| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-37页 |
| ·基因治疗和基因载体 | 第11-15页 |
| ·人类基因组计划(Human Genome Project, HGP) | 第11页 |
| ·基因治疗(gene therapy) | 第11-13页 |
| ·基因载体 | 第13-15页 |
| ·非病毒转基因载体─质粒DNA | 第15-19页 |
| ·质粒DNA概述 | 第15-17页 |
| ·质粒载体 | 第17-18页 |
| ·质粒载体的质量标准 | 第18-19页 |
| ·质粒DNA的稳定性 | 第19-29页 |
| ·质粒DNA的稳定性类型 | 第19-21页 |
| ·质粒DNA稳定性的影响因素 | 第21-27页 |
| ·提高质粒DNA稳定性的方法 | 第27-29页 |
| ·大肠杆菌高密度发酵生产质粒DNA | 第29-35页 |
| ·影响高密度发酵的表观因素 | 第30-32页 |
| ·高密度发酵生产质粒DNA的途径 | 第32-35页 |
| ·课题提出的依据及研究目的 | 第35-37页 |
| ·依据 | 第35-36页 |
| ·研究目的 | 第36-37页 |
| 第二章 材料与方法 | 第37-50页 |
| ·实验材料 | 第37-40页 |
| ·菌种和质粒 | 第37-38页 |
| ·主要原料及试剂 | 第38-39页 |
| ·培养基 | 第39-40页 |
| ·主要实验仪器 | 第40页 |
| ·培养条件 | 第40-41页 |
| ·种子培养条件 | 第40页 |
| ·摇瓶发酵条件 | 第40页 |
| ·发酵罐初始培养条件 | 第40-41页 |
| ·实验方法 | 第41-50页 |
| ·菌体生长量测定 | 第41-43页 |
| ·溶液及分析试剂的配制 | 第43页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第43-45页 |
| ·核酸测定 | 第45页 |
| ·凝胶电泳 | 第45页 |
| ·质粒分离稳定性的测定 | 第45页 |
| ·葡萄糖浓度的测定 | 第45-47页 |
| ·蔗糖浓度的测定 | 第47-48页 |
| ·氨浓度的测定 | 第48-50页 |
| 第三章 质粒DNA的稳定性性质分析 | 第50-55页 |
| ·培养时间对质粒产量及稳定性的影响 | 第50-52页 |
| ·转接次数对质粒产量及稳定性的影响 | 第52-53页 |
| ·选择性压力对质粒产量及稳定性的影响 | 第53-54页 |
| ·本章小结 | 第54-55页 |
| 第四章 重组菌摇瓶培养条件的优化 | 第55-75页 |
| ·培养基种类优化 | 第55-56页 |
| ·碳源优化 | 第56-62页 |
| ·碳源种类对菌体生长和质粒产量的影响 | 第56-57页 |
| ·初始碳源浓度对菌体生长和质粒产量的影响 | 第57-62页 |
| ·氮源优化 | 第62-64页 |
| ·氮源种类对菌体生长和质粒产量的影响 | 第62页 |
| ·初始氮源浓度对菌体生长和质粒产量的影响 | 第62-64页 |
| ·碳氮比对菌体生长和质粒产量的影响 | 第64-65页 |
| ·氨基酸对菌体生长和质粒产量的影响 | 第65-66页 |
| ·培养基配方的优化 | 第66-72页 |
| ·培养基优化前后菌体生长和质粒DNA产量的比较 | 第72-74页 |
| ·本章小结 | 第74-75页 |
| 第五章 发酵罐培养工艺的优化 | 第75-85页 |
| ·间歇发酵 | 第75-76页 |
| ·流加发酵 | 第76-83页 |
| ·对数期流加 | 第77-79页 |
| ·稳定期流加 | 第79-80页 |
| ·pH-stat流加 | 第80-83页 |
| ·本章小结 | 第83-85页 |
| 第六章 结论与展望 | 第85-87页 |
| ·结论 | 第85-86页 |
| ·存在问题及展望 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-95页 |
| 附录 | 第95-114页 |
| 在读期间发表论文 | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115页 |