| 中文摘要 | 第1-7页 |
| 英文摘要 | 第7-10页 |
| 目录 | 第10-13页 |
| 英文缩略词表 | 第13-16页 |
| 引言 | 第16-17页 |
| 第一部分 研究背景、立论依据及研究方案 | 第17-38页 |
| 一、研究背景与分析 | 第17-36页 |
| 1 RNA干扰及其在肿瘤治疗中的应用 | 第17-26页 |
| ·RNA干扰的发现经过 | 第17-18页 |
| ·RNAi的作用机制 | 第18-20页 |
| ·RNAi的生物学特征 | 第20页 |
| ·制备siRNA的方法 | 第20-22页 |
| ·RNAi在肿瘤基因治疗研究中的应用 | 第22-25页 |
| ·肿瘤的发生发展 | 第22-23页 |
| ·肿瘤的侵袭和转移 | 第23页 |
| ·肿瘤的信号传导 | 第23-24页 |
| ·肿瘤的细胞周期 | 第24页 |
| ·肿瘤的凋亡 | 第24-25页 |
| ·肿瘤血管生成 | 第25页 |
| ·展望 | 第25-26页 |
| 2 Rho GTP酶在肿瘤发生发展中的作用 | 第26-36页 |
| ·Rho GTP酶概况 | 第26-27页 |
| ·Rho GTP酶与肿瘤 | 第27-32页 |
| ·Rho GTP酶在肿瘤组织的表达 | 第27-28页 |
| ·Rho GTP酶与肿瘤生长和转化 | 第28-29页 |
| ·Rho GTP酶信号传导与肿瘤 | 第29页 |
| ·Rho GTP酶与肿瘤的侵袭和转移 | 第29-31页 |
| ·Rho GTP酶与肿瘤凋亡 | 第31-32页 |
| ·Cdc42与肿瘤 | 第32-36页 |
| ·Cdc42的结构 | 第32页 |
| ·Cdc42的生物学作用 | 第32-34页 |
| ·Cdc42在肿瘤发生中的作用 | 第34-36页 |
| 二、立论依据 | 第36页 |
| 三、研究内容及实验方案 | 第36-38页 |
| 第二部分 重组慢病毒表达质粒载体的构建及鉴定 | 第38-54页 |
| 前言 | 第38-40页 |
| 材料与方法 | 第40-48页 |
| 1 实验材料 | 第40-42页 |
| 2 实验方法 | 第42-48页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第42-43页 |
| ·质粒转化(改进法) | 第43页 |
| ·质粒DNA的小量提取 | 第43-44页 |
| ·酶切、电泳鉴定 | 第44页 |
| ·酶切质粒的回收 | 第44-45页 |
| ·模板寡核苷酸片段与载体的连接 | 第45-46页 |
| ·重组载体的转化、小量提取、凝胶电泳、PCR鉴定及测序 | 第46页 |
| ·重组质粒DNA的大量提取与纯化 | 第46-48页 |
| 结果 | 第48-51页 |
| 1 重组慢病毒表达载体的构建 | 第48-49页 |
| 2 重组载体的电泳、PCR及测序鉴定 | 第49-51页 |
| 讨论 | 第51-54页 |
| 第三部分 RNAi介导的Cdc42基因沉默对膀胱癌细胞生物学行为的影响 | 第54-83页 |
| 前言 | 第54-57页 |
| 材料与方法 | 第57-69页 |
| 1 实验材料 | 第57-59页 |
| 2 实验方法 | 第59-69页 |
| ·细胞复苏、培养、消化、传代与冻存 | 第59-60页 |
| ·质粒DNA的包裹 | 第60页 |
| ·转染 | 第60页 |
| ·细胞增殖实验(MTT法) | 第60页 |
| ·肿瘤细胞体外粘附实验 | 第60-61页 |
| ·半定量RT-PCR | 第61-63页 |
| ·细胞周期的流式细胞仪分析 | 第63页 |
| ·凋亡细胞的Hoechst 33258染色 | 第63页 |
| ·凋亡细胞DNA断裂的电泳分析 | 第63-64页 |
| ·Western Blotting | 第64-68页 |
| ·统计学分析 | 第68-69页 |
| 结果 | 第69-79页 |
| 1 总RNA电泳鉴定 | 第69页 |
| 2 Cdc42基因沉默对膀胱癌细胞形态学的影响 | 第69-71页 |
| 3 pSIH-H1-Cdc42-shRNA对Cdc42基因表达的影响 | 第71-73页 |
| 4 Cdc42基因沉默对膀胱癌细胞生长的抑制作用 | 第73-74页 |
| 5 Cdc42基因沉默对膀胱癌细胞生长周期的影响 | 第74-75页 |
| 6 Cdc42基因沉默对膀胱癌细胞凋亡的影响 | 第75-76页 |
| 7 Cdc42基因沉默对膀胱癌细胞粘附性的影响 | 第76-77页 |
| 8 Cdc42基因沉默对STAT3基因表达的影响 | 第77-79页 |
| 讨论 | 第79-83页 |
| 结论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-101页 |
| 附:英文综述 | 第101-117页 |
| 在学期间的研究成果 | 第117-118页 |
| 致谢 | 第118页 |
