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工业龟裂链霉菌G6PDH基因敲除和自身抗性基因增强提高土霉素生物合成策略研究

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 综述第11-25页
   ·龟裂链霉菌(Streptomyces rimosus)第11-12页
   ·土霉素(Oxytetracycline)第12-14页
     ·土霉素结构第12页
     ·土霉素生物合成基因簇第12-14页
   ·次级代谢产物合成调控进展第14-18页
     ·概述第14-15页
     ·提高次级代谢产物产量的方法第15-18页
   ·zwf基因第18-20页
     ·zwf基因概述第18-19页
     ·zwf基因研究进展第19-20页
   ·抗性基因(Self-resistance gene)第20-24页
     ·抗生素产生菌自我保护机制第20-23页
     ·抗性基因otrA与otrB第23-24页
   ·本文研究背景、研究内容和研究意义第24-25页
第二章 材料与方法第25-34页
   ·实验材料第25-28页
     ·菌种与质粒第25页
     ·培养基第25页
     ·实验试剂第25-26页
     ·实验仪器第26-27页
     ·引物第27-28页
   ·实验方法第28-34页
     ·菌种的甘油管保存第28页
     ·分子生物学实验第28-32页
     ·重组菌发酵培养第32-33页
     ·菌种生理特性的测定第33-34页
第三章 工业龟裂链霉菌zwf1基因中断对土霉素生物合成的影响第34-43页
   ·引言第34页
   ·结果第34-39页
     ·部分zwf1基因片段的获得第34-35页
     ·交换载体pKC1139-zwf1的构建和去甲基化第35-36页
     ·转化子形态观察第36-37页
     ·转化子PCR鉴定第37页
     ·突变子S-z8发酵第37-38页
     ·突变株生长特性第38-39页
   ·讨论第39-42页
     ·zwf1基因敲除对生物量形成和土霉素生物合成影响第39-41页
     ·通过初级代谢调控提高刺激代谢产物产量研究第41-42页
   ·本章小结第42-43页
第四章 龟裂链霉菌工业菌otr基因增强菌株构建及鉴定第43-50页
   ·引言第43页
   ·结果第43-47页
     ·pSET152-otrA/pSET152-otrB构建与去甲基化第43-45页
     ·pSET152-otrA/pSET152-otrB电转化龟裂链霉菌工业菌第45-46页
     ·重组菌整合方式鉴定第46-47页
   ·讨论第47-49页
     ·通过增强抗性提高抗生素产量研究第48页
     ·抗生素合成基因与耐药基因的协调表达效应第48-49页
     ·龟裂链霉菌自我保护机制第49页
   ·本章小结第49-50页
第五章 otr基因增强对龟裂链霉菌工业菌土霉素生产及生理特性的影响第50-60页
   ·引言第50页
   ·结果第50-57页
     ·OTC高产菌株筛选第50-51页
     ·OTC高产菌株生理特性研究第51-54页
     ·土霉素抗性比较第54-55页
     ·胞内外OTC浓度比较第55-57页
   ·讨论第57-58页
     ·突变株的菌体形态变化第57页
     ·抗性基因增强对土霉素合成与细胞生长的影响第57-58页
     ·通过提高菌体抗性增加抗生素产量第58页
   ·本章小结第58-60页
第六章 结论与展望第60-62页
   ·主要结论第60页
   ·展望第60-62页
参考文献第62-69页
在校期间发表论文第69-70页
致谢第70页

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