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高频再生的玉米成熟胚遗传转化受体系统的建立

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
缩略语第10-11页
1 前言第11-23页
   ·玉米的组织培养研究进展第11-16页
     ·玉米不同外植体的组织培养第11-15页
     ·影响玉米植株再生的因素第15-16页
   ·玉米遗传转化受体系统的研究第16-18页
     ·原生质体第17页
     ·悬浮培养物第17-18页
     ·胚性愈伤组织第18页
     ·外植体第18页
   ·玉米遗传转化方法的研究第18-21页
     ·电激法第18-19页
     ·PEG介导的转化方法第19页
     ·基因枪法第19-20页
     ·农杆菌介导的转化方法第20页
     ·其它转化方法第20-21页
   ·遗传转化中的报告基因第21页
   ·愈伤组织形成的过程第21-22页
   ·本研究的目的和意义第22-23页
2 材料与方法第23-30页
   ·材料第23-25页
     ·幼胚材料第23页
     ·成熟胚材料第23页
     ·转化用质粒第23页
     ·主要培养基配方第23-25页
   ·方法第25-30页
     ·组织培养方法第25-26页
     ·组织学观察第26-28页
     ·基因枪转化及检测第28-30页
3 结果与分析第30-43页
   ·成熟胚胚性愈伤组织培养体系的建立第30-34页
     ·初级愈伤组织、次级愈伤组织和胚性愈伤组织的形态第30页
     ·成熟胚诱导和继代过程中针对基因型的评价体系第30-33页
     ·根据不同基因型的评价分组确定的主要研究材料第33页
     ·选定试材的成熟胚胚性愈伤组织的诱导情况第33-34页
   ·成熟胚胚性愈伤组织的高频植株再生第34-36页
     ·供试基因型的幼胚胚性愈伤组织的植株再生研究第34页
     ·供试基因型的成熟胚胚性愈伤组织的高频植株再生第34-36页
   ·成熟胚愈伤组织研究过程中的形态学和组织学观察第36-41页
     ·初级愈伤组织的形态学及其组织学观察第36页
     ·次级愈伤组织的形态学及其组织学观察第36-38页
     ·胚性愈伤组织在次级愈伤组织表面的形成及组织切片观察第38页
     ·成熟胚诱导形成的胚性愈伤组织及其组织切片观察第38-40页
     ·成熟胚诱导的胚性愈伤组织分化起始的组织切片观察第40-41页
   ·成熟胚胚性愈伤组织的基因枪转化检测第41-43页
     ·转化pCAMBIA1301的GUS基因表达检测第41-42页
     ·转化pCAMBIA1303的GFP基因表达检测第42-43页
4 讨论第43-49页
   ·应用玉米成熟胚进行研究的优势第43页
   ·次级愈伤组织(pro-embryogenic callus)概念的合理性第43-44页
   ·成熟胚诱导和继代过程中评价体系对成熟胚研究的指导作用第44页
   ·成熟胚诱导胚性愈伤组织过程中的可控制因素第44-45页
     ·取胚芽的时机第44-45页
     ·愈伤组织转皿培养操作细节第45页
     ·AgNO_3对组织培养的作用第45页
   ·成熟胚胚性愈伤组织的再生效率第45-46页
   ·基因型是影响胚性愈伤组织诱导能力的关键因素第46页
   ·组织切片观察对成熟胚组织培养的意义第46-47页
     ·组织切片对成熟胚诱导的胚性愈伤组织的定性第46页
     ·组织切片对成熟胚组织培养研究的指导作用第46-47页
   ·成熟胚诱导的胚性愈伤组织适合作为遗传转化的受体第47页
   ·本研究的主要成果第47页
   ·基于本研究可以开展的下一步工作第47-49页
参考文献第49-57页
致谢第57-58页
附录1 常用培养基组分储备液配制第58页
附录2 6-BA,2,4-D的配制及注意事项第58-59页
附录3 X-GLUC(GUS)染色液配方第59页
附录4 质粒DNA的大量提取(大肠杆菌菌株)第59-60页
附录5 质粒DNA的小量提取第60页

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