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鸡传染性支气管炎病毒陕西分离株的鉴定与M、N基因的遗传变异分析

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
文献综述第13-20页
 第一章 鸡传染性支气管炎研究进展第13-20页
   ·病原研究第13-14页
     ·病原形态学特征第13-14页
     ·病毒的培养增殖第14页
   ·IBV 诊断方法第14-16页
     ·病原的分离鉴定第14-15页
     ·血清学诊断方法第15页
     ·分子生物学诊断方法第15-16页
   ·分子生物学研究进展第16-19页
     ·IBV 基因组第16页
     ·IBV 主要结构蛋白及功能第16-19页
   ·展望第19-20页
试验研究第20-61页
 第二章 鸡传染性支气管炎病毒陕西地方株的分离鉴定第20-25页
   ·材料第20页
     ·病料第20页
     ·鸡胚及雏鸡第20页
     ·试剂第20页
   ·仪器第20-21页
   ·方法第21页
     ·流行病学调查第21页
     ·病料处理第21页
     ·鸡胚接种与传代第21页
     ·病毒的鉴定第21页
   ·结果第21-23页
     ·流行病学调查第21-22页
     ·病毒的鉴定第22-23页
   ·讨论第23-24页
   ·小结第24-25页
 第三章 鸡传染性支气管炎病毒SX-H09 株、SX-W09 株M 基因的克隆及分子遗传变异分析第25-38页
   ·材料第25-26页
     ·毒株第25页
     ·鸡胚第25页
     ·载体与菌株第25页
     ·主要试剂第25页
     ·引物第25-26页
     ·IBV M 基因参考毒株名称及GenBank 登录号第26页
     ·培养基的配制及常用溶液的配制第26页
     ·主要仪器第26页
   ·方法第26-30页
     ·IBV SX-H09 株、SX-W09 株病毒增殖与RNA 的提取第26-27页
     ·RT-PCR第27页
     ·PCR 产物的纯化与回收第27-28页
     ·PCR 产物的连接与转化第28-29页
     ·重组质粒pMD18-T-M(SX-H09)、pMD18-T-M(SX-W09)的提取第29页
     ·重组质粒pMD18-T-M(SX-H09)、pMD18-T-M(SX-W09)酶切鉴定第29-30页
     ·阳性质粒的序列测定第30页
     ·IBV SX-H09 株、SX-W09 株M 蛋白一级、二级结构和抗原表位的预测分析第30页
   ·结果第30-36页
     ·SX-H09 株、SX-W09 株M 基因的RT-PCR 扩增第30-31页
     ·重组质粒pMD18-T-M(SX-H09)、pMD18-T-M(SX-W09)酶切鉴定第31页
     ·IBV SX-H09 株、SX-W09 株M 基因的核苷酸序列测定第31-32页
     ·IBV 不同毒株M 基因的核苷酸和氨基酸相似性分析第32页
     ·IBV SX-H09 株、SX-W09 株与参考株M 基因的核苷酸及推导的氨基酸序列比较第32-33页
     ·IBV SX-H09 株、SX-W09 株M 基因进化分析第33页
     ·IBV SX-H09 株、SX-W09 株M 蛋白一级、二级结构预测第33-34页
     ·IBV SX-H09 株、SX-W09 株M 蛋白抗原表位预测第34-36页
   ·讨论第36页
   ·小结第36-38页
 第四章 鸡传染性支气管炎病毒SX-W09 株N 基因的克隆第38-48页
   ·材料第38-39页
     ·毒株第38页
     ·鸡胚第38页
     ·载体与菌株第38页
     ·主要试剂第38页
     ·引物第38-39页
     ·IBV N 基因参考毒株名称及GenBank 登录号第39页
     ·培养基的配制及常用溶液的配制第39页
     ·主要仪器第39页
   ·方法第39-41页
     ·IBV SX-W09 株病毒增殖与RNA 的提取第39页
     ·N 基因cDNA 链的合成第39-40页
     ·PCR 扩增第40页
     ·PCR 产物的回收纯化第40页
     ·PCR 产物的连接与转化第40页
     ·重组质粒pMD18-T-N 的提取第40页
     ·重组质粒pMD18-T-N 酶切鉴定第40页
     ·阳性质粒的序列测定第40-41页
     ·SX-W09 株N 蛋白一级、二级结构和抗原表位的预测分析第41页
   ·结果第41-46页
     ·SX-W09 株N 基因的扩增第41页
     ·pMD18-T-N 重组质粒酶切鉴定第41-42页
     ·IBV SX-W09 株N 基因的核苷酸序列测定第42页
     ·IBV 不同毒株N 基因的核苷酸和氨基酸相似性分析第42-43页
     ·IBV SX-W09 株与参考株N 基因的核苷酸及推导的氨基酸序列比较第43页
     ·IBV SX-W09 株N 基因进化分析第43页
     ·IBV SX-W09 株N 蛋白一级、二级结构预测第43-44页
     ·IBV SX-W09 株N 蛋白抗原表位预测第44-46页
   ·讨论第46-47页
   ·小结第47-48页
 第五章 鸡传染性支气管炎病毒SX-W09 株N 基因在大肠杆菌中的表达及产物免疫活性检测第48-61页
   ·材料第48-50页
     ·菌株、质粒及实验动物第48页
     ·引物设计与合成第48页
     ·主要试剂第48-49页
     ·常用溶液的配制第49-50页
     ·实验仪器第50页
   ·方法第50-55页
     ·IBV SX-W09 株N 基因原核表达载体的构建第50-52页
     ·重组质粒pET32a-T-N 在大肠杆菌中的表达及鉴定第52-53页
     ·纯化重组蛋白制备抗原第53-54页
     ·核蛋白多克隆抗体的制备第54页
     ·间接ELISA 检测抗血清的效价第54-55页
     ·Western Blot 检测N 蛋白的特异性第55页
   ·结果第55-59页
     ·重组质粒的构建及鉴定第55页
     ·重组核蛋白基因的表达和鉴定第55-58页
     ·抗血清ELISA 检测结果第58页
     ·Western Blot 特异性检测第58-59页
   ·讨论第59-60页
   ·小结第60-61页
结论第61-62页
参考文献第62-69页
缩略词第69-70页
致谢第70-71页
作者简介第71页

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