缩略词表 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 前言 | 第9-22页 |
1 神经肽的概述 | 第9-14页 |
·肽的生物合成 | 第10-11页 |
·肽的表达释放 | 第11-12页 |
·昆虫的神经肽 | 第12-14页 |
2 神经肽的功能 | 第14-15页 |
·神经调节功能 | 第14-15页 |
·激素调节功能 | 第15页 |
3 神经肽的调控 | 第15-21页 |
·转运释放调控 | 第16页 |
·相关转运蛋白 | 第16-19页 |
·潜在调控因子 | 第19-21页 |
4 总结 | 第21-22页 |
第二章 材料方法 | 第22-43页 |
1 材料收集 | 第22页 |
2 常用方法 | 第22-25页 |
·总RNA抽提 | 第22页 |
·mRNA的纯化 | 第22-23页 |
·cDNA反转录 | 第23页 |
·PCR扩增反应 | 第23页 |
·回收连接转化 | 第23-24页 |
·质粒抽提鉴定 | 第24-25页 |
3 RACE反应 | 第25-26页 |
·5'-cDNA扩增 | 第25-26页 |
·3'-cDNA扩增 | 第26页 |
4 Northern blot | 第26-28页 |
·试剂样品准备 | 第26-27页 |
·制胶电泳转膜 | 第27-28页 |
·放射探针标记 | 第28页 |
·杂交洗膜曝光 | 第28页 |
5 Southern blot | 第28-29页 |
·抽基因组DNA | 第28-29页 |
·酶切电泳转膜 | 第29页 |
·杂交洗膜曝光 | 第29页 |
6 RT-PCR | 第29-30页 |
·试剂样品准备 | 第29-30页 |
·电泳转膜杂交 | 第30页 |
7 原位杂交 | 第30-31页 |
·杂交探针准备 | 第30页 |
·杂交反应步骤 | 第30-31页 |
8 蛋白表达 | 第31-36页 |
·大肠杆菌系统 | 第31-34页 |
·杆状病毒系统 | 第34-36页 |
9 抗体制备 | 第36页 |
10 荧光双染 | 第36-37页 |
·荧光抗体标记 | 第36-37页 |
·免疫反应步骤 | 第37页 |
11 Western blot | 第37-39页 |
·蛋白样品制备 | 第37页 |
·制胶电泳染色 | 第37-39页 |
12 组织抽提 | 第39页 |
13 蛋白纯化 | 第39-41页 |
·传统柱层析法 | 第40-41页 |
·RP—HPLC法 | 第41页 |
14 活性分析 | 第41-42页 |
·体内注射活性 | 第41页 |
·体外培养活性 | 第41-42页 |
15 质谱鉴定 | 第42-43页 |
第三章 结果分析 | 第43-64页 |
第一部分 调节滞育激素的脑因子(brain factor)研究 | 第43-51页 |
1 脑因子的初步鉴定 | 第43-46页 |
2 脑因子的分离纯化 | 第46-48页 |
3 脑因子的活性分析 | 第48-50页 |
4 脑因子的序列测定 | 第50-51页 |
第二部分 N-乙基马来酰亚胺敏感因子(NSF)克隆、表达和功能分析 | 第51-64页 |
1 NSF cDNA全长的克隆 | 第51-54页 |
2 NSF mRNA的组织分布 | 第54-57页 |
3 NSF在基因组的拷贝数 | 第57页 |
4 NSF活性结构域的表达 | 第57-58页 |
5 NSF多克隆抗体的制备 | 第58-59页 |
6 NSF,PTTH,DH共定位 | 第59-61页 |
7 NSF mRNA的发育变化 | 第61-63页 |
8 NSF protein的发育变化 | 第63-64页 |
总结展望 | 第64-67页 |
参考文献 | 第67-73页 |
致谢 | 第73-74页 |
附录 | 第74-75页 |