中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
目录 | 第5-9页 |
插图和附表清单 | 第9-10页 |
本文常用缩写词 | 第10-11页 |
文献综述 | 第11-22页 |
1 免疫球蛋白的命名及其研究历史 | 第11页 |
2 免疫球蛋白分子结构 | 第11-14页 |
·免疫球蛋白的基本结构 | 第11-12页 |
·免疫球蛋白功能区 | 第12-13页 |
·可变区 | 第12页 |
·恒定区 | 第12-13页 |
·结构域 | 第13页 |
·铰链区 | 第13页 |
·免疫球蛋白的其他成分 | 第13页 |
·免疫球蛋白的水解片段 | 第13-14页 |
3 类与型 | 第14页 |
4 免疫球蛋白的基因构成 | 第14-15页 |
5 免疫球蛋白的生物学特性 | 第15-16页 |
6 免疫球蛋白的生物合成与免疫应答一般规律 | 第16-17页 |
7 IgG的测定方法 | 第17-18页 |
8 IgG的提取与纯化 | 第18-20页 |
·样品的粗提 | 第18-19页 |
·IgG的纯化 | 第19-20页 |
9 抗IgG抗体的研究 | 第20-22页 |
·抗IgG多克隆抗体的研究 | 第20-21页 |
·抗IgG单克隆抗体的研究 | 第21-22页 |
正文:犬血清IgG的提纯及其部分特性分析 | 第22-50页 |
引言 | 第22-23页 |
1 材料和方法 | 第23-36页 |
·实验动物 | 第23页 |
·实验材料 | 第23页 |
·主要试剂 | 第23-28页 |
·主要器材 | 第28页 |
·血清制备 | 第28页 |
·犬血清免疫球蛋白IgG分离纯化 | 第28-29页 |
·硫酸铵分步盐析法 | 第28-29页 |
·凝胶过滤层析纯化IgG | 第29页 |
·犬血清免疫球蛋白IgG鉴定 | 第29-31页 |
·Folin-酚法测蛋白质浓度 | 第29-30页 |
·Sephadex G-200柱洗脱曲线的绘制与层析峰抗原性鉴定 | 第30页 |
·蛋白质纯度鉴定 | 第30-31页 |
·SDS-PAGE电泳测蛋白质纯度 | 第30页 |
·非还原非变性PAGE测蛋白质纯度 | 第30页 |
·免疫电泳检测蛋白纯度 | 第30-31页 |
·鼠抗犬血清IgG多克隆抗体的制备 | 第31页 |
·多克隆抗体的鉴定 | 第31-33页 |
·免疫双扩散法 | 第31-32页 |
·间接ELISA检测方法建立 | 第32-33页 |
·间接ELISA反应步骤 | 第32页 |
·ELISA抗原最适合包被浓度与阴性、阳性血清最佳稀释度的确定 | 第32页 |
·酶标抗体HRP-羊抗鼠IgG最佳工作浓度的确定 | 第32页 |
·封闭液的选择 | 第32页 |
·底物液的作用时间 | 第32页 |
·ELISA稳定性实验 | 第32-33页 |
·鼠抗犬血清IgG多克隆抗体效价测定 | 第33页 |
·Western-blotting 检测鼠抗犬血清gIG多克隆抗体特异性 | 第33页 |
·犬血清IgG的部分特性分析 | 第33-36页 |
·分子量的测定 | 第33-34页 |
·SDS-PAGE测定 | 第33页 |
·非还原SDS-PAGE测定 | 第33-34页 |
·木瓜蛋白酶水解IgG、Western Blot分析水解片段生物活性 | 第34页 |
·Western Blot分析犬IgG的免疫原性和反应原性 | 第34-36页 |
·变性还原条件下Western-blot | 第34-35页 |
·变性非还原下Western-blot | 第35-36页 |
2 结果与分析 | 第36-45页 |
·犬血清Ig的纯化与鉴定 | 第36-38页 |
·犬免疫球蛋白分离产物浓度测定 | 第36页 |
·Sephadex G-200柱洗脱曲线的绘制 | 第36-37页 |
·蛋白质纯度鉴定 | 第37-38页 |
·SDS—PAGE电泳测蛋白质纯度 | 第37页 |
·PAGE电泳测蛋白质纯度 | 第37-38页 |
·免疫电泳检测层析蛋白纯度 | 第38页 |
·多克隆抗体的鉴定 | 第38-42页 |
·免疫双扩散法 | 第38-39页 |
·间接ELISA法实验结果 | 第39-41页 |
·抗原、抗体最适工作浓度的初步筛选 | 第39-40页 |
·最适封闭液的筛选 | 第40页 |
·酶标二抗最适工作浓度的筛选 | 第40-41页 |
·底物最佳反应时间选择 | 第41页 |
·间接ELISA法稳定性实验 | 第41页 |
·鼠抗犬血清IgG多克隆抗体效价测定 | 第41页 |
·Western Blotting鉴定多抗特异性 | 第41-42页 |
·犬血清IgG的部分特性分析 | 第42-45页 |
·分子量的测定 | 第42-43页 |
·SDS-PAGE测定IgG分子量 | 第42页 |
·非还原SDS-PAGE测定 | 第42-43页 |
·木瓜蛋白酶水解IgG、Western Blot鉴定分析水解片段生物活性 | 第43-44页 |
·木瓜蛋白酶水解IgG最适反应条件确定 | 第43-44页 |
·Western Blot结果 | 第44页 |
·Western Blot分析犬IgG的免疫原性和反应原性 | 第44-45页 |
·变性还原条件下Western-blot | 第44页 |
·变性非还原下Western-blot | 第44-45页 |
3 讨论 | 第45-49页 |
·分离策略的选择 | 第45页 |
·纯化蛋白质的检测 | 第45-46页 |
·抗血清的制备 | 第46页 |
·间接ELISA检测方法的建立 | 第46-47页 |
·木瓜蛋白酶酶解实验 | 第47页 |
·Western Blot分析犬IgG的免疫原性和反应原性 | 第47-49页 |
4 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
作者简介 | 第57页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第57页 |
读硕期间所做的学术报告 | 第57页 |