| 摘要 | 第1-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 第一部分 文献综述 | 第16-32页 |
| 1 转基因植物与环境安全性 | 第16-23页 |
| ·转基因作物的现状 | 第16页 |
| ·转基因作物的安全性问题的提出 | 第16-17页 |
| ·转基因作物对环境的影响 | 第17-23页 |
| ·化学药剂的大量使用 | 第17页 |
| ·基因逃逸 | 第17-19页 |
| ·转基因植物的非靶标效应 | 第19-20页 |
| ·目标害虫的抗性 | 第20-21页 |
| ·新病毒的产生 | 第21-22页 |
| ·标记基因的安全隐患 | 第22页 |
| ·载体骨架序列的安全隐患 | 第22-23页 |
| 2 热诱导的位点专一性重组酶 | 第23-25页 |
| ·位点专一性重组酶 | 第23-24页 |
| ·热休克蛋白基因 | 第24-25页 |
| 3 油菜基因工程研究进展 | 第25-30页 |
| ·油菜的遗传转化方法 | 第25-28页 |
| ·根癌农杆菌介导转化法 | 第26页 |
| ·原生质体转化法 | 第26页 |
| ·激光微束穿刺法 | 第26-27页 |
| ·显微注射法 | 第27页 |
| ·子房注射法 | 第27页 |
| ·基因枪轰击法 | 第27-28页 |
| ·基因工程在油菜遗传改良中的应用 | 第28-30页 |
| ·转抗虫害基因 | 第28页 |
| ·转抗病毒基因 | 第28-29页 |
| ·转抗除草剂基因 | 第29页 |
| ·增加油菜的抗逆性 | 第29-30页 |
| ·品质改良 | 第30页 |
| ·利用植物体生产药用蛋白 | 第30页 |
| 4 本文的研究目的和意义 | 第30-32页 |
| 第二部分 热诱导 FLP重组酶基因删除作用在烟草中的验证 | 第32-46页 |
| 前言 | 第32页 |
| 1 材料与方法 | 第32-39页 |
| ·实验材料 | 第32-35页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·农杆菌菌株及质粒 | 第32-33页 |
| ·主要化学试剂 | 第33页 |
| ·基本培养基 | 第33-34页 |
| ·常用溶液配方 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-39页 |
| ·无菌材料的准备 | 第35页 |
| ·农杆菌的培养及活化 | 第35页 |
| ·遗传转化方法 | 第35页 |
| ·转基因植株的热激处理 | 第35-36页 |
| ·转基因植株的GUS组织化学染色分析 | 第36页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第36-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-45页 |
| ·转基因植株的筛选及 GUS组织化学染色鉴定 | 第39-40页 |
| ·转基因烟草的PCR检测 | 第40页 |
| ·最佳热激条件参数的确定 | 第40-41页 |
| ·GUS组织化学染色分析重组酶系统的基因删除作用 | 第41-43页 |
| ·PCR及 RT-PCR分析重组酶系统的基因删除作用 | 第43-45页 |
| ·FLP基因的PCR扩增分析 | 第43-44页 |
| ·FLP基因的RT-PCR分析 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-46页 |
| 第三部分 重组酶删除转基因油菜外源基因的研究 | 第46-70页 |
| 前言 | 第46页 |
| 1 材料与方法 | 第46-52页 |
| ·实验材料 | 第46-48页 |
| ·供试品种 | 第46页 |
| ·农杆菌菌株及质粒 | 第46-47页 |
| ·主要化学试剂 | 第47页 |
| ·基本培养基 | 第47页 |
| ·常用溶液配方 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-52页 |
| ·无菌材料的准备 | 第48页 |
| ·转化用油菜外植体再生体系的优化 | 第48-49页 |
| ·遗传转化体系的优化 | 第49-50页 |
| ·转基因植株的生根与移栽 | 第50页 |
| ·转基因植株的热激处理 | 第50页 |
| ·转基因植株的GUS活性分析 | 第50-52页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-67页 |
| ·再生体系的优化 | 第52-55页 |
| ·最适分化培养基的选择 | 第52-54页 |
| ·不同基因型油菜子叶、下胚轴、花茎再生能力的差异 | 第54-55页 |
| ·遗传转化体系的优化 | 第55-60页 |
| ·种子萌发培养基对遗传转化的影响 | 第55-56页 |
| ·预培养对遗传转化的影响 | 第56-57页 |
| ·共培养时间对遗传转化的影响 | 第57-58页 |
| ·脱菌培养对遗传转化的影响 | 第58-59页 |
| ·不同外植体遗传转化的影响 | 第59-60页 |
| ·ipt基因对抗性芽诱导的影响 | 第60-61页 |
| ·转基因植株的生根 | 第61-62页 |
| ·转基因植株的检测 | 第62-66页 |
| ·转基因植株的卡那霉素抗性分析 | 第62-63页 |
| ·转基因油菜的GUS化学染色及PCR分子鉴定 | 第63-64页 |
| ·转基因植株的田间鉴定 | 第64-66页 |
| ·转基因油菜的热激处理及外源基因的删除 | 第66-67页 |
| 3 讨论 | 第67-70页 |
| ·油菜组织培养中无菌苗的玻璃化 | 第67-68页 |
| ·转基因假阳性苗 | 第68页 |
| ·转基因油菜的热激处理及外源基因删除 | 第68-69页 |
| ·ipt基因及热诱导FLP重组酶系统基因在油菜基因工程中的应用价值 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 缩写 | 第76-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
| 声明 | 第80-81页 |
| 附注 | 第80-81页 |
| 原创性声明 | 第81页 |
| 关于学位论文使用授权的声明 | 第81页 |
