| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-10页 |
| 主要符号对照表 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-22页 |
| ·骨骼的生长发育调控 | 第11页 |
| ·一些代谢性骨病及其治疗现状 | 第11-13页 |
| ·OPG 及OPG/RANK/RANKL 系统 | 第13-19页 |
| ·结构生物学在研究TNFRSF11B 蛋白分子作用机制的意义 | 第19-20页 |
| ·目前研究现状 | 第20-21页 |
| ·研究内容与论文结构 | 第21-22页 |
| 第二章 人源TNFRSF11B 的生物信息学分析 | 第22-28页 |
| ·Blast 分析 | 第22-23页 |
| ·TMHMM 跨膜分析 | 第23页 |
| ·信号肽预测 | 第23-24页 |
| ·蛋白质基本理化特性分析 | 第24-26页 |
| ·结构域分析 | 第26页 |
| ·二级结构预测 | 第26-28页 |
| 第三章 人源TNFRSF11B 蛋白的克隆、表达、纯化以及包涵体变复性分析 | 第28-44页 |
| ·前言 | 第28-35页 |
| ·包涵体的定义、组成与特性 | 第28-29页 |
| ·包涵体的形成 | 第29页 |
| ·包涵体破菌、分离、洗涤及溶解 | 第29-30页 |
| ·蛋白质的折叠机理 | 第30-31页 |
| ·复性 | 第31-35页 |
| ·实验流程 | 第35-36页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·工具酶和各种试剂 | 第36页 |
| ·载体和感受态细胞 | 第36页 |
| ·层析介质和设备 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-38页 |
| ·PCR 扩增及基因克隆 | 第36-37页 |
| ·引物设计与合成 | 第36页 |
| ·PCR 反应 | 第36页 |
| ·pGEX-6P-1-tnfrsf11b 重组克隆的构建与鉴定 | 第36-37页 |
| ·Tnfrsf11b 蛋白的诱导表达以及纯化条件摸索 | 第37页 |
| ·目标蛋白质的大量表达纯化 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-40页 |
| ·PCR 扩增 | 第38页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第38-39页 |
| ·重组质粒pGEX-6P-1-tnfrsf11b 的诱导表达 | 第39页 |
| ·Tnfrsf11b 的表达条件探索 | 第39-40页 |
| ·Tnfrsf11b 的纯化 | 第40页 |
| ·Tnfrsf11b 在pET-28a 载体中的表达以及包涵体变复性分析 | 第40-42页 |
| ·重组质粒pET28a-Tnfrsf11b 的鉴定 | 第40-41页 |
| ·Tnfrsf11b 的试表达 | 第41页 |
| ·Tnfrsf11b 包涵体的变复性分析 | 第41-42页 |
| ·Tnfrsf11b 包涵体复性后可溶性蛋白的纯化 | 第42页 |
| ·分析与小结 | 第42-44页 |
| 第四章 人源TNFRSF11B 蛋白的分析及相关工作 | 第44-54页 |
| ·前言 | 第44页 |
| ·TNFRSF11B 蛋白圆二色谱测定 | 第44-45页 |
| ·分析与小结 | 第45-46页 |
| ·相关工作 | 第46-54页 |
| ·Tnfrsf11b2 结构和功能分析 | 第46-47页 |
| ·Fas 结构和功能分析 | 第47-51页 |
| ·pGEX6p-1-Fas 的构建与鉴定 | 第49页 |
| ·Fas 的试表达 | 第49-50页 |
| ·Fas 的表达与纯化 | 第50-51页 |
| ·Fas 的圆二色谱分析 | 第51页 |
| ·Fas 实验结果分析 | 第51页 |
| ·PTP1B 和SHP-1 表达和功能分析 | 第51-54页 |
| 第五章 结论 | 第54-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 附录 | 第61页 |
| 附一：常用载体图谱 | 第61-63页 |
| 附二：相关基因信息 | 第63-66页 |
| 导师简介 | 第66-67页 |
| 个人简介 | 第67页 |
| 攻读硕士学位期间情况 | 第67-68页 |
| 在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
