中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
缩略符号 | 第13-14页 |
文献综述 | 第14-23页 |
1 前言 | 第14页 |
2 早期胚胎发育与胚胎基因组的表达 | 第14-16页 |
·早期胚胎发育 | 第14-15页 |
·胚胎基因组的表达 | 第15-16页 |
3 热应激与热休克蛋白70 | 第16-20页 |
·热应激与热休克反应 | 第16-17页 |
·热休克蛋白概述 | 第17页 |
·热休克蛋白70的分类 | 第17-18页 |
·热休克蛋白70的生物学特性 | 第18页 |
·热休克蛋白70表达的基因调控 | 第18-19页 |
·热休克蛋白70的生物学功能 | 第19-20页 |
4 热休克蛋白70与早期胚胎发育 | 第20-23页 |
·体内发育胚胎中热休克蛋白70的表达 | 第21页 |
·体外培养胚胎中热休克蛋白70的表达 | 第21-23页 |
研究内容 | 第23-53页 |
试验一 小鼠Hsp70 cDNA的克隆与序列分析 | 第23-39页 |
1 试验材料 | 第23-24页 |
·试验动物 | 第23页 |
·试剂 | 第23-24页 |
·仪器设备 | 第24页 |
2 试验方法 | 第24-28页 |
·引物的设计与合成 | 第24页 |
·TRIzol法提取肝脏细胞总RNA | 第24-25页 |
·RT-PCR反应 | 第25-26页 |
·Hsp70基因的克隆与序列分析 | 第26-28页 |
3 结果 | 第28-37页 |
·PCR扩增结果 | 第29页 |
·单菌落PCR结果 | 第29页 |
·质粒双酶切鉴定 | 第29-30页 |
·测序结果与同源性分析 | 第30-33页 |
·小鼠Hsp70的氨基酸序列与分子进化分析 | 第33-36页 |
·Hsp70基因的二级结构分析 | 第36-37页 |
4 讨论 | 第37-39页 |
试验二 热应激处理小鼠囊胚Hsp70 mRNA的表达 | 第39-47页 |
1 试验材料 | 第39-40页 |
·试验动物 | 第39-40页 |
·试剂与仪器 | 第40页 |
2 试验方法 | 第40-43页 |
·胚胎体外培养 | 第40页 |
·胚胎分组与体外热应激 | 第40页 |
·RT-PCR检测 | 第40-42页 |
·Hsp70基因片段的克隆与序列分析 | 第42-43页 |
·灰度扫描与数据分析 | 第43页 |
3 结果 | 第43-45页 |
·PCR扩增产物的电泳结果 | 第43-44页 |
·Hsp70基因克隆的鉴定结果 | 第44页 |
·测序结果 | 第44-45页 |
·Hsp70 mRNA表达的半定量分析 | 第45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
试验三 荧光定量RT-PCR检测热应激小鼠囊胚Hsp70 mRNA的表达 | 第47-53页 |
1 试验材料 | 第47页 |
·材料 | 第47页 |
·试剂与仪器 | 第47页 |
2 试验方法 | 第47-48页 |
·胚胎体外培养与热应激 | 第47-48页 |
·引物的设计与合成 | 第48页 |
·胚胎细胞总RNA的提取与反转录 | 第48页 |
·实时荧光定量PCR | 第48页 |
3 结果 | 第48-51页 |
·实时荧光定量RT-PCR荧光曲线与熔解曲线 | 第48-50页 |
·Hsp70基因表达水平的变化 | 第50-51页 |
4 讨论 | 第51-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
附录 | 第60-65页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第65-66页 |
导师组意见 | 第66-67页 |