摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
缩略语 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-23页 |
·玉米的组织培养研究进展 | 第11-16页 |
·玉米不同外植体的组织培养 | 第11-15页 |
·影响玉米植株再生的因素 | 第15-16页 |
·玉米遗传转化受体系统的研究 | 第16-18页 |
·原生质体 | 第17页 |
·悬浮培养物 | 第17-18页 |
·胚性愈伤组织 | 第18页 |
·外植体 | 第18页 |
·玉米遗传转化方法的研究 | 第18-21页 |
·电激法 | 第18-19页 |
·PEG介导的转化方法 | 第19页 |
·基因枪法 | 第19-20页 |
·农杆菌介导的转化方法 | 第20页 |
·其它转化方法 | 第20-21页 |
·遗传转化中的报告基因 | 第21页 |
·愈伤组织形成的过程 | 第21-22页 |
·本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-30页 |
·材料 | 第23-25页 |
·幼胚材料 | 第23页 |
·成熟胚材料 | 第23页 |
·转化用质粒 | 第23页 |
·主要培养基配方 | 第23-25页 |
·方法 | 第25-30页 |
·组织培养方法 | 第25-26页 |
·组织学观察 | 第26-28页 |
·基因枪转化及检测 | 第28-30页 |
3 结果与分析 | 第30-43页 |
·成熟胚胚性愈伤组织培养体系的建立 | 第30-34页 |
·初级愈伤组织、次级愈伤组织和胚性愈伤组织的形态 | 第30页 |
·成熟胚诱导和继代过程中针对基因型的评价体系 | 第30-33页 |
·根据不同基因型的评价分组确定的主要研究材料 | 第33页 |
·选定试材的成熟胚胚性愈伤组织的诱导情况 | 第33-34页 |
·成熟胚胚性愈伤组织的高频植株再生 | 第34-36页 |
·供试基因型的幼胚胚性愈伤组织的植株再生研究 | 第34页 |
·供试基因型的成熟胚胚性愈伤组织的高频植株再生 | 第34-36页 |
·成熟胚愈伤组织研究过程中的形态学和组织学观察 | 第36-41页 |
·初级愈伤组织的形态学及其组织学观察 | 第36页 |
·次级愈伤组织的形态学及其组织学观察 | 第36-38页 |
·胚性愈伤组织在次级愈伤组织表面的形成及组织切片观察 | 第38页 |
·成熟胚诱导形成的胚性愈伤组织及其组织切片观察 | 第38-40页 |
·成熟胚诱导的胚性愈伤组织分化起始的组织切片观察 | 第40-41页 |
·成熟胚胚性愈伤组织的基因枪转化检测 | 第41-43页 |
·转化pCAMBIA1301的GUS基因表达检测 | 第41-42页 |
·转化pCAMBIA1303的GFP基因表达检测 | 第42-43页 |
4 讨论 | 第43-49页 |
·应用玉米成熟胚进行研究的优势 | 第43页 |
·次级愈伤组织(pro-embryogenic callus)概念的合理性 | 第43-44页 |
·成熟胚诱导和继代过程中评价体系对成熟胚研究的指导作用 | 第44页 |
·成熟胚诱导胚性愈伤组织过程中的可控制因素 | 第44-45页 |
·取胚芽的时机 | 第44-45页 |
·愈伤组织转皿培养操作细节 | 第45页 |
·AgNO_3对组织培养的作用 | 第45页 |
·成熟胚胚性愈伤组织的再生效率 | 第45-46页 |
·基因型是影响胚性愈伤组织诱导能力的关键因素 | 第46页 |
·组织切片观察对成熟胚组织培养的意义 | 第46-47页 |
·组织切片对成熟胚诱导的胚性愈伤组织的定性 | 第46页 |
·组织切片对成熟胚组织培养研究的指导作用 | 第46-47页 |
·成熟胚诱导的胚性愈伤组织适合作为遗传转化的受体 | 第47页 |
·本研究的主要成果 | 第47页 |
·基于本研究可以开展的下一步工作 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
附录1 常用培养基组分储备液配制 | 第58页 |
附录2 6-BA,2,4-D的配制及注意事项 | 第58-59页 |
附录3 X-GLUC(GUS)染色液配方 | 第59页 |
附录4 质粒DNA的大量提取(大肠杆菌菌株) | 第59-60页 |
附录5 质粒DNA的小量提取 | 第60页 |