中文摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-14页 |
前言 | 第14-19页 |
第一部分:生物信息学分析预测日本血吸虫抗原分子表位 | 第19-43页 |
摘要 | 第19-20页 |
材料与方法 | 第20-22页 |
1.相关的网络数据库和分析工具 | 第20-21页 |
2.日本血吸虫抗原分子氨基酸序列GenBank序列号 | 第21-22页 |
结果 | 第22-41页 |
1.人类基因型HLA-DRB1*0401、HLA-A*0201的表位预测 | 第22-35页 |
2.C57BL/6小鼠基因型H-2~b的表位预测 | 第35-40页 |
3.小鼠表位预测的最终结果 | 第40-41页 |
讨论 | 第41-43页 |
第二部分:抗日本血吸虫感染表位PDDV的构建 | 第43-66页 |
摘要 | 第43-44页 |
材料与方法 | 第44-59页 |
1.日本血吸虫抗原表位肽编码基因重组真核表达载体的构建及鉴定 | 第44-53页 |
·材料 | 第44-46页 |
·菌株与质粒 | 第44-45页 |
·主要试剂: | 第45页 |
·主要溶液及配制 | 第45-46页 |
·主要设备 | 第46页 |
·方法 | 第46-53页 |
·抗原表位肽编码基因的重组质粒的构建 | 第46-51页 |
·抗原表位肽基因重组质粒的鉴定 | 第51-53页 |
2.PDDV的制备及质量鉴定 | 第53-59页 |
·材料 | 第53-54页 |
·主要试剂 | 第53页 |
·主要仪器 | 第53-54页 |
·方法 | 第54-59页 |
·合成表位肽和K18 | 第54-55页 |
·PDDV的制备 | 第55-57页 |
·PDDV的质量鉴定 | 第57-59页 |
结果 | 第59-64页 |
1.抗原表位肽编码DNA重组质粒的鉴定 | 第59-60页 |
·双酶切鉴定构建的重组真核表达载体 | 第59-60页 |
·测序鉴定构建载体 | 第60页 |
2.PDDV理化特性的鉴定 | 第60-64页 |
·电泳阻滞试验 | 第61页 |
·DNAse Ⅰ保护性实验 | 第61-62页 |
·电镜照片 | 第62-64页 |
讨论 | 第64-66页 |
第三部分:表位PDDV在小鼠模型上的免疫学特性及免疫保护性实验 | 第66-95页 |
摘要 | 第66-68页 |
材料与方法 | 第68-78页 |
1.材料 | 第68-70页 |
·主要试剂 | 第68-69页 |
·主要仪器 | 第69页 |
·主要溶液及配制 | 第69页 |
·实验动物 | 第69-70页 |
2.方法 | 第70-78页 |
·动物免疫 | 第70-71页 |
·淋巴细胞分离培养 | 第71-72页 |
·小时~(51)Cr释放法检测细胞杀伤效应 | 第72-73页 |
·~3H-TdR掺入的检测 | 第73-74页 |
·细胞培养上清中IFN-γ和IL-4的检测 | 第74-75页 |
·血清抗体检测 | 第75-76页 |
·小鼠感染 | 第76页 |
·小鼠减虫率和减卵率的计算 | 第76-77页 |
·小鼠肝脏组织病理组织学观察 | 第77-78页 |
结果 | 第78-92页 |
1.单个表位PDDV的免疫学研究 | 第78-86页 |
·CTL表位PDDV免疫学实验结果 | 第78-80页 |
·Th表位免疫学实验结果 | 第80-83页 |
·B表位免疫学实验结果 | 第83-86页 |
2.混合表位PDDV免疫学实验结果 | 第86-87页 |
3.单个表位和混合表位PDDV的保护力及病理学研究 | 第87-92页 |
·保护力试验结果(表3-2) | 第87-89页 |
·病理学检测 | 第89-92页 |
讨论 | 第92-95页 |
小结 | 第95-97页 |
参考文献 | 第97-109页 |
附录 | 第109-111页 |
致谢 | 第111-112页 |
综述:NK细胞在免疫反应中的作用 | 第112-129页 |