第一章 绪论 | 第1-29页 |
·EIAV的概述 | 第15-20页 |
·EIAV主要基因的变异研究进展 | 第20-24页 |
·EIAV非结构蛋白的研究概况 | 第24-27页 |
·本试验的目的和意义 | 第27-29页 |
第二章 马传染性贫血病毒阿根廷流行毒株前病毒全基因序列测定与分析 | 第29-40页 |
·材料 | 第29-30页 |
·毒株 | 第29页 |
·试验动物 | 第29页 |
·试剂 | 第29页 |
·仪器 | 第29页 |
·质粒的小量提取 | 第29-30页 |
·方法 | 第30-31页 |
·试验动物的接种 | 第30页 |
·马外周血单核细胞的制备 | 第30页 |
·前病毒DNA的提取 | 第30页 |
·前病毒全基因的分段扩增 | 第30-31页 |
·前病毒各基因片段PCR产物的克隆与测序 | 第31页 |
·结果 | 第31-38页 |
·前病毒全基因的分段扩增 | 第31-33页 |
·各段基因的克隆与鉴定 | 第33-35页 |
·Agen-EIAV株各基因片段的序列测定及全基因序列的拼接 | 第35页 |
·Agen-EIAV株与DLV、LN和AF028232株各基因核苷酸序列比较 | 第35-36页 |
·Agen-EIAV株与DLV、LN和AF028232,AF033820,AF016316,M16575株gag核苷酸及其编码蛋白的比较 | 第36-37页 |
·Agen-EIAV株与DLV、LN和AF028232,AF033820,AF016316,M16575株gp90核苷酸及其编码蛋白的比较 | 第37-38页 |
·讨论 | 第38-40页 |
第三章 马传染性贫血病毒阿根廷流行毒株前病毒gag和gp90在马体内的变异分析 | 第40-48页 |
·材料 | 第40-41页 |
·毒株 | 第40页 |
·试验动物 | 第40页 |
·试剂 | 第40-41页 |
·仪器 | 第41页 |
·方法 | 第41-42页 |
·四个发热期马外周血的采集、PBMC的制备及 DNA的提取 | 第41页 |
·四个发热期gag和gp90核苷酸序列的扩增 | 第41-42页 |
·四个发热期gag和gp90PCR产物的克隆与测序 | 第42页 |
·结果 | 第42-46页 |
·四个发热期gag和gp90的PCR扩增 | 第42页 |
·四个发热期gag和gp90的克隆与鉴定 | 第42-43页 |
·四个发热期gag和gp90不同克隆的序列测定 | 第43页 |
·四个发热期gag核苷酸序列比较 | 第43-44页 |
·四个发热期gp90核苷酸序列及氨基酸比较 | 第44-46页 |
·讨论 | 第46-48页 |
第四章 我国马传染性贫血病弱毒疫苗株与美洲流行毒株鉴别诊断方法的建立 | 第48-60页 |
·材料 | 第48-49页 |
·毒株 | 第48页 |
·试验动物 | 第48页 |
·试剂 | 第48页 |
·仪器 | 第48-49页 |
·方法 | 第49-52页 |
·病毒培养 | 第49页 |
·马外周血单核细胞的制备 | 第49页 |
·引物的设计与合成 | 第49-50页 |
·模板的制备 | 第50页 |
·β-actin克隆及序列测定 | 第50页 |
·每个 DNA样本质量的检测 | 第50页 |
·病毒培养物 PCR检测条件的摸索 | 第50-51页 |
·套式多重 PCR鉴别诊断方法的建立 | 第51页 |
·试验动物样品的检测 | 第51页 |
·扩增目的条带的克隆及序列测定 | 第51页 |
·敏感性试验 | 第51-52页 |
·稳定性和重复性试验 | 第52页 |
·结果 | 第52-58页 |
·β-actin基因的扩增 | 第52页 |
·β-actin基因克隆的序列测定 | 第52-53页 |
·病毒接种细胞培养物套式多重PCR鉴别诊断方法的初步建立 | 第53页 |
·扩增目的条带的克隆及序列测定 | 第53页 |
·试验动物 PCR检测条件的优化及样本的检测 | 第53-54页 |
·PCR检测的敏感性试验 | 第54-55页 |
·稳定性和重复性试验 | 第55-57页 |
·动物试验PCR检测结果 | 第57-58页 |
·动物试验 PCR检测与琼脂扩散试验检测结果的比较 | 第58页 |
·讨论 | 第58-60页 |
第五章 马传染性贫血病标记疫苗的研究 | 第60-88页 |
·材料 | 第60-63页 |
·细胞 | 第60页 |
·试剂 | 第60-61页 |
·引物 | 第61-63页 |
·质粒的小量提取 | 第63页 |
·方法 | 第63-72页 |
·驴胎皮肤细胞的制备、培养 | 第63页 |
·重组感染性克隆pLG-5B19和pLG-np2的构建 | 第63-66页 |
·重组感染性克隆pLG-5B19和pLG-np2突变序列的测定 | 第66页 |
·质粒的提取和纯化 | 第66-67页 |
·质粒在细胞培养中的转染和传代 | 第67-68页 |
·重组感染性克隆pLG-5B19和pLG-np2突变序列的测定 | 第68-71页 |
·嵌合病毒复制动力学分析 | 第71-72页 |
·结果 | 第72-85页 |
·重组感染性克隆pLG-5B19和pLG-np2的构建及鉴定 | 第72-75页 |
·重组感染性克隆pLG-5B19和pLG-np2突变序列的测定 | 第75-76页 |
·重组感染性克隆pLG-5B19和pLG-np2的转染 | 第76-82页 |
·衍生病毒在 FDD细胞培养的生物学特性研究 | 第82-85页 |
·讨论 | 第85-88页 |
第六章 结论 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-103页 |
附录 | 第103-116页 |
致谢 | 第116-117页 |
作者简历 | 第117页 |