| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-23页 |
| ·研究的目的及意义 | 第12页 |
| ·国内外研究进展 | 第12-22页 |
| ·FMD基因组研究进展 | 第12-15页 |
| ·FMD新型分子疫苗研究进展 | 第15-17页 |
| ·空衣壳疫苗研究进展 | 第17-20页 |
| ·家蚕杆状病毒表达系统研究进展 | 第20-22页 |
| ·研究内容和方法 | 第22-23页 |
| 第二章 FMDV Asia I/JQ株编码区序列测定及其推导氨基酸的分析 | 第23-33页 |
| ·材料与方法 | 第23-27页 |
| ·病毒、质粒、宿主菌株 | 第23页 |
| ·参考毒株 | 第23页 |
| ·工具酶及其它试剂盒 | 第23页 |
| ·引物设计与合成 | 第23页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第23-24页 |
| ·RT-PCR反应 | 第24页 |
| ·PCR产物的纯化、回收 | 第24-25页 |
| ·PCR纯化产物与pMD18-T载体连接 | 第25页 |
| ·感受态细菌的制备 | 第25-26页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第26页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第26页 |
| ·序列的比较及其基因特征研究 | 第26-27页 |
| ·结果 | 第27-31页 |
| ·PCR产物的电泳结果 | 第27页 |
| ·目的基因的鉴定结果 | 第27页 |
| ·序列测定 | 第27页 |
| ·L区的核苷酸序列及其推导的氨基酸序列比较与分析 | 第27-28页 |
| ·P1区的核苷酸序列及其推导的氨基酸序列比较与分析 | 第28-29页 |
| ·P2区的核苷酸序列及其推导的氨基酸序列比较与分析 | 第29页 |
| ·P3区的核苷酸序列及其推导的氨基酸序列比较与分析 | 第29页 |
| ·系统发生树分析 | 第29-31页 |
| ·讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 FMDV结构蛋白的二级结构及B淋巴细胞抗原表位预测 | 第33-40页 |
| ·材料与方法 | 第33页 |
| ·Asia I/JQ株FMDV结构蛋白二级结构的预测 | 第33页 |
| ·Asia I/JO株FMDV结构蛋白B细胞抗原表位的预测 | 第33页 |
| ·结果 | 第33-38页 |
| ·VP1蛋白预测的二级结构 | 第33-34页 |
| ·VP1蛋白的B细胞表位的预测 | 第34-35页 |
| ·VP2蛋白的二级结构预测 | 第35页 |
| ·VP2蛋白的B细胞表位的预测 | 第35-36页 |
| ·VP3蛋白的二级结构预测 | 第36-37页 |
| ·VP3蛋白的B细胞表位的预测 | 第37页 |
| ·VP4蛋白的二级结构预测 | 第37-38页 |
| ·VP4蛋白的B细胞表位的预测 | 第38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 FMDV Asia/JQ株全长开放阅读框的表达及其产物免疫原性分析 | 第40-49页 |
| ·材料与方法 | 第40-44页 |
| ·主要材料 | 第40页 |
| ·重组杆状病毒转移载体的构建 | 第40-41页 |
| ·Bm-N细胞的复苏、传代及病毒繁殖 | 第41页 |
| ·超速离心法制备病毒Bm-BacPAK6基因组DNA | 第41页 |
| ·Bm-BacPAK6基因组DNA的线性化 | 第41-42页 |
| ·共转染 | 第42页 |
| ·重组病毒的筛选、纯化和扩增 | 第42页 |
| ·重组病毒的鉴定 | 第42页 |
| ·ORF在Bm-N细胞内表达 | 第42-43页 |
| ·ORF在家蚕中的表达 | 第43页 |
| ·FMDV空衣壳电镜观察 | 第43页 |
| ·免疫动物 | 第43页 |
| ·LPBE法检测血清抗体 | 第43页 |
| ·病毒攻击保护实验 | 第43-44页 |
| ·结果 | 第44-47页 |
| ·重组病毒rBmNPV(ORF)的构建 | 第44页 |
| ·ORF在Bm-N细胞中表达结果 | 第44-45页 |
| ·ORF在蚕体中的表达结果 | 第45-46页 |
| ·电镜观察结果 | 第46页 |
| ·血清中抗FMDV特异性抗体 | 第46页 |
| ·攻毒保护实验 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-49页 |
| 第五章 FMDV Asia/JQ株P1-2A、3C基因的表达及其产物免疫原性分析 | 第49-58页 |
| ·材料与方法 | 第49-51页 |
| ·病毒和细胞系 | 第49页 |
| ·重组杆状病毒转移载体的构建 | 第49-50页 |
| ·构建与筛选重组P1-2A与3C基因的杆状病毒 | 第50页 |
| ·多聚蛋白在Bm-N细胞内表达 | 第50页 |
| ·多聚蛋白在家蚕中的表达 | 第50页 |
| ·筛选高表达克隆毒株 | 第50页 |
| ·表达时相测定 | 第50页 |
| ·免疫动物 | 第50-51页 |
| ·LPBE法检测血清抗体 | 第51页 |
| ·病毒攻击保护实验 | 第51页 |
| ·结果 | 第51-56页 |
| ·重组病毒rBmNPV(P1-2A3C)的构建 | 第51页 |
| ·多聚蛋白在Bm-N细胞中表达结果 | 第51-53页 |
| ·多聚蛋白在蚕体中的表达结果 | 第53页 |
| ·高表达量病毒克隆筛选 | 第53-54页 |
| ·表达时相的测定 | 第54页 |
| ·电镜观察结果 | 第54-55页 |
| ·血清中抗FMDV特异性抗体 | 第55页 |
| ·攻毒保护实验 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 第六章 AsiaⅠ型FMD空衣壳疫苗PD_(50)的测定 | 第58-61页 |
| ·材料与方法 | 第58页 |
| ·疫苗制备及检验 | 第58页 |
| ·试验动物 | 第58页 |
| ·免疫效力试验 | 第58页 |
| ·攻毒及判定标准 | 第58页 |
| ·结果 | 第58-59页 |
| ·免疫效力实验 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-61页 |
| 第七章 全文结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-78页 |
| 附录 | 第78-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 作者简历 | 第103页 |
