| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-29页 |
| 1 基因工程的研究进展 | 第13-18页 |
| ·基因工程亚单位疫苗 | 第14-15页 |
| ·基因工程活载体疫苗 | 第15-17页 |
| ·核酸疫苗 | 第17-18页 |
| ·肽疫苗 | 第18页 |
| 2 基因工程乳酸菌的研究进展 | 第18-23页 |
| ·乳酸菌对动物消化道微生态的调节 | 第18-19页 |
| ·为动物机体提供营养、促生长 | 第19页 |
| ·调节免疫系统功能 | 第19-20页 |
| ·乳酸菌与胃肠免疫的关系 | 第20-21页 |
| ·"食品级"乳酸菌表达系统在研制口服黏膜免疫效应乳酸菌制剂中的绝对优势 | 第21-23页 |
| 3 绿色荧光蛋白(GFP)基因在微生物学中的应用 | 第23-29页 |
| ·GFP基因的发展历史 | 第23页 |
| ·GFP的发光特性与机制 | 第23-24页 |
| ·GFP的优点 | 第24-25页 |
| ·GFP在微生物与宿主相互作用研究中的应用 | 第25页 |
| ·GFP在研究开放环境中微生物的应用 | 第25-26页 |
| ·作为转基因植物和动物的筛选标记 | 第26-27页 |
| ·基因表达与蛋白质定位 | 第27页 |
| ·跟踪观察微生物 | 第27-28页 |
| ·GFP的检测方法 | 第28页 |
| ·结语 | 第28-29页 |
| 第二部分 研究内容 | 第29-61页 |
| 实验一 基因工程乳酸菌pW425t-SO7-GFP的构建 | 第29-46页 |
| 1 材料和方法 | 第29-39页 |
| ·材料 | 第29-33页 |
| ·载体与菌株 | 第29-30页 |
| ·工具酶 | 第30页 |
| ·核酸分子量标准 | 第30页 |
| ·蛋白质分子量标准 | 第30页 |
| ·试剂 | 第30页 |
| ·培养基的制备 | 第30-31页 |
| ·溶液的配制 | 第31-32页 |
| ·主要仪器设备 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-39页 |
| ·重组质粒pW425t-SO7-GFP的构建 | 第33-37页 |
| ·pW425t-SO7-GFP重组质粒在乳酸菌中的表达 | 第37-39页 |
| 2 结果 | 第39-44页 |
| ·重组质粒pW425t-SO7-GFP的筛选及鉴定 | 第39-42页 |
| ·乳酸菌中质粒提取结果 | 第42页 |
| ·酶切鉴定GFP基因 | 第42-43页 |
| ·PCR鉴定GFP基因 | 第43页 |
| ·Western-Blot鉴定球虫SO7基因 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-46页 |
| ·构建基因工程乳酸菌的意义 | 第44页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第44页 |
| ·GFP基因的稳定性 | 第44-46页 |
| 实验二 基因工程乳酸菌对柔嫩艾美耳球虫的保护效果检测 | 第46-52页 |
| 1 材料与方法 | 第46-49页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·主要仪器 | 第46页 |
| ·试验动物 | 第46页 |
| ·试验动物饲料 | 第46-47页 |
| ·虫种 | 第47页 |
| ·重组基因工程乳酸菌的制备 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-49页 |
| ·试验分组、免疫和攻虫 | 第47-48页 |
| ·主要指标 | 第48页 |
| ·免疫保护效果的观察 | 第48-49页 |
| 2 结果 | 第49-51页 |
| ·攻虫后临床症状观察及OPG计数 | 第49页 |
| ·增重效果 | 第49-50页 |
| ·盲肠病变记分 | 第50页 |
| ·细胞免疫水平--CD4+、CD8+T淋巴细胞数量变化 | 第50-51页 |
| 3 讨论 | 第51-52页 |
| ·转球虫SO7基因工程乳酸菌的免疫保护力 | 第51-52页 |
| 实验三 基因工程乳酸菌在雏鸡盲肠内定植的研究 | 第52-61页 |
| 1 材料与方法 | 第52-55页 |
| ·材料 | 第52页 |
| ·实验动物及饲料 | 第52页 |
| ·实验菌株 | 第52页 |
| ·主要试剂 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-55页 |
| ·pW425t-SO7-GFP基因工程乳酸菌的培养 | 第53页 |
| ·菌液的稀释 | 第53页 |
| ·饲喂方法 | 第53页 |
| ·样本的采取、稀释 | 第53页 |
| ·乳酸菌的培养方法 | 第53-54页 |
| ·乳酸菌的计数与鉴定 | 第54-55页 |
| 2 结果 | 第55-59页 |
| ·从盲肠内分离的基因工程乳酸菌 | 第55页 |
| ·盲肠内分离的基因工程乳酸菌的鉴定 | 第55-56页 |
| ·基因工程乳酸菌在雏鸡盲肠内的定植规律 | 第56-59页 |
| 3 讨论 | 第59-61页 |
| ·GFP为示踪物在研究非抗性基因工程乳酸菌回归鸡消化道中重要作用 | 第59-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 个人简介 | 第68页 |
