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大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)孢子囊形成过程的基因差异表达研究

中文摘要第1-9页
英文摘要第9-11页
1 引言第11-27页
   ·大豆疫霉根腐病的发生与危害第11-12页
   ·大豆疫霉菌的研究进展第12-14页
     ·大豆疫霉菌的分类地位第12页
     ·大豆疫霉菌的生理小种第12-13页
     ·大豆疫霉菌的形态特征和生物学特性第13页
     ·大豆疫霉菌卵孢子萌发的研究第13-14页
     ·大豆疫霉菌孢子囊诱导的研究第14页
   ·疫霉菌的基因组与功能基因组学第14-18页
     ·疫霉菌基因组第14-15页
     ·基因组的不稳定性第15-16页
     ·疫霉菌功能基因组学第16-18页
   ·mRNA差异显示技术及其研究概况第18-26页
     ·mRNA差异显示技术的原理及步骤第18-19页
     ·mRNA差异显示技术的优缺点第19-20页
     ·mRNA差异显示技术的改进方法第20-23页
     ·mRNA差异显示技术的衍生技术第23-24页
     ·mRNA差异显示在植物病理学方面的应用第24-26页
   ·研究的目的与意义第26-27页
2 材料与方法第27-37页
   ·供试材料第27-29页
     ·供试病原菌第27页
     ·供试培养基第27页
     ·试验所用药剂第27-29页
     ·仪器设备第29页
   ·试验方法第29-37页
     ·大豆疫霉菌的培养第29页
     ·大豆疫霉菌卵孢子的检测第29页
     ·大豆疫霉菌游动孢子囊产生时间的检测第29页
     ·取样第29-30页
     ·RNA的提取第30-31页
     ·cDNA第一链的合成第31页
     ·差异显示PCR反应第31-32页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳及染色第32-33页
     ·差异片段回收及再扩增第33-34页
     ·反向Northern杂交第34-35页
     ·阳性差异片段的克隆第35-36页
     ·差异片段测序及序列分析第36-37页
3 结果与分析第37-49页
   ·纯营养菌丝的获得取样时间的确定第37页
   ·RNA的提取第37-38页
   ·cDNA的合成第38-39页
   ·差异显示PCR扩增条件的优化第39-40页
   ·DDRT-PCR引物的筛选及差异条带的获得第40-42页
     ·引物的筛选第40-41页
     ·差异条带的获得第41-42页
   ·差异条带的回收与二次扩增第42-43页
   ·反Northern杂交第43-44页
   ·阳性差异片段的克隆第44-45页
   ·差异片段的测序与分析第45-49页
4 讨论第49-57页
   ·DDRT-PCR对实验材料的要求第49页
   ·DDRT-PCR技术操作的注意事项第49-50页
   ·mRNA差异显示过程中一些问题的探讨第50-52页
     ·总RNA的提取与反转录第50-51页
     ·引物组合的筛选第51页
     ·PCR产物克隆及测序第51-52页
     ·关于真假阳性的鉴定第52页
   ·差异片段与生长发育的关系第52-55页
     ·参与细胞壁的形成第52-53页
     ·参与自体吞噬过程第53页
     ·参与泡囊的形成第53-54页
     ·与衰老过程有关第54页
     ·参与油脂的合成第54页
     ·参与了有毒代谢物的排出细胞过程第54-55页
     ·未知功能差异片段的探讨第55页
   ·展望第55-57页
5 结论第57-58页
致谢第58-59页
参考文献第59-68页
附录第68-76页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第76页

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