| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| Ⅰ.前言 | 第10-27页 |
| 1.双生病毒的分类和基本性质 | 第10-12页 |
| ·玉米线条病毒属(Mastrevirus) | 第10-11页 |
| ·介体传播 | 第10-11页 |
| ·症状和细胞病理变化 | 第11页 |
| ·甜菜曲项病毒属(Curtovirus) | 第11页 |
| ·介体传播 | 第11页 |
| ·双生病毒所引起的症状和细胞病理变化 | 第11页 |
| ·菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus) | 第11-12页 |
| ·介体传播 | 第11-12页 |
| ·症状和细胞病理变化 | 第12页 |
| ·番茄伪曲顶病毒属(Topocuvirus) | 第12页 |
| ·介体传播 | 第12页 |
| ·双生病毒所引起的症状和细胞病理变化 | 第12页 |
| 2.双生病毒的检测与鉴定 | 第12-13页 |
| ·血清学鉴定 | 第12-13页 |
| ·核酸杂交检测 | 第13页 |
| ·PCR技术 | 第13页 |
| 3 双生病毒的基因组结构及功能 | 第13-17页 |
| ·玉米线条毒属(Mastrevirus) | 第13-14页 |
| ·基因组结构 | 第13-14页 |
| ·功能 | 第14页 |
| ·甜菜曲项病毒属(Curtovirus) | 第14-15页 |
| ·甜菜曲顶病毒属的基因组结构及功能 | 第14-15页 |
| ·菜豆金色花叶病毒属(Begomovirus) | 第15-17页 |
| ·基因组结构 | 第15页 |
| ·功能 | 第15-17页 |
| ·番茄伪曲顶病毒属(Topocuvirus) | 第17页 |
| ·番茄伪曲顶病毒属的基因组结构及功能 | 第17页 |
| 4.双生病毒的复制 | 第17-18页 |
| 5 双生病毒的转录 | 第18-19页 |
| ·双生病毒转录的特点 | 第18页 |
| ·双生病毒转录的调控 | 第18-19页 |
| ·Rep蛋白的自主调控功能 | 第18-19页 |
| ·AC2／C2的反式激活调控(trans-activation regulation) | 第19页 |
| ·寄主细胞因子的作用 | 第19页 |
| 6.双生病毒的运动 | 第19-22页 |
| ·双组份双生病毒的运动 | 第20页 |
| ·单组分双生病毒的运动 | 第20-22页 |
| 7.双生病毒伴随的小分子DNA | 第22-24页 |
| ·缺陷型小分子DNA | 第22-23页 |
| ·类似nanoviruses的小分子DNA1 | 第23页 |
| ·卫星DNAβ分子 | 第23-24页 |
| 8.双生病毒的进化 | 第24-26页 |
| ·地理隔离 | 第24-25页 |
| ·生物因素 | 第25页 |
| ·病毒间重组 | 第25页 |
| ·属间重组 | 第25页 |
| ·属内重组 | 第25页 |
| ·病毒基因组与其寄主基因组间的重组 | 第25-26页 |
| 9.本课题研究的意义 | 第26-27页 |
| Ⅱ.材料与方法 | 第27-35页 |
| 1 材料 | 第27-28页 |
| ·供试病毒 | 第27页 |
| ·载体和菌株 | 第27页 |
| ·试剂及酶类 | 第27页 |
| ·PCR引物 | 第27-28页 |
| ·供试仪器 | 第28页 |
| 2 实验方法 | 第28-35页 |
| ·植物总DNA提取 | 第28-29页 |
| ·聚合酶链式反应 | 第29-30页 |
| ·PCR扩增部分DNA-A | 第29页 |
| ·PCR扩增近全长DNA-A | 第29页 |
| ·PCR扩增DNA-B保守区域 | 第29-30页 |
| ·PCR扩增DNAβ和DNA1 | 第30页 |
| ·克隆操作 | 第30-33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳及DNA片段的回收 | 第30-31页 |
| ·连接载体 | 第31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31页 |
| ·PCR扩增产物和pMD18-T克隆载体的连接 | 第31页 |
| ·连接反应物对宿主感受态细胞的转化 | 第31页 |
| ·质粒的提取 | 第31-32页 |
| ·重组克隆的PCR鉴定 | 第32页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第32-33页 |
| ·PCR扩增500bp的条带 | 第32页 |
| ·PCR扩增近全长DNA-A | 第32-33页 |
| ·克隆子序列的测定 | 第33页 |
| ·序列分析 | 第33-35页 |
| Ⅲ.结果与分析 | 第35-45页 |
| 1 症状 | 第35页 |
| 2 植物总DNA的提取 | 第35-36页 |
| 3 杂草赛葵上粉虱传双生病毒的检测 | 第36-38页 |
| ·PA／PB扩增Fs1和Fz1的部分DNA-A保守序列 | 第36页 |
| ·PCR扩增DNA-B、DNA-β和DNA-1 | 第36页 |
| ·PA／PB扩增产物的克隆 | 第36-37页 |
| ·测序与分析 | 第37-38页 |
| 4 赛葵上双生病毒的分子鉴定 | 第38-45页 |
| ·PCR扩增Fz1近全长DNA-A及序列测序 | 第38-39页 |
| ·克隆及序列测序 | 第39页 |
| ·Fz1病毒基因组DNA-A结构分析 | 第39-41页 |
| ·Fz1 DNA-A与其它双生病毒的比较 | 第41页 |
| ·Fz1 DNA-A与其它双生病毒的系统进化分析 | 第41-45页 |
| Ⅳ.讨论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-57页 |
| 附录1 试剂和溶液 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59页 |