中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
缩略词表 | 第8-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-22页 |
1 植物抗虫基因工程概述 | 第11-18页 |
·BT基因 | 第11页 |
·植物中的蛋白酶抑制剂(proteinase inhibitor,PI) | 第11-14页 |
·PI的分类及作用机理 | 第12-13页 |
·PI的分作用机理及在抗虫基因工程中的作用 | 第13-14页 |
·植物凝集素基因 | 第14-15页 |
·转基因花生 | 第15-18页 |
·转基因花生研究的历程 | 第15-16页 |
·农杆菌介导花生转化技术的研究 | 第16-17页 |
·基因枪介导的花生转化技术的研究 | 第17页 |
·农杆菌介导的花生抗虫基因转化技术研究概况及应用前景 | 第17-18页 |
2 花生再生体系的研究概况 | 第18-21页 |
·器官发生再生植株 | 第18-19页 |
·体细胞的诱导 | 第19-21页 |
3 实验目的 | 第21-22页 |
第二章 花生PI基因的克隆 | 第22-41页 |
1 实验材料与方法 | 第22-30页 |
·实验材料 | 第22-23页 |
·植物材料 | 第22页 |
·菌株 | 第22页 |
·质粒 | 第22-23页 |
·试剂和试剂盒 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-30页 |
·引物设计 | 第23页 |
·花生种子发育过程中总mRNA的提取 | 第23-24页 |
·mRNA的琼脂糖凝胶电泳及其纯度测定 | 第24-25页 |
·花生cDNA的合成及PI基因的克隆 | 第25-26页 |
·PCR产物的琼脂糖凝胶电泳及其片段回收 | 第26-27页 |
·PCR产物测序及NCBI检索 | 第27页 |
·酶切位点的导入 | 第27页 |
·T载体构建 | 第27-30页 |
2 实验结果与分析 | 第30-33页 |
·花生mRNA的琼脂糖凝胶电泳及其纯度测定 | 第30-31页 |
·RT-PCR产物的琼脂糖凝胶电泳结果 | 第31-32页 |
·PCR产物测序结果 | 第32页 |
·T载体双酶切琼脂糖凝胶电泳结果 | 第32-33页 |
3讨论 | 第33-41页 |
·花生mRNA的提取 | 第33-34页 |
·RT-PCR扩增 | 第34页 |
·PCR产物测序结果及同源性分析 | 第34-41页 |
第三章 花生再生体系优化 | 第41-60页 |
1 实验材料与方法 | 第41-45页 |
·实验材料 | 第41页 |
·植物材料 | 第41页 |
·实验方法 | 第41-45页 |
·培养基及药品的配制 | 第41-43页 |
·种子处理及无菌苗的培养 | 第43页 |
·花生不同外植体愈伤组织的诱导 | 第43-44页 |
·胚轴直接出芽 | 第44页 |
·高浓度2,4-D对花生不同外植体来源愈伤组织诱导的影响 | 第44-45页 |
2.结果与分析 | 第45-55页 |
·种子萌发及无菌苗的培养 | 第45页 |
·花生愈伤组织的诱导 | 第45-48页 |
·花生叶片愈伤组织的诱导 | 第46页 |
·花生胚轴愈伤组织的诱导 | 第46-48页 |
·花生子叶不定芽的诱导 | 第48-51页 |
·愈伤组织续代培养、分化及根的诱导 | 第51-52页 |
·外植体直接出芽及再生 | 第52-53页 |
·高浓度2,4-D对花生愈伤组织诱导 | 第53-55页 |
3 讨论 | 第55-60页 |
·花生器官发生再生植株途径 | 第55-58页 |
·花生胚性愈伤组织再生植株途径 | 第58-60页 |
实验小结 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-68页 |
致谢 | 第68-69页 |