| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第1章 绪论 | 第10-22页 |
| ·核盘菌研究现状 | 第10-15页 |
| ·核盘菌的分类地位和特点 | 第10-11页 |
| ·核盘菌菌核病研究现状 | 第11页 |
| ·菌核病的防治状况 | 第11-15页 |
| ·绿色荧光蛋白研究现状 | 第15-20页 |
| ·绿色荧光蛋白基础理论研究进展 | 第15-17页 |
| ·绿色荧光蛋白的应用优点 | 第17-18页 |
| ·绿色荧光蛋白应用 | 第18-20页 |
| ·研究内容及研究目的和意义 | 第20-22页 |
| ·主要研究内容 | 第20-21页 |
| ·课题研究目的和意义 | 第21-22页 |
| 第2章 真菌表达载体构建 | 第22-47页 |
| ·实验材料 | 第22-25页 |
| ·菌株和质粒 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22-23页 |
| ·载体构建所用试剂 | 第23-24页 |
| ·仪器设备 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-33页 |
| ·大肠杆菌高效感受态细胞的制备 | 第25页 |
| ·pUC18、pCSN43 和pCDNA3-GFP质粒提取 | 第25-26页 |
| ·pCSN43 质粒和绿色荧光蛋白基因（GFP）测序 | 第26页 |
| ·PtrpC启动子和TrpC终止子引物设计 | 第26页 |
| ·PtrpC启动子和TrpC终止子的克隆 | 第26-27页 |
| ·pUC18、PtrpC启动子和TrpC终止子的双酶切回收 | 第27-28页 |
| ·中间载体pUC18-P的构建 | 第28-29页 |
| ·中间载体pUC18-PG的构建 | 第29-30页 |
| ·中间载体pUC18-PGT的构建 | 第30-31页 |
| ·表达载体pPGT的构建 | 第31-33页 |
| ·本章小结 | 第33-45页 |
| ·pUC18、pCSN43 和pCDNA3-GFP质粒提取 | 第33-34页 |
| ·pCSN43 质粒和绿色荧光蛋白基因（GFP）测序结果 | 第34-36页 |
| ·引物设计 | 第36-38页 |
| ·PtrpC启动子和TrpC终止子的克隆 | 第38-42页 |
| ·pUC18、PtrpC和TrpC的双酶切胶回收 | 第42页 |
| ·中间载体pUC18-P的构建 | 第42-43页 |
| ·中间载体pUC18-PG的构建 | 第43页 |
| ·中间载体pUC18-PGT的构建 | 第43-44页 |
| ·真菌表达载体pPGT的构建 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| ·本章小结 | 第46-47页 |
| 第3章 绿色荧光蛋白在核盘菌中的表达 | 第47-60页 |
| ·实验材料 | 第47-48页 |
| ·菌株 | 第47页 |
| ·核盘菌原生质体制备和转化用培养基和试剂 | 第47页 |
| ·核盘菌原生质体再生和筛选用培养基和试剂 | 第47-48页 |
| ·核盘菌阳性转化子鉴定所用培养基和试剂 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-52页 |
| ·核盘菌原生质体制备 | 第48-49页 |
| ·核盘菌原生质体转化再生和筛选 | 第49页 |
| ·核盘菌阳性转化子菌丝体荧光反应 | 第49页 |
| ·核盘菌阳性转化子基因组DNA提取 | 第49-50页 |
| ·核盘菌转化子的Southern blot分析 | 第50-52页 |
| ·核盘菌和哈茨木霉对峙实验 | 第52页 |
| ·实验结果 | 第52-57页 |
| ·核盘菌原生质体制备 | 第52-55页 |
| ·核盘菌转化子菌丝体荧光反应 | 第55页 |
| ·核盘菌转化子基因组DNA提取 | 第55-56页 |
| ·核盘菌转化子的Southern blot分析 | 第56页 |
| ·核盘菌和哈茨木霉对峙实验 | 第56-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| ·本章小结 | 第59-60页 |
| 结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
