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滞育激素调控因子的分离纯化与N-乙基马来酰亚胺敏感因子的克隆及表达分析

缩略词表第1-7页
摘要第7-8页
Abstract第8-9页
第一章 前言第9-22页
 1 神经肽的概述第9-14页
   ·肽的生物合成第10-11页
   ·肽的表达释放第11-12页
   ·昆虫的神经肽第12-14页
 2 神经肽的功能第14-15页
   ·神经调节功能第14-15页
   ·激素调节功能第15页
 3 神经肽的调控第15-21页
   ·转运释放调控第16页
   ·相关转运蛋白第16-19页
   ·潜在调控因子第19-21页
 4 总结第21-22页
第二章 材料方法第22-43页
 1 材料收集第22页
 2 常用方法第22-25页
   ·总RNA抽提第22页
   ·mRNA的纯化第22-23页
   ·cDNA反转录第23页
   ·PCR扩增反应第23页
   ·回收连接转化第23-24页
   ·质粒抽提鉴定第24-25页
 3 RACE反应第25-26页
   ·5'-cDNA扩增第25-26页
   ·3'-cDNA扩增第26页
 4 Northern blot第26-28页
   ·试剂样品准备第26-27页
   ·制胶电泳转膜第27-28页
   ·放射探针标记第28页
   ·杂交洗膜曝光第28页
 5 Southern blot第28-29页
   ·抽基因组DNA第28-29页
   ·酶切电泳转膜第29页
   ·杂交洗膜曝光第29页
 6 RT-PCR第29-30页
   ·试剂样品准备第29-30页
   ·电泳转膜杂交第30页
 7 原位杂交第30-31页
   ·杂交探针准备第30页
   ·杂交反应步骤第30-31页
 8 蛋白表达第31-36页
   ·大肠杆菌系统第31-34页
   ·杆状病毒系统第34-36页
 9 抗体制备第36页
 10 荧光双染第36-37页
   ·荧光抗体标记第36-37页
   ·免疫反应步骤第37页
 11 Western blot第37-39页
   ·蛋白样品制备第37页
   ·制胶电泳染色第37-39页
 12 组织抽提第39页
 13 蛋白纯化第39-41页
   ·传统柱层析法第40-41页
   ·RP—HPLC法第41页
 14 活性分析第41-42页
   ·体内注射活性第41页
   ·体外培养活性第41-42页
 15 质谱鉴定第42-43页
第三章 结果分析第43-64页
 第一部分 调节滞育激素的脑因子(brain factor)研究第43-51页
  1 脑因子的初步鉴定第43-46页
  2 脑因子的分离纯化第46-48页
  3 脑因子的活性分析第48-50页
  4 脑因子的序列测定第50-51页
 第二部分 N-乙基马来酰亚胺敏感因子(NSF)克隆、表达和功能分析第51-64页
  1 NSF cDNA全长的克隆第51-54页
  2 NSF mRNA的组织分布第54-57页
  3 NSF在基因组的拷贝数第57页
  4 NSF活性结构域的表达第57-58页
  5 NSF多克隆抗体的制备第58-59页
  6 NSF,PTTH,DH共定位第59-61页
  7 NSF mRNA的发育变化第61-63页
  8 NSF protein的发育变化第63-64页
总结展望第64-67页
参考文献第67-73页
致谢第73-74页
附录第74-75页

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