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犬血清IgG的纯化及其部分特性研究

中文摘要第1-4页
Abstract第4-5页
目录第5-9页
插图和附表清单第9-10页
本文常用缩写词第10-11页
文献综述第11-22页
 1 免疫球蛋白的命名及其研究历史第11页
 2 免疫球蛋白分子结构第11-14页
   ·免疫球蛋白的基本结构第11-12页
   ·免疫球蛋白功能区第12-13页
     ·可变区第12页
     ·恒定区第12-13页
     ·结构域第13页
     ·铰链区第13页
   ·免疫球蛋白的其他成分第13页
   ·免疫球蛋白的水解片段第13-14页
 3 类与型第14页
 4 免疫球蛋白的基因构成第14-15页
 5 免疫球蛋白的生物学特性第15-16页
 6 免疫球蛋白的生物合成与免疫应答一般规律第16-17页
 7 IgG的测定方法第17-18页
 8 IgG的提取与纯化第18-20页
   ·样品的粗提第18-19页
   ·IgG的纯化第19-20页
 9 抗IgG抗体的研究第20-22页
   ·抗IgG多克隆抗体的研究第20-21页
   ·抗IgG单克隆抗体的研究第21-22页
正文:犬血清IgG的提纯及其部分特性分析第22-50页
 引言第22-23页
 1 材料和方法第23-36页
   ·实验动物第23页
   ·实验材料第23页
   ·主要试剂第23-28页
   ·主要器材第28页
   ·血清制备第28页
   ·犬血清免疫球蛋白IgG分离纯化第28-29页
     ·硫酸铵分步盐析法第28-29页
     ·凝胶过滤层析纯化IgG第29页
   ·犬血清免疫球蛋白IgG鉴定第29-31页
     ·Folin-酚法测蛋白质浓度第29-30页
     ·Sephadex G-200柱洗脱曲线的绘制与层析峰抗原性鉴定第30页
     ·蛋白质纯度鉴定第30-31页
       ·SDS-PAGE电泳测蛋白质纯度第30页
       ·非还原非变性PAGE测蛋白质纯度第30页
       ·免疫电泳检测蛋白纯度第30-31页
   ·鼠抗犬血清IgG多克隆抗体的制备第31页
   ·多克隆抗体的鉴定第31-33页
     ·免疫双扩散法第31-32页
     ·间接ELISA检测方法建立第32-33页
       ·间接ELISA反应步骤第32页
       ·ELISA抗原最适合包被浓度与阴性、阳性血清最佳稀释度的确定第32页
       ·酶标抗体HRP-羊抗鼠IgG最佳工作浓度的确定第32页
       ·封闭液的选择第32页
       ·底物液的作用时间第32页
       ·ELISA稳定性实验第32-33页
       ·鼠抗犬血清IgG多克隆抗体效价测定第33页
     ·Western-blotting 检测鼠抗犬血清gIG多克隆抗体特异性第33页
   ·犬血清IgG的部分特性分析第33-36页
     ·分子量的测定第33-34页
       ·SDS-PAGE测定第33页
       ·非还原SDS-PAGE测定第33-34页
     ·木瓜蛋白酶水解IgG、Western Blot分析水解片段生物活性第34页
     ·Western Blot分析犬IgG的免疫原性和反应原性第34-36页
       ·变性还原条件下Western-blot第34-35页
       ·变性非还原下Western-blot第35-36页
 2 结果与分析第36-45页
   ·犬血清Ig的纯化与鉴定第36-38页
     ·犬免疫球蛋白分离产物浓度测定第36页
     ·Sephadex G-200柱洗脱曲线的绘制第36-37页
     ·蛋白质纯度鉴定第37-38页
       ·SDS—PAGE电泳测蛋白质纯度第37页
       ·PAGE电泳测蛋白质纯度第37-38页
       ·免疫电泳检测层析蛋白纯度第38页
   ·多克隆抗体的鉴定第38-42页
     ·免疫双扩散法第38-39页
     ·间接ELISA法实验结果第39-41页
       ·抗原、抗体最适工作浓度的初步筛选第39-40页
       ·最适封闭液的筛选第40页
       ·酶标二抗最适工作浓度的筛选第40-41页
       ·底物最佳反应时间选择第41页
       ·间接ELISA法稳定性实验第41页
       ·鼠抗犬血清IgG多克隆抗体效价测定第41页
     ·Western Blotting鉴定多抗特异性第41-42页
   ·犬血清IgG的部分特性分析第42-45页
     ·分子量的测定第42-43页
       ·SDS-PAGE测定IgG分子量第42页
       ·非还原SDS-PAGE测定第42-43页
     ·木瓜蛋白酶水解IgG、Western Blot鉴定分析水解片段生物活性第43-44页
       ·木瓜蛋白酶水解IgG最适反应条件确定第43-44页
       ·Western Blot结果第44页
     ·Western Blot分析犬IgG的免疫原性和反应原性第44-45页
       ·变性还原条件下Western-blot第44页
       ·变性非还原下Western-blot第44-45页
 3 讨论第45-49页
   ·分离策略的选择第45页
   ·纯化蛋白质的检测第45-46页
   ·抗血清的制备第46页
   ·间接ELISA检测方法的建立第46-47页
   ·木瓜蛋白酶酶解实验第47页
   ·Western Blot分析犬IgG的免疫原性和反应原性第47-49页
 4 结论第49-50页
参考文献第50-56页
致谢第56-57页
作者简介第57页
攻读硕士学位期间发表的论文第57页
读硕期间所做的学术报告第57页

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