摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
1 绪论 | 第11-21页 |
·研究背景和意义 | 第11页 |
·立论依据 | 第11-12页 |
·昆虫肠道微生物的研究进展 | 第12-13页 |
·肠道微生物研究方法介绍 | 第13-16页 |
·传统的细菌系统分类鉴定方法 | 第13-14页 |
·肠道微生物分子生物学研究方法 | 第14-16页 |
·均一化技术的研究进展 | 第16-17页 |
·均一化技术的原理 | 第16-17页 |
·均一化技术的应用 | 第17页 |
·16S rDNA 分析的 PCR-DGGE 介绍 | 第17-18页 |
·变性梯度凝胶电泳原理简介 | 第17-18页 |
·变性梯度凝胶电泳的应用 | 第18页 |
·研究内容与技术路线 | 第18-19页 |
·研究内容 | 第18页 |
·技术路线 | 第18-19页 |
·创新之处 | 第19-21页 |
2 贡嘎蝠蛾幼虫肠道可培养微生物与优势菌群分析 | 第21-26页 |
·材料和方法 | 第21-22页 |
·研究材料 | 第21页 |
·培养基 | 第21页 |
·幼虫的解剖与肠道微生物的获取 | 第21页 |
·接种和培养 | 第21页 |
·优势菌的形态、生理生化测定 | 第21页 |
·优势菌的16S rDNA 片段的扩增和测序 | 第21-22页 |
·结果 | 第22-24页 |
·肠道可培养优势菌群的分离鉴定与序列分析 | 第22-24页 |
·本章小结 | 第24-26页 |
3 贡嘎蝠蛾幼虫肠道菌群多样性的均一化文库的构建 | 第26-36页 |
·材料与方法 | 第26-29页 |
·部分储存液和培养基的配制 | 第26页 |
·主要仪器 | 第26页 |
·主要试剂 | 第26页 |
·肠道微生物总DNA 的提取与纯化 | 第26页 |
·16S rDNA 全长的扩增与产物纯化 | 第26-27页 |
·产物的均一化处理 | 第27页 |
·均一化处理产物PCR 扩增与回收 | 第27页 |
·回收产物与载体pMD18-T 连接 | 第27页 |
·转化 | 第27-29页 |
·质粒的提取和酶切 | 第29页 |
·结果与分析 | 第29-35页 |
·肠道细菌总DNA 的提取结果 | 第29页 |
·16S rRNA 的扩增结果 | 第29页 |
·均一化文库中阳性克隆检测 | 第29-30页 |
·酶切图谱分析 | 第30页 |
·测序结果分析 | 第30-35页 |
·本章小结 | 第35-36页 |
4 贡嘎蝠蛾幼虫肠道菌群多样性的 16S rDNA 的 PCR-DGGE 法研究 | 第36-46页 |
·材料与方法 | 第36-40页 |
·贡嘎蝠蛾样品的采集及处理 | 第36页 |
·引物序列 | 第36页 |
·试验仪器 | 第36-37页 |
·实验试剂 | 第37页 |
·肠道微生物总DNA 的提取 | 第37页 |
·16SrDNA 片段的PCR 扩增 | 第37页 |
·扩增产物的DGGE 分离 | 第37-39页 |
·DGGE 胶上分离的16S rDNA 条带回收纯化 | 第39页 |
·16S rDNA 片段的PCR 再扩增和DGGE 分离 | 第39-40页 |
·16S rDNA 片段的克隆和测序 | 第40页 |
·实验结果 | 第40-45页 |
·DNA 提取结果 | 第40-41页 |
·16SrDNA 片段与DGGE 分离 | 第41页 |
·蝠蛾肠道细菌总DNA 的扩增产物变性梯度凝胶电泳(DGGE) | 第41-42页 |
·优势16S rDNA 条带测序结果与分析 | 第42-45页 |
·本章小结 | 第45-46页 |
5 总结与讨论 | 第46-50页 |
·贡嘎蝠蛾幼虫肠道中微生物多样性及功能 | 第46-47页 |
·基于DSN 的均一化文库构建技术对微生物多样性的揭示 | 第47页 |
·各种分析方法的评价 | 第47-50页 |
6 后续工作 | 第50-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-56页 |
附录 | 第56-58页 |
A:作者在攻读硕士学位期间发表论文 | 第56页 |
B:作者在攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第56-58页 |