| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 绪论 | 第9-19页 |
| ·白桦概况 | 第9-10页 |
| ·白桦的分布 | 第9页 |
| ·白桦的经济价值 | 第9-10页 |
| ·白桦转基因的概况 | 第10页 |
| ·白桦转基因的概况 | 第10-14页 |
| ·白桦转基因的概况 | 第11-13页 |
| ·影响外源基因在转基因植物中的表达因素 | 第13-14页 |
| ·转基因林木的生态安全性 | 第14-15页 |
| ·对土壤的影响 | 第14-15页 |
| ·对昆虫的影响 | 第15页 |
| ·基因漂移 | 第15页 |
| ·转基因植物外源蛋白的检测方法 | 第15-17页 |
| ·生物测定法 | 第16页 |
| ·蛋白质印迹法 | 第16页 |
| ·酶联免疫吸附法(ELISA) | 第16-17页 |
| ·转基因植物外源蛋白表达的特点 | 第17-18页 |
| ·本实验研究的目的、意义 | 第18-19页 |
| 2 BGT基因原核表达载体的构建、诱导表达及纯化 | 第19-32页 |
| ·材料与方法 | 第19-20页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-25页 |
| ·质粒的提取 | 第20-21页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第21页 |
| ·原核表达载体pET28a-BGT的构建和鉴定 | 第21-23页 |
| ·阳性重组质粒在E.coli.中的诱导表达 | 第23-24页 |
| ·融合蛋白的可溶性分析 | 第24页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第24-25页 |
| ·结果与分析 | 第25-30页 |
| ·BGT基因的PCR扩增 | 第25-26页 |
| ·表达载体pET28a-BGT的构建 | 第26页 |
| ·重组质粒pET28a-BGT的鉴定 | 第26-27页 |
| ·融合BGT蛋白在大肠杆菌中的诱导表达 | 第27-28页 |
| ·融合蛋白的可溶性分析 | 第28-29页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第29-30页 |
| ·讨论 | 第30-31页 |
| ·原核表达载体的选择 | 第30页 |
| ·BGT蛋白的表达、纯化 | 第30-31页 |
| ·本章小节 | 第31-32页 |
| 3 抗BGT蛋白多克隆抗体和酶标抗体的(HRP)的制备与纯化 | 第32-41页 |
| ·材料与方法 | 第32-36页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-36页 |
| ·结果与分析 | 第36-40页 |
| ·抗血清的制备 | 第36页 |
| ·抗体的纯化 | 第36-37页 |
| ·Western blot检测抗体的特异性 | 第37-38页 |
| ·酶标抗体的制备与纯化 | 第38-39页 |
| ·酶标抗体的鉴定 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40页 |
| ·动物免疫对多抗特性的影响 | 第40页 |
| ·多克隆抗体纯化方法的选择 | 第40页 |
| ·多克隆抗体标记物及标记方法的选择 | 第40页 |
| ·本章小节 | 第40-41页 |
| 4 抗体夹心BGT-ELISA方法的建立和应用及转基因白桦抗虫性初步分析 | 第41-55页 |
| ·材料与方法 | 第41-43页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·方法 | 第41-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-52页 |
| ·酶标抗体工作浓度的确定 | 第43-44页 |
| ·抗体包被浓度的确定 | 第44页 |
| ·酶标反应板均一性的检测 | 第44-45页 |
| ·转基因白桦总蛋白的提取 | 第45页 |
| ·标准曲线的制作 | 第45-46页 |
| ·不同转基因白桦株系BGT含量的变化 | 第46页 |
| ·Western blot检测 | 第46-47页 |
| ·转基因白桦中BGT蛋白表达特性的初步研究 | 第47-49页 |
| ·转基因白桦株系的抗虫性 | 第49-50页 |
| ·转基因白桦对天幕毛虫的抗虫性 | 第50-52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| ·酶标板的选择 | 第53页 |
| ·测定方法的标准化 | 第53页 |
| ·转基因白桦中BGT基因表达的时空变化 | 第53-54页 |
| ·转基因白桦抗虫性 | 第54页 |
| ·本章小节 | 第54-55页 |
| 结论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 附录 | 第62-63页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |