
中文摘要 | 第66-68页 |
Abstract | 第68-69页 |