摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
文献综述 | 第13-27页 |
第一章 细胞重编程的研究 | 第13-19页 |
·核移植 | 第14-15页 |
·细胞融合 | 第15页 |
·诱导多能性干细胞 | 第15-19页 |
·重编程机制的研究 | 第16-17页 |
·诱导方法的改进 | 第17页 |
·动物模型 | 第17-18页 |
·完全多能性 | 第18页 |
·未来的研究方向 | 第18页 |
·结论 | 第18-19页 |
第二章 小分子化合物对诱导重编程的影响 | 第19-24页 |
·microRNA 在重编程过程中的潜在作用 | 第19-20页 |
·小分子化合物参与重编程 | 第20-24页 |
·天然化合物维生素C(vitamin C,Vc) | 第21页 |
·DNA 甲基转移酶抑制剂AZA 和5-AzadC | 第21页 |
·组蛋白去乙酰化酶抑制剂 VPA,TSA 和SAHA | 第21-22页 |
·MEK 和GSK3 信号通路抑制剂 | 第22-23页 |
·TGF-β通路抑制剂 | 第23页 |
·未来研究方向 | 第23-24页 |
第三章 干细胞向心肌细胞分化的研究 | 第24-27页 |
·类胚体的形成和心肌细胞自发分化 | 第24-25页 |
·用特定的因子诱导心肌分化 | 第25页 |
·多能干细胞来源的心肌细胞的特征 | 第25-26页 |
·结论与未来的展望 | 第26-27页 |
试验研究 | 第27-50页 |
第四章 小分子化合物对p-giPS 细胞的重编程影响 | 第27-42页 |
·材料 | 第28-29页 |
·关中奶山羊胎儿 | 第28页 |
·细胞与质粒 | 第28页 |
·实验所用试剂 | 第28页 |
·仪器与设备 | 第28页 |
·溶液的配制 | 第28-29页 |
·方法 | 第29-33页 |
·山羊胎儿成纤维细胞的分离培养 | 第29-30页 |
·小鼠胎儿成纤维细胞(MEF)的分离培养和饲养层细胞的制备 | 第30页 |
·逆转录病毒的包装和感染 | 第30页 |
·碱性磷酸酶(AP)染色 | 第30-31页 |
·细胞RNA 的提取 | 第31页 |
·PCR 反应 | 第31-32页 |
·qPCR | 第32页 |
·细胞的免疫荧光检测 | 第32页 |
·软琼脂实验 | 第32-33页 |
·结果 | 第33-40页 |
·山羊诱导多能干细胞(giPS cells)的获得 | 第33页 |
·碱性磷酸酶(AP)染色 | 第33页 |
·RT-PCR 检测获得的giPS 细胞内外源因子的表达 | 第33-34页 |
·RT-PCR 和qPCR 检测小分子处理后p-giPS 细胞的内外源因子的表达 | 第34-36页 |
·AP 染色检测添加小分子后的p-giPS 细胞 | 第36-37页 |
·细胞免疫荧光检测 | 第37-38页 |
·软琼脂实验检测p-giPS 细胞体外增殖能力 | 第38-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
·小结 | 第41-42页 |
第五章 p-giPS 细胞向心肌样细胞的诱导分化 | 第42-50页 |
·材料 | 第42-44页 |
·实验所用试剂 | 第42-43页 |
·仪器与设备 | 第43页 |
·溶液的配制 | 第43-44页 |
·方法 | 第44-46页 |
·p-giPS 细胞类胚体的形成 | 第44页 |
·p-giPS 细胞分化的心肌样细胞的RNA 提取 | 第44页 |
·PCR 反应 | 第44-45页 |
·qPCR | 第45-46页 |
·细胞的免疫荧光检测 | 第46页 |
·结果 | 第46-48页 |
·p-giPS 细胞分化的心肌样细胞表达多种心肌标记基因 | 第46-47页 |
·q-PCR 分析心肌样细胞的标记基因的表达 | 第47-48页 |
·p-giPS 细胞分化为心肌样细胞的免疫荧光 | 第48页 |
·讨论 | 第48-49页 |
·小结 | 第49-50页 |
结论 | 第50-51页 |
论文创新点 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
作者简介 | 第59页 |