| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第1章 绪论 | 第9-21页 |
| ·概述 | 第9页 |
| ·目前对癌变机理的研究进展 | 第9-11页 |
| ·体细胞突变假说 | 第9-10页 |
| ·表型遗传修饰改变假说 | 第10页 |
| ·肿瘤干细胞假说 | 第10-11页 |
| ·对称分裂抑制机制紊乱假说 | 第11页 |
| ·细胞骨架与肿瘤的关系 | 第11-13页 |
| ·细胞骨架组成与功能 | 第11-13页 |
| ·细胞骨架与肿瘤的发生和转移 | 第13页 |
| ·RNAi技术 | 第13-17页 |
| ·RNAi技术的发现 | 第13-14页 |
| ·RNAi过程中重要的酶 | 第14页 |
| ·现有的RNAi作用机制模型 | 第14-15页 |
| ·RNAi的放大效应机制 | 第15页 |
| ·哺乳动物细胞中特殊的RNAi现象 | 第15-17页 |
| ·RNAi的应用前景 | 第17页 |
| ·蛋白转位与细胞生物学功能改变 | 第17-18页 |
| ·UTRN基因的研究进展 | 第18-20页 |
| ·UTRN的基因结构 | 第18-19页 |
| ·UTRN蛋白结构及其功能分布 | 第19-20页 |
| ·本论文前期工作基础 | 第20页 |
| ·本课题的目的和意义 | 第20-21页 |
| 第2章 实验材料和方法 | 第21-29页 |
| ·实验材料 | 第21-23页 |
| ·细胞系 | 第21页 |
| ·载体 | 第21-22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·实验中使用的相关引物 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·软件 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-28页 |
| ·siRNAs的设计与重组载体构建 | 第23-26页 |
| ·siRNA表达质粒的稳定转染及细胞抗性克隆的筛选 | 第26页 |
| ·稳定转染后单克隆细胞UTRN基因的表达抑制效果分析——半定量RT-PCR | 第26-27页 |
| ·siRNA抑制UTRN基因表达对细胞增殖能力的影响 | 第27页 |
| ·siRNA抑制UTRN基因表达对细胞骨架的影响 | 第27页 |
| ·UTRN蛋白的免疫荧光定位 | 第27-28页 |
| ·UTRN蛋白的免疫组化定位 | 第28页 |
| ·本章小结 | 第28-29页 |
| 第3章 RNAi分析UTRN基因对细胞生物学的影响 | 第29-41页 |
| ·RNAi沉默UTRN基因表达结果 | 第29-36页 |
| ·siRNA序列的设计和选择 | 第29-30页 |
| ·siRNAs重组体的确认 | 第30-32页 |
| ·稳转shRNA重组体HEK293 细胞系的获得 | 第32页 |
| ·siRNAs沉默UTRN基因的半定量RT-PCR检测 | 第32页 |
| ·UTRN基因的表达沉默对细胞增殖能力的影响 | 第32-34页 |
| ·UTRN基因表达沉默对细胞微丝骨架的影响 | 第34-36页 |
| ·RNA干扰实验方法的选择 | 第36-38页 |
| ·适用于大基因功能研究的实验方法 | 第36-37页 |
| ·siRNA序列获得方法的选择 | 第37-38页 |
| ·RNAi靶位点的选择 | 第38页 |
| ·UTRN对细胞增殖能力的影响 | 第38-39页 |
| ·UTRN对微丝细胞骨架的影响 | 第39-40页 |
| ·本章小结 | 第40-41页 |
| 第4章 UTRN蛋白在肿瘤细胞中的定位分析 | 第41-45页 |
| ·UTRN蛋白在肺癌细胞中的免疫荧光定位结果 | 第41页 |
| ·UTRN蛋白在肺癌组织中的免疫组化定位结果 | 第41页 |
| ·UTRN蛋白转位与肿瘤发生的关系 | 第41-44页 |
| ·本章小结 | 第44-45页 |
| 结论 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-50页 |
| 附录 1 Mfold软件预测mRNA二级结构 | 第50-52页 |
| 附录 2 pSilencer重组子测序结果图 | 第52-54页 |
| 附录 3 增殖曲线计数数据 | 第54-55页 |
| 附录 4 细胞表面丝状伪足长度变化 | 第55-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
