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花生(Arachis hypogaea L.)蛋白酶抑制剂基因的克隆及再生体系优化

中文摘要第1-6页
Abstract第6-8页
缩略词表第8-11页
第一章 文献综述第11-22页
 1 植物抗虫基因工程概述第11-18页
   ·BT基因第11页
   ·植物中的蛋白酶抑制剂(proteinase inhibitor,PI)第11-14页
     ·PI的分类及作用机理第12-13页
     ·PI的分作用机理及在抗虫基因工程中的作用第13-14页
   ·植物凝集素基因第14-15页
   ·转基因花生第15-18页
     ·转基因花生研究的历程第15-16页
     ·农杆菌介导花生转化技术的研究第16-17页
     ·基因枪介导的花生转化技术的研究第17页
     ·农杆菌介导的花生抗虫基因转化技术研究概况及应用前景第17-18页
 2 花生再生体系的研究概况第18-21页
   ·器官发生再生植株第18-19页
   ·体细胞的诱导第19-21页
 3 实验目的第21-22页
第二章 花生PI基因的克隆第22-41页
 1 实验材料与方法第22-30页
   ·实验材料第22-23页
     ·植物材料第22页
     ·菌株第22页
     ·质粒第22-23页
     ·试剂和试剂盒第23页
   ·实验方法第23-30页
     ·引物设计第23页
     ·花生种子发育过程中总mRNA的提取第23-24页
     ·mRNA的琼脂糖凝胶电泳及其纯度测定第24-25页
     ·花生cDNA的合成及PI基因的克隆第25-26页
     ·PCR产物的琼脂糖凝胶电泳及其片段回收第26-27页
     ·PCR产物测序及NCBI检索第27页
     ·酶切位点的导入第27页
     ·T载体构建第27-30页
 2 实验结果与分析第30-33页
   ·花生mRNA的琼脂糖凝胶电泳及其纯度测定第30-31页
   ·RT-PCR产物的琼脂糖凝胶电泳结果第31-32页
   ·PCR产物测序结果第32页
   ·T载体双酶切琼脂糖凝胶电泳结果第32-33页
 3讨论第33-41页
   ·花生mRNA的提取第33-34页
   ·RT-PCR扩增第34页
   ·PCR产物测序结果及同源性分析第34-41页
第三章 花生再生体系优化第41-60页
 1 实验材料与方法第41-45页
   ·实验材料第41页
     ·植物材料第41页
   ·实验方法第41-45页
     ·培养基及药品的配制第41-43页
     ·种子处理及无菌苗的培养第43页
     ·花生不同外植体愈伤组织的诱导第43-44页
     ·胚轴直接出芽第44页
     ·高浓度2,4-D对花生不同外植体来源愈伤组织诱导的影响第44-45页
 2.结果与分析第45-55页
   ·种子萌发及无菌苗的培养第45页
   ·花生愈伤组织的诱导第45-48页
     ·花生叶片愈伤组织的诱导第46页
     ·花生胚轴愈伤组织的诱导第46-48页
   ·花生子叶不定芽的诱导第48-51页
   ·愈伤组织续代培养、分化及根的诱导第51-52页
   ·外植体直接出芽及再生第52-53页
   ·高浓度2,4-D对花生愈伤组织诱导第53-55页
 3 讨论第55-60页
   ·花生器官发生再生植株途径第55-58页
   ·花生胚性愈伤组织再生植株途径第58-60页
实验小结第60-61页
参考文献第61-68页
致谢第68-69页

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