摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-26页 |
1. 圆环病毒研究进展 | 第10-24页 |
·圆环病毒及其分类 | 第10-11页 |
·圆环病毒理化特征及分子生物学特征 | 第11-12页 |
·圆环病毒的分子生物学研究进展 | 第12-15页 |
·圆环病毒的致病性及致病机理 | 第15-16页 |
·圆环病毒疫苗的研究进展 | 第16-18页 |
·鸽圆环病毒研究进展 | 第18-19页 |
·其他圆环病毒及其感染相关的疾病 | 第19-24页 |
2. 禽类其他免疫抑制病原 | 第24-26页 |
·马立克氏病病毒(MDV) | 第24-25页 |
·鸡传染性贫血病毒(CAV) | 第25页 |
·网状内皮增生病病毒(REV) | 第25页 |
·白血病病毒(ALV) | 第25页 |
·呼肠孤病毒(REOV) | 第25页 |
·传染性法氏囊病病毒(IBDV) | 第25-26页 |
第二章 鸽圆环病毒浙江株基因组片段的扩增 | 第26-34页 |
1. 材料 | 第26-28页 |
·病料 | 第26页 |
·质粒与菌株 | 第26页 |
·生化试剂和分子生物学试剂 | 第26-28页 |
2. 方法 | 第28-31页 |
·病料核酸的提取 | 第28页 |
·PiCV特异性片段的检测 | 第28-29页 |
·分段PCR扩增PiCV基因组片段 | 第29页 |
·PiCV基因组片段测序与拼接 | 第29-31页 |
3. 结果 | 第31-33页 |
·PiCV特异性序列的检测 | 第31-32页 |
·分段PCR的扩增结果 | 第32-33页 |
·序列的拼接 | 第33页 |
4. 讨论 | 第33-34页 |
第三章 鸽圆环病毒浙江株全基因组序列分析 | 第34-38页 |
1. 材料 | 第34页 |
·生物软件和程序 | 第34页 |
·序列 | 第34页 |
2. 方法 | 第34页 |
·基因组结构分析、Rep蛋白及外壳蛋白的同源性分析 | 第34页 |
·同源性分析及进化树分析 | 第34页 |
3. 结果 | 第34-37页 |
·浙江株PiCV基因组结构分析 | 第34-36页 |
·PiCV全基因组同源性分析及进化树构建 | 第36-37页 |
4. 讨论 | 第37-38页 |
第四章 PiCV△Cap蛋白在E.coli中的表达 | 第38-50页 |
1. 材料 | 第38-40页 |
·质粒与菌株 | 第38页 |
·生化试剂和分子生物学试剂 | 第38-40页 |
2. 方法 | 第40-45页 |
·△Cap基因的克隆 | 第40-42页 |
·△Cap蛋白原核表达体系的构建与诱导表达 | 第42-45页 |
·表达蛋白Western-blot测定 | 第45页 |
3. 结果 | 第45-49页 |
·PiCV△Cap基因的克隆与序列分析 | 第45-46页 |
·pET-28a-△Cap重组质粒的鉴定 | 第46-47页 |
·表达产物的SDS-PAGE检测 | 第47-48页 |
·△Cap蛋白原核表达产物存在方式的检测 | 第48页 |
·表达蛋白的Western-blot测定 | 第48-49页 |
4. 讨论 | 第49-50页 |
本研究创新点及后续研究工作 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-60页 |
附录一 特异性片段的Blast N分析 | 第60-62页 |
附录二 PiCV-ZJ1全基因组序列 | 第62-63页 |
附录三 PiCV-ZJ2全基因组序列 | 第63-64页 |
附录四 PiCV全基因组序列的同源分析 | 第64-65页 |
附录五 实验仪器设备 | 第65-66页 |
附录六 攻读硕士期间发表论文 | 第66-67页 |
致谢 | 第67页 |