| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一部分 前言 | 第10-21页 |
| ·HCMV的生物学特征 | 第10-11页 |
| ·HCMV的免疫学特征 | 第11-12页 |
| ·HCMV的病理学特征及其诊断 | 第12-14页 |
| ·HCMV疾病的防控现状 | 第14-15页 |
| ·HCMV疫苗的研究概况 | 第15-19页 |
| ·减毒活疫苗 | 第15页 |
| ·亚单位疫苗 | 第15-16页 |
| ·重组载体疫苗 | 第16-17页 |
| ·多肽表位疫苗 | 第17-18页 |
| ·DNA疫苗 | 第18-19页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第19-21页 |
| 第二部分 实验材料、试剂和仪器 | 第21-24页 |
| ·主要材料 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22-24页 |
| 第三部分 实验方法 | 第24-38页 |
| ·本研究技术路线 | 第24页 |
| ·PVAX1-HCMV_(6EPITOPES)真核细胞表达载体的构建BAM H Ⅰ | 第24-29页 |
| ·pVAX1质粒的制备 | 第24-25页 |
| ·引物设计 | 第25-26页 |
| ·hCMV_(6epitotes)DNA的合成 | 第26-27页 |
| ·重组质粒pVAX1-hCMV_(6epitopes)的构建 | 第27-28页 |
| ·重组质粒pVAX1-hCMV_(6epitopes)的鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组质粒PVAX1-HCMV_(6EPITOPES)-GFP的构建 | 第29-32页 |
| ·GFP片段的制备 | 第29-30页 |
| ·pVAX1-hCMV_(6epitopes)质粒的获得 | 第30页 |
| ·重组质粒pVAX1-hCMV_(6epitopes)-GFP的构建 | 第30-31页 |
| ·重组质粒pVAX1-hCMV_(6epitopes)-GFP的鉴定 | 第31-32页 |
| ·重组质粒PEGFP-HCMV_(6EPITOPES)的构建 | 第32-35页 |
| ·载体质粒pEGFP-N1的获取 | 第32-33页 |
| ·hCMV_(6epitopes)片段的获取 | 第33页 |
| ·重组质粒pEGFP-hCMV_(6epitopes)的构建 | 第33-34页 |
| ·重组质粒pEGFP-hCMV_(6epitopes)的鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组质粒PVAX1-HCMV_(6EPITOPES)-GFP和PEGFP-HCMV_(6EPITOPES)HELA细胞转染 | 第35-36页 |
| ·HCMV_(6EPITOTES)DNA真核表达质粒效能评价 | 第36-38页 |
| ·HLA-A~*0201限制性hCMV阳性个体的筛选 | 第36页 |
| ·用重组质粒pEGFP-hCMV_(6epitopes)转染B细胞 | 第36-37页 |
| ·流式细胞仪分析质粒转染率和hCMV特异性淋巴细胞的活化率 | 第37-38页 |
| 第四部分 实验结果 | 第38-46页 |
| ·HCMV_(6EPITOPES)DNA序列的合成 | 第38页 |
| ·质粒PVAX1-HCMV_(6EPITOPES)的构建结果 | 第38-39页 |
| ·质粒PVAX1-HCMV_(6EPITOPES)-GFP的构建结果 | 第39-40页 |
| ·质粒PEGFP-HCMV_(6EPITOPES)的构建结果 | 第40-41页 |
| ·重组质粒HELA细胞转染结果 | 第41-43页 |
| ·多表位DNA真核表达质粒效能的体外评价 | 第43-46页 |
| ·HLA-A~*0201限制性hCMV阳性个体的筛选结果 | 第43页 |
| ·B细胞转染率分析 | 第43-44页 |
| ·pEGFP-hCMV_(6epitopes)转染的B细胞活化hCMV特异性CTL的分析 | 第44-46页 |
| 第五部分 讨论 | 第46-51页 |
| ·表位的选择 | 第46-47页 |
| ·真核表达质粒的构建 | 第47-48页 |
| ·转染HCMV多表位DNA真核表达质粒的B细胞诱导的HCMV特异性T细胞识别与活化 | 第48-49页 |
| ·实验中的技术问题与不足和改进 | 第49-50页 |
| ·实验中的技术问题 | 第49-50页 |
| ·实验中的不足与改进 | 第50页 |
| ·结论 | 第50-51页 |
| 第六部分 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 | 第57-71页 |
| 附录Ⅰ 本研究中所用常规实验方法 | 第57-59页 |
| 附录Ⅱ 本研究中所用试剂配方 | 第59-62页 |
| 附录Ⅲ 载体质粒pVAX1、PEGFP-N1图谱 | 第62页 |
| 附录Ⅳ 重组质粒测序结果 | 第62-69页 |
| 附录Ⅴ 英文缩略词索引 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
